pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94pharmjournal-1000Research ArticleМЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВANALYTICAL METHODSСтандартизация фармацевтической субстанции препарата ЛХС-1208Standardization of the Pharmaceutical Substance of the Drug LCS-1208https://orcid.org/0000-0002-9200-4492ИгнатьеваЕ. В.IgnatevaE. V.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23.

Elena V. Ignateva.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478.

https://orcid.org/0000-0002-8818-7812ЯрцеваИ. В.YartsevaI. V.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23.

Irina V. Yartseva.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478.

https://orcid.org/0000-0003-3034-750XШпрахЗ. С.ShprakhZ. S.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23; 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Zoya S. Shprakh.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478; 8/2, Trubetskaya str., Moscow, 119991

https://orcid.org/0000-0001-6594-4051БудькоА. П.Bud'koA. P.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23.

Andrej P. Bud'ko.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478.

https://orcid.org/0000-0002-3987-6072ЭктоваЛ. В.EktovaL. V.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23.

Lydya V. Ektova.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478.

https://orcid.org/0000-0003-1125-1932КозинД. А.KozinD. A.

Козин Дмитрий Андреевич.

115478, Москва, Каширское шоссе, д. 23; 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Dmytry A. Kozin.

23, Kashirskoe highway, Moscow, 115478; 8/2, Trubetskaya str., Moscow, 119991

kozin1993@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1704-7828РешетнякВ. Ю.ReshetnyakV. Yu.

119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Vladimir Yu. Reshetnyak.

8/2, Trubetskaya str., Moscow, 119991

https://orcid.org/0000-0002-7424-0627НестероваО. В.NesterovaO. V.

119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Olga V. Nesterova.

8/2, Trubetskaya str., Moscow, 119991

https://orcid.org/0000-0003-1237-1207ПанкратоваЕ. А.PankratovaE. A.

119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Elizaveta A. Pankratova.

8/2, Trubetskaya str., Moscow, 119991

Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина Минздрава России (НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина)National Medical Research Center of Oncology. N.N. BlokhinНациональный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина Минздрава России (НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина); Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет)National Medical Research Center of Oncology. N.N. Blokhin; I.M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет)I.M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)2021270820211038894Copyright © Игнатьева Е.В., Ярцева И.В., Шпрах З.С., Будько А.П., Эктова Л.В., Козин Д.А., Решетняк В.Ю., Нестерова О.В., Панкратова Е.А., 20212021Игнатьева Е.В., Ярцева И.В., Шпрах З.С., Будько А.П., Эктова Л.В., Козин Д.А., Решетняк В.Ю., Нестерова О.В., Панкратова Е.А.Ignateva E.V., Yartseva I.V., Shprakh Z.S., Bud'ko A.P., Ektova L.V., Kozin D.A., Reshetnyak V.Y., Nesterova O.V., Pankratova E.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/1000Введение

Введение. Все больший научный интерес для практической онкологии вызывают производные индолокарбазола. В лаборатории химического синтеза Национального медицинского исследовательского центра онкологии им. Н.Н. Блохина синтезирован ряд N-гликозидов, индоло[2,3-а]карбазола под лабораторным шифром ЛХС. Одним из наиболее перспективных соединений этого класса является ЛХС-1208 - 6-амино-12-(α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-дион. По механизму биологического действия ЛХС-1208 относится к ингибиторам протеинкиназы С и представляет большой интерес для терапии злокачественных новообразований.

Цель

Цель. Химико-фармацевтическая стандартизация фармацевтической субстанции ЛХС-1208.

Материалы и методы

Материалы и методы. Лабораторные образцы фармацевтической субстанции ЛХС-1208. Методы исследования: гравиметрия, спектрофотометрия, поляриметрия, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), ядерная магнитно-резонансная (ЯМР) спектроскопия высокого разрешения и инфракрасная (ИК) спектроскопия.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Оценку качества ЛХС-1208 проводили по показателям, принятым в XIV изданием Государственной фармакопеи Российской Федерации для контроля качества фармацевтических субстанций. ЛХС-1208 - оранжевый аморфный порошок, без запаха; растворим в диметилсульфоксиде (ДМСО) и диметилформамиде (ДМФА); очень мало растворим в спирте этиловом 95 % и практически нерастворим в воде. Подлинность субстанции подтверждается ЯМР- и ИК-спектрами, а также электронными спектрами поглощения. Значения удельного оптического вращения ЛХС-1208 (1 % раствор в ДМФА) укладываются в интервал от +58° до +61°. Все изученные образцы субстанции были свободны от неорганических примесей, сульфатной золы, тяжелых металлов и содержали не более 1,0 % воды, определенной методом титрования по К. Фишеру. Содержание возможных родственных примесей в субстанции ЛХС-1208 и содержание основного действующего вещества определяли методом ВЭЖХ. Исследованные лабораторные образцы фармацевтической субстанции ЛХС-1208 содержали не более 1,0 % любой единичной и не более 3 % суммы неидентифицированных примесей. Содержание основного действующего вещества составило более 97 %.

Заключение

Заключение. В результате проведенной работы были отобраны критерии и параметры качества, а также разработаны методики их определения, позволяющие адекватно оценить качество и стандартность фармацевтической субстанции ЛХС-1208.

Introduction

Introduction. Indolocarbazole derivatives are of increasing scientific interest for practical oncology. A number of N-glycosides, indolo[2,3-a] carbazole under the laboratory code LCS, were synthesized in the laboratory of chemical synthesis of the National Medical Center of Oncology named after N.N. Blokhin. Currently, one of the most promising compounds in this class is LCS-1208, a representative of the arabinoside class of indolo [2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7-dione. According to the mechanism of biological action, LCS-1208 is a protein kinase C inhibitor and is of great interest for the treatment of malignant neoplasms.

Aim

Aim. Chemical and pharmaceutical standardization of the pharmaceutical substance LCS-1208.

Materials and methods

Materials and methods. Laboratory samples of pharmaceutical substance LCS-1208. Methods of investigation: gravimetry, spectrophotometry, polarimetry, high-performance liquid chromatography (HPLC), high-resolution nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy and infrared (IR) spectroscopy.

Results and discussion

Results and discussion. The quality assessment of LCS-1208 was carried out according to the indicators adopted in the XIV edition of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation for quality control of pharmaceutical substances. LCS-1208 - orange amorphous powder, odorless; soluble in dimethylsulfoxide (DMSO) and dimethylformamide (DMF); very slightly soluble in 95 % ethyl alcohol and practically insoluble in water. The authenticity of the substance is confirmed by NMR and IR spectra, as well as electronic absorption spectra. The values of the specific optical rotation of LCS-1208 (1 % solution in DMF) are placed in the range from +58° to +61°. All the studied samples of the substance were free of inorganic impurities, sulphate ash, heavy metals and contained no more than 1.0 % water, determined by the K. Fischer titration method. The content of possible related impurities in the substance LCS-1208 and the content of the main active substance were determined by HPLC. The studied laboratory series of the pharmaceutical substance LCS-1208 contained no more than 1.0 % of any single and no more than 3 % of the total unidentified impurities. The content of the main active substance was more than 97 %.

Conclusion

Conclusion. As a result of the work carried out, quality criteria and parameters were selected and methods for their determination were developed, which allow to adequately assess the quality and standardness of the pharmaceutical substance LCS-1208.

индолокарбазолыанализстандартизацияфармацевтическая субстанцияспектроскопияхроматографияindolocarbazolesanalysisstandardizationpharmaceutical substancesspectrophotometrychromatographyReferencesIssa S., Prandina A., Bedel N., Rongved P., Yous S., Le Borgne M., Bouaziz Z. Carbazole scaffolds in cancer therapy: a review from 2012 to 2018. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. 2019;34(1):1321-1346. DOI: 10.1080/14756366.2019.1640692.Issa S., Prandina A., Bedel N., Rongved P., Yous S., Le Borgne M., Bouaziz Z. Carbazole scaffolds in cancer therapy: a review from 2012 to 2018. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. 2019;34(1):1321-1346. DOI: 10.1080/14756366.2019.1640692.Tong J., Jiang G., Li L., Li Y. Molecular docking and 3D QSAR research of indolocarbazole series as cyclin-dependent kinase inhibitors. Journal of Structural Chemistry. 2018;59(7):1555-1563. DOI: 10.1134/S0022476618070065.Tong J., Jiang G., Li L., Li Y. Molecular docking and 3D QSAR research of indolocarbazole series as cyclin-dependent kinase inhibitors. Journal of Structural Chemistry. 2018;59(7):1555-1563. DOI: 10.1134/S0022476618070065.Janosik T., Rannug A., Rannug U., Wahlstrom N., Slätt J., Bergman J. Chemistry and Properties of Indolocarbazoles. Chemical Reviews. 2018;118(18):9058-9128. DOI: 10.1021/acs.chemrev.8b00186.Janosik T., Rannug A., Rannug U., Wahlstrom N., Slätt J., Bergman J. Chemistry and Properties of Indolocarbazoles. Chemical Reviews. 2018;118(18):9058-9128. DOI: 10.1021/acs.chemrev.8b00186.Cheng X., Zhou B., Liu H., Huo C., Ding W. One new indolocarbazole alkaloid from the Streptomyces sp. A22. Natural Product Research. 2018;32(21):2583-2588. DOI: 10.1080/14786419.2018.1428595.Cheng X., Zhou B., Liu H., Huo C., Ding W. One new indolocarbazole alkaloid from the Streptomyces sp. A22. Natural Product Research. 2018;32(21):2583-2588. DOI: 10.1080/14786419.2018.1428595.Cinelli M. A. Topoisomerase 1B poisons: Over a half-century of drug leads, clinical candidates, and serendipitous discoveries. Medicinal Research Reviews. 2019;39(4):1294-1337. DOI: 10.1002/med.21546.Cinelli M. A. Topoisomerase 1B poisons: Over a half-century of drug leads, clinical candidates, and serendipitous discoveries. Medicinal Research Reviews. 2019;39(4):1294-1337. DOI: 10.1002/med.21546.Wang J., Jin W., Zhou X., Li J., Xu C., Ma Z., Wang J., Qin L., Zhou B., Ding W., Gao T., Yao H., Chen Z. Identification, Structure-Activity Relationships of Marine-Derived Indolocarbazoles, and a Dual PKCθ/δ Inhibitor with Potent Antipancreatic Cancer Efficacy. Journal of Medicinal Chemistry. 2020;63(21):12978-12991. DOI: 10.1021/acs.jmedchem.0c01271.Wang J., Jin W., Zhou X., Li J., Xu C., Ma Z., Wang J., Qin L., Zhou B., Ding W., Gao T., Yao H., Chen Z. Identification, Structure-Activity Relationships of Marine-Derived Indolocarbazoles, and a Dual PKCθ/δ Inhibitor with Potent Antipancreatic Cancer Efficacy. Journal of Medicinal Chemistry. 2020;63(21):12978-12991. DOI: 10.1021/acs.jmedchem.0c01271.Zhou B., Qin L.-L., Ding W.-J., Ma Z.-J. Cytotoxic indolocarbazoles alkaloids from the streptomyces sp. A65. Tetrahedron. 2018;74(7):726-730. DOI: 10.1016/j.tet.2017.12.048.Zhou B., Qin L.-L., Ding W.-J., Ma Z.-J. Cytotoxic indolocarbazoles alkaloids from the streptomyces sp. A65. Tetrahedron. 2018;74(7):726-730. DOI: 10.1016/j.tet.2017.12.048.Yang C. L., Zhang B., Xue W. W., Li W., Xu. Z. F., Shi J., Shen Y., Jiao R. H., Tan R. X., Ge H. M. Discovery, biosynthesis, and heterologous production of loonamycin, a potent anticancer indolocarbazole alkaloid. Organic Letters. 2020;22(12):4665-4669. DOI: 10.1021/acs.orglett.0c01456.Yang C. L., Zhang B., Xue W. W., Li W., Xu. Z. F., Shi J., Shen Y., Jiao R. H., Tan R. X., Ge H. M. Discovery, biosynthesis, and heterologous production of loonamycin, a potent anticancer indolocarbazole alkaloid. Organic Letters. 2020;22(12):4665-4669. DOI: 10.1021/acs.orglett.0c01456.Ektova L. V., Goryunova O. V., Eremina V. A., Tikhonova N. I., Medvedeva L. A. An Improved Method for the Synthesis of the of Indole[2,3-a]Pyrrolo[3,4-c]Carbazole-5,6-Dione N-Glycosides and their Cytotoxic Activity. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2019;53(7):604-609. DOI: 10.1007/s11094-019-02046-4.Ektova L. V., Goryunova O. V., Eremina V. A., Tikhonova N. I., Medvedeva L. A. An Improved Method for the Synthesis of the of Indole[2,3-a]Pyrrolo[3,4-c]Carbazole-5,6-Dione N-Glycosides and their Cytotoxic Activity. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2019;53(7):604-609. DOI: 10.1007/s11094-019-02046-4.Ektova L. V., Eremina V. A., Tikhonova N. I., Plikhtyak I. L., Medvedeva L. A., Yartseva I. V., Moiseeva N. I., Golubeva I. S., Yavorskaya I. P., Bud'ko A. P., Tarasova O. I., Pugacheva R. B. Synthesis and Cytotoxic Activity of Indolo[2,3-a]Pyrrolo[3,4-c]Carbazole-5,7-Dione N-Glycosides Substituted on the Maleimide Nitrogen Atom. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2020;54(5):455-458. DOI: 10.1007/s11094-020-02222-x.Ektova L. V., Eremina V. A., Tikhonova N. I., Plikhtyak I. L., Medvedeva L. A., Yartseva I. V., Moiseeva N. I., Golubeva I. S., Yavorskaya I. P., Bud'ko A. P., Tarasova O. I., Pugacheva R. B. Synthesis and Cytotoxic Activity of Indolo[2,3-a]Pyrrolo[3,4-c]Carbazole-5,7-Dione N-Glycosides Substituted on the Maleimide Nitrogen Atom. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2020;54(5):455-458. DOI: 10.1007/s11094-020-02222-x.Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. 2018. Доступно по: https://minzdrav.gov.ru/poleznye-resursy/xiv-izdanie-gosudarstvennoy-farmakopei-rossiyskoy-federatsii. Ссылка активна на 27.05.2021.Gosudarstvennaya farmakopeya Rossiyskoy Federatsii. XIV izdanie [State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV edition]. 2018. Available at: https://minzdrav.gov.ru/poleznye-resursy/xiv-izdanie-gosudarstvennoy-farmakopei-rossiyskoy-federatsii. Accessed: 27.05.2021. (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.