117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3
20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246
129090, г. Москва, пр-т Мира, д. 13 стр. 1
13/1, Prospekt Mira, Moscow, 129090
129090, г. Москва, пр-т Мира, д. 13 стр. 1
13/1, Prospekt Mira, Moscow, 129090
Введение. Новая коронавирусная инфекция COVID-19 (Coronavirus Disease 2019) – это острое инфекционное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome-related coronavirus 2). Фавипиравир – синтетический противовирусный препарат, применяемый для этиотропной терапии COVID-19. Выпускается в лекарственных формах для перорального и парентерального введения, при этом парентеральный путь введения фавипиравира имеет ряд преимуществ перед пероральным. Разработка и валидация методики количественного определения фавипиравира в плазме крови человека является необходимой процедурой для проведения аналитической части клинического исследования препарата фавипиравира для парентерального введения в виде инфузий, изучения его фармакокинетических параметров и выбора оптимальных доз препарата.
Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения фавипиравира в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием с использованием ультрафиолетового детектора (ВЭЖХ-УФ) для дальнейшего изучения фармакокинетики.
Материалы и методы. Определение фавипиравира в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-УФ при длине волны 323 ± 2 нм. В качестве пробоподготовки был использован способ осаждения метанолом. Внутренний стандарт: ралтегравир. Подвижная фаза: 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в воде с прибавлением 0,08%-го аммиака (элюент А); 0,1%-й раствор муравьиной кислоты, 10%-й раствор воды в ацетонитриле с прибавлением 0,08%-го аммиака (элюент В). Колонка: Phenomenex Kinetex®, C18, 150 × 4,6 мм, 5 мкм. Аналитический диапазон методики: 0,25–200,00 мкг/мл.
Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность (стабильность исходных и рабочих стандартных растворов аналита и внутреннего стандарта; краткосрочная стабильность; стабильность при трехкратной заморозке-разморозке аналита; долгосрочная стабильность аналита в матрице).
Заключение. Разработана и валидирована методика определения фавипиравира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФ. Подтвержденный аналитический диапазон методики составил 0,25–200,00 мкг/мл в плазме крови. Полученный аналитический диапазон позволяет применять разработанную методику для проведения фармакокинетических исследований препаратов фавипиравира.
Introduction. Coronavirus disease (COVID-19) is an acute infectious disease caused by SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome-related coronavirus 2). Favipiravir is a synthetic prodrug with antiviral activity used for the treatment of COVID-19. There are oral and parenteral dosage forms of favipiravir. Compared with oral administration, parenteral administration has some advantages. Developing a method for the determination of favipiravir in human blood plasma is necessary for performing the analytical part of clinical studies of favipiravir for parenteral administration as an infusion, studying pharmacokinetics, and choosing the optimal dosage of the drug.
Aim. The aim of this study is to develop and validate a method for quantitative determination of favipiravir in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) for pharmacokinetic studies.
Materials and methods. Determination of favipiravir in human plasma by HPLC-UV. The UV detection was set at 323 ± 2 nm. The samples were processed by methanol protein precipitation. Internal standard: raltegravir. Mobile phase: 0.1 % formic acid in water with 0.08 % aqueous ammonia (eluent A), 0.1 % formic acid in acetonitrile with 0.08 % aqueous ammonia (eluent B). Column: Phenomenex Kinetex®, C18, 150 × 4.6 mm, 5 μm. Analytical range: 0.25–200.00 μg/mL.
Results and discussion. This method was validated by selectivity, calibration curve, accuracy, precision, spike recovery, the lower limit of quantification, carry-over effect and stability.
Conclusion. We developed and validated the method of quantitative determination of favipiravir in human plasma by HPLC-UV. The analytical range was 0.25–200.00 μg/mL in human plasma. The method could be applied in pharmacokinetics studies of favipiravir.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.