614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2
2, Polevaya str., Perm, 614990
614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2
2, Polevaya str., Perm, 614990
614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2
2, Polevaya str., Perm, 614990
614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2
2, Polevaya str., Perm, 614990
Введение. В связи высокой распространенностью и социальной значимостью грибковых инфекций поиск новых антифунгальных препаратов является актуальным направлением развития современной фармакологии. Одним из важных компонентов доклинических микробиологических исследований, влияющих на конечный результат, являются питательные среды, используемые в процессе научного эксперимента.
Цель. Валидировать использование жидкой среды Сабуро как альтернативы среды RPMI 1640 с глутамином для оптимизации экспериментальных условий определения ПГА новых соединений микрометодом серийных разведений.
Материалы и методы. Для изучения противогрибковой активности (ПГА) новых молекул использовали микрометод двукратных серийных разведений. Изучали ПГА в отношении типового тест-штамма Candida albicans NCTC 885-653. Оценку валидационных параметров осуществляли согласно принципам, изложенным в ОФС.1.1.0021.18 «Валидация микробиологических методик». Для апробации валидированной методики использовали новое соединение из группы производных амидов 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот.
Результаты и обсуждение. Получены результаты, соответствующие критериям приемлемости в отношении изученных валидационных параметров – правильность, прецизионность, линейность, устойчивость, предел количественного обнаружения. Показана возможность использования среды Сабуро для определения противогрибковой активности на примере нового соединения группы производных амидов 4-(гет)арил-2,4-диоксобутановых кислот.
Заключение. В связи с доказанными лучшими ростовыми свойствами испытуемой альтернативной жидкой среды Сабуро в отношении исследуемой культуры Candida albicans и сходимости результатов определения антифунгальной активности при использовании альтернативной и референтной сред, можно рекомендовать жидкую среду Сабуро для использования при определении ПГА впервые синтезированных соединений с использованием микрометода серийных разведений.
Introduction. Due to the high prevalence and social significance of fungal infections, the search for new antifungal drugs is an actual direction t of modern pharmacology. One of the important components of preclinical microbiological studies is the culture media used in the process of a experiment.
Aim. To validate the use Sabouraud liquid medium as an alternative to RPMI 1640 medium to optimize the experimental conditions for the determination of antifungal activity of new compounds by the microserial dilution method.
Materials and methods. The micromethod of two-fold serial dilutions to study the antifungal activity of new molecules was used. Antifungal activity was studied against the reference test strain Candida albicans NCTC 885-653. The evaluation of the validation parameters was carried out according to the principles set forth in the General Pharmacopoeia Monograph.1.1.0021.18 «Validation of microbiological methods». A new compound from the group of 4-(het)aryl-2,4-dioxobutanoic acid amide derivatives was used for test the validated method.
Results and discussion. Results were obtained that meet the acceptance criteria for the studied validation parameters – trueness, precision, linearity, robustness and quantitation limit. The possibility of using Sabouraud's medium for the determination of antifungal activity was shown on the example of a new compound of the group of 4-(het)aryl-2,4-dioxobutanoic acid amide derivatives.
Conclusion. The tested alternative liquid Sabouraud medium can be recommended for use in determining the antifungal activity of the newly synthesized compounds with the microdilutions method because the proven its better growth properties for the investigated yeast strain and the convergence of the results of determining antifungal activity using alternative and reference media.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.