pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2022-11-4(1)-99-104pharmjournal-1405Research ArticleМЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВANALYTICAL METHODSАспекты стандартизации сока травы манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris)Aspects of Standardization in the Juice of the Herbs Alchemilla vulgarishttps://orcid.org/0000-0001-7004-3805ЧеремныхЕ. В.CheremnykhE. V.

614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2

2, Polevaya str., Perm, 614990

Chl1978@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7401-8196ЗоринаЕ. В.ZorinaE. V.

614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2

2, Polevaya str., Perm, 614990

https://orcid.org/0000-0001-5193-3976БелоноговаВ. Д.BelonogovaV. D.

614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2

2, Polevaya str., Perm, 614990

ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России)РоссияFederal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "Perm State Pharmaceutical Academy" of the Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation202227122022114Приложение 199104Copyright © Черемных Е.В., Зорина Е.В., Белоногова В.Д., 20222022Черемных Е.В., Зорина Е.В., Белоногова В.Д.Cheremnykh E.V., Zorina E.V., Belonogova V.D.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/1405Введение

Введение. Особенности химического состава и выявленные фармакологические активности субстанций из свежего сырья манжетки обыкновенной позволяют прогнозировать перспективность использования сока из травы Alchemilla vulgaris в медицинской практике. Создание лекарственных средств на основе соков из свежей травы манжетки предполагает разработку методов их стандартизации.

Цель

Цель. Определить методы качественного анализа для идентификации и количественной оценки основной группы биологически активных веществ сока манжетки обыкновенной.

Материалы и методы

Материалы и методы. Траву манжетки для получения сока, заготавливали в период цветения в различных местах обитания. Качественный состав фенольных соединений сока изучали методом хроматографии на бумаге и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Методику количественного определения разрабатывали и валидировали на спектрофотометре СФ-2000.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Хроматографией на бумаге (ХБ) в соке обнаружены производные коричных и фенолкарбоновых кислот, группы флавоноидов с преобладанием флавонов и флавонолов, в числе доминирующих идентифицирован рутин. Методом ТСХ в системе бутанол : уксусная кислота : вода (Б : У : В) (4 : 1 : 2) добились оптимального разделения веществ и идентифицировали рутин, который предложили в качестве основного вещества при стандартизации сока. Соответствие конфигурации дифференциального спектра комплекса флавоноидов сока манжетки с алюминия хлоридом спектру аналогичного комплекса СО рутина и результаты ТСХ дают основание использовать рутин в качестве стандарта. Оптимальным вариантом при выборе аликвотной части, для количественного определения, достоверные результаты показало использование 0,2 мл сока. Содержание флавоноидов в исследуемых образцах сока составило от 2,15 ± 0,24 до 7,34 ± 0,16 %.

Заключение

Заключение. ТСХ в системе БУВ (4 : 1 : 2) могут быть использованы для установления подлинности сока из травы манжетки. Параметры методики количественного определения разработаны с учетом варьирования соотношения водного компонента и сухого остатка в соке. Методика валидирована и может использоваться для стандартизации сока из травы манжетки обыкновенной. Таксация образцов сока манжетки объективной показала вариабельность содержания флавоноидов в соке в зависимости от условий произрастания.

Introduction

Introduction. The features of the chemical composition and the identified pharmacological activities of substances from fresh raw materials of the Alchemilla vulgaris allow us to predict the prospects for the use of juice from the herb Alchemilla vulgaris in medical practice. The creation of drugs based on juices from fresh herb Alchemilla involves the development of methods for their standardization.

Aim

Aim. To determine the methods of qualitative analysis for the identification and quantitative assessment of the main group of biologically active substances in Alchemilla vulgaris juice.

Materials and methods

Materials and methods. The herb Alchemilla vulgaris for juice production was harvested during the flowering period in various habitats. The qualitative composition of the phenolic compounds of the juice was studied by paper chromatography and thin layer chromatography (TLC). The quantitative determination procedure was developed and validated on an SF-2000 spectrophotometer.

Results and discussion

Results and discussion. Paper chromatography (CP) in the juice revealed derivatives of cinnamic and phenolcarboxylic acids, a group of flavonoids with a predominance of flavones and flavonols, rutin was identified among the dominant ones. The TLC in the butanol : acetic acid : water system (4 : 1 : 2), we achieved optimal separation of substances and identified rutin, which was proposed as the main substance in juice standardization. Correspondence of the configuration of the differential spectrum of the complex of cuff juice flavonoids with aluminum chloride to the spectrum of a similar complex of rutin SS and the results of TLC give grounds to use rutin as a standard. The best option when choosing an aliquot for quantitative determination of reliable results showed the use of 0.2 ml of juice. The content of flavonoids in the studied juice samples ranged from 2.15 ± 0.24 % to 7.34 ± 0.16 %.

Conclusion

Conclusion. TLC in the butanol-acetic acid-water system (4 : 1 : 2) can be used to authenticate the juice from the herb Alchemilla vulgaris. The parameters of the method of quantitative determination are developed taking into account the variation in the ratio of the water component and the dry residue in the juice. The method is valid and can be used to standardize juice from the herb Alchemilla vulgaris. The taxation of Alchemilla vulgaris juice samples showed the variability of the content of flavonoids in the juice depending on the growing conditions.

спектрофотометрияAlchemilla vulgarisсок манжеткифлавоноидырутинspectrophotometryAlchemilla vulgarisjuiceflavonoidsrutinИсследование проведено при финансовой поддержке Пермского научно-образовательного центра «Рациональное недропользование», 2022 год.The study was carried out with the financial support of the Perm Scientific and Educational Center "Rational Subsoil Use", 2022.ReferencesЛобанова И. Е., Высочина Г. И. , Мазуркова Н. А., Кукушкина Т. А., Филиппова Е. И. Виды рода Alchemilla L. (Rosaceae): химический состав, биологическая активность, использование в медицине (обзор). Химия растительного сырья. 2019;1:5–22. DOI: 10.14258/jcprm.2019014032.Lobanova I. E., Vysochina G. I., Mazurkova N. A., Kukushkina T. A., Filippova E. I. Species of the genus Alchemilla L. (Rosaceae): chemical composition, biological activity and use in medicine (review). Chemistry of Plant Raw Material. 2019;1:5–22. (In Russ.) DOI: 10.14258/jcprm.2019014032.Бояршинов В. Д., Зорина Е. В. Сравнительный анализ химического состава травы культивированного вида манжетка мягкая (Alchemilla mollis (Buser) Rothm.) И дикорастущего манжетка обыкновенная (Alchemilla vulgaris l.s.I). Химия растительного сырья. 2022;1:115–122. DOI: 10.14258/jcprm.20220110291.Boiarshinov V. D., Zorina E. V. Comparative analysis of the chemical composition of herb cultivated Alchemilla mollis and wild-growing Alchemilla vulgaris. Chemistry of Plant Raw Material. 2022;1:115–122. (In Russ.) DOI: 10.14258/jcprm.20220110291.Живетьев М. А., Быбин В. А., Кочерыгина Е. В., Семенова Н. В., Путилина Т. Е., Дударева Л. В., Граскова И. А., Маркова Ю. А. Антимикробное действие экстрактов лекарственных растений Andromeda polyfolia и Alchemilla subcrenata. Химия растительного сырья. 2018;4:149–157 DOI: 10.14258/jcprm.2018043846.Zhivetyev М. А., Bybin V. А., Kocherygina Е. V., Semenova N. V., Putilina T. Е., Dudareva L. V., Graskova I. А., Markova Y. А. Antimicrobial activity of medicinal plant extracts Andromeda polyfolia and Alchemilla subcrenata. Chemistry of Plant Raw Material. 2018;4:149–157. (In Russ.) DOI: 10.14258/jcprm.2018043846.Зорина Е. В. Фармакогностическое изучение видов рода Alchemella L. Пермского края. Дис. ... канд. фарм. наук. Пермь; 2009. 217 с. Доступно по: https://www.dissercat.com/content/farmakognosticheskoe-izuchenie-vidov-roda-alchemilla-l-permskogo-kraya. Ссылка активна на 10.09.2022Zorina E. V. Pharmacognostic study of species of the genus Alchemilla L. Perm region. [Dissertation]. Perm; 2009. 217 p. Available at: https://www.dissercat.com/content/farmakognosticheskoe-izuchenie-vidov-roda-alchemilla-l-permskogo-kraya. Accessed: 10.09.2022. (In Russ.)Юшкова Т. А., Зорина Е. В., Белоногова В. Д. Оценка антидиабетической активности экстракта травы Alchemilla vulgaris. Дневник казанской медицинской школы. 2017;3(17):49–53.Yushkova T. A., Zorina E. V., Belonogova V. D. Evaluation of antidiabetic activity of the herb extract Alchemilla vulgaris. Diary of the Kazan Medical School. 2017;3(17):49–53. (In Russ.)Шилова И. В., Суслов Н. И., Самылина И. А., Баева В. М., Лазарева Н. Б., Мазин Е. В. Нейропротекторные свойства настоя манжетки обыкновенной. Химико-фармацевтический журнал. 2019;53(11):37–41. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-11-37-41.Shilova I. V., Suslov N. I., Samylina I. A., Baeva V. M., Lazareva N. B., Mazin E. V. Neuroprotective properties of common cuff infusion. Chemical and Pharmaceutical journal. 2019;53(11):37–41. (In Russ.) DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-11-37-41.Баева В. М. Фармакогностическое изучение лекарственных растений с использованием молекулярно-биологических методов. Автореф. дис. ... докт. фарм. наук. М.; 2009. 48 с.Baeva V. M. Pharmacognostic study of medicinal plants using molecular biological methods. [Dissertation]. Moscow; 2009. 48 p. (In Russ.)El-Hadidy E. M., Refat O. G., Halaby M. S., Elmetwaly E. M., Omar Aya A. A. Protective Effect on Lipids Profile of Lion’s Foot (Alchemilla Vulgaris) Leaves against Ccl4Toxicity and its Fortified to Guava and Mango Pulp. International Journal of Food Science, Nutrition and Dietetics. 2019.8(1):394–400. DOI: 10.19070/2326-3350-1900070.El-Hadidy E. M., Refat O. G., Halaby M. S., Elmetwaly E. M., Omar Aya A. A. Protective Effect on Lipids Profile of Lion’s Foot (Alchemilla Vulgaris) Leaves against Ccl4Toxicity and its Fortified to Guava and Mango Pulp. International Journal of Food Science, Nutrition and Dietetics. 2019.8(1):394–400. DOI: 10.19070/2326-3350-1900070.Vlaisavljevic S., Jelača S., Zengin G., Mimica-Dukić N., Berežni S., Miljić M., Stevanovic Z. D. Alchemilla vulgaris agg. (Lady’s mantle) from central Balkan: antioxidant, anticancer and enzyme inhibition properties. RSC Advances. 2019;9(64):37474–37483. DOI: 10.1039/C9RA08231J.Vlaisavljevic S., Jelača S., Zengin G., Mimica-Dukić N., Berežni S., Miljić M., Stevanovic Z. D. Alchemilla vulgaris agg. (Lady’s mantle) from central Balkan: antioxidant, anticancer and enzyme inhibition properties. RSC Advances. 2019;9(64):37474–37483. DOI: 10.1039/C9RA08231J.Jurić T., Stanković J. S. K., Rosic G., Selakovic D., Joksimović J., Mišić D., Stanković V. D., Mihailović V. Protective effects of Alchemilla vulgaris L. extracts against cisplatin-induced toxicological alterations in rats. South African Journal of Botany. 2020;128:141–151. DOI: 10.1016/j.sajb.2019.09.010.Jurić T., Stanković J. S. K., Rosic G., Selakovic D., Joksimović J., Mišić D., Stanković V. D., Mihailović V. Protective effects of Alchemilla vulgaris L. extracts against cisplatin-induced toxicological alterations in rats. South African Journal of Botany. 2020;128:141–151. DOI: 10.1016/j.sajb.2019.09.010.Шилова И. В., Суслов Н. И., Самылина И. А., Баева В. М., Лазарева Н. Б., Мазин Е. В. Нейропротекторные свойства настоя манжетки обыкновенной. Химико-фармацевтический журнал. 2019;53(11):37–41. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-11-37-41Shilova I. V., Suslov N. I., Samylina I. A., Baeva V. M., Lazareva N. B., Mazin E. V. Neuroprotective properties of the infusion of the common cuff. Chemico-pharmaceutical journal. 2019;53(11):37–41. (In Russ.) DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-11-37-41.Ibrahim O. H. M., Abo-Elyousr K. A. M., Asiry K. A., Alhakamy N. A., Mousa M. A. A. Phytochemical Characterization, Antimicrobial Activity and In Vitro Antiproliferative Potential of Alchemilla vulgaris Auct Root Extract against Prostate (PC-3), Breast (MCF-7) and Colorectal Adenocarcinoma (Caco-2) Cancer Cell Lines. Plants. 2022;11(16):2140. DOI: 10.3390/plants11162140.Ibrahim O. H. M., Abo-Elyousr K. A. M., Asiry K. A., Alhakamy N. A., Mousa M. A. A. Phytochemical Characterization, Antimicrobial Activity and In Vitro Antiproliferative Potential of Alchemilla vulgaris Auct Root Extract against Prostate (PC-3), Breast (MCF-7) and Colorectal Adenocarcinoma (Caco-2) Cancer Cell Lines. Plants. 2022;11(16):2140. DOI: 10.3390/plants11162140.Куркин В. А., Зайцева Е. Н., Правдивцева О. Е., Шайхутдинов И. Х. Сок из свежих плодов боярышника мягковатого, обладающий диуретической активностью. Патент РФ на изобретение № 2019114928. Заявл. 15.05.2019. Бюл. № 24. Доступно по: https://yandex.ru/patents/doc/RU2698325C1_20190826. Ссылка активна на 20.09. 2022Kurkin V. A., Zaitseva E. N., Pravdivtseva O. E., Shaikhutdinov I. Kh. Juice from fresh fruits of hawthorn softish, with diuretic activity. Patent RUS No. 2019114928. Application 15.05.2019. Byul. No. 24. Available at: https://yandex.ru/patents/doc/RU2698325C1_20190826. Accessed: 20.09.2022. (In Russ.)Мазуркова Н. А., Проценко М. А., Филиппова Е. И., Кукушкина Т. А., Высочина Г. И., Лобанова И. Е., Мазурков О. Ю., Шишкина Л. Н., Агафонов А. П. Исследование противовирусной активности экспериментальных образцов препаратов, полученных из травы и корней Alchemilla vulgaris L. в отношении вирусов осповакцины и оспы мышей. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2019;8(4):9–15. DOI: 10.33380/2305-2066-2019-8-4-9-15.Mazurkova N. A., Protsenko M. A., Filippova E. I., Kukushkina T. A., Vysochina G. I., Lobanova I. E., Mazurkov O. Yu., Shishkina L. N., Agafonov A. P. Study of antiviral activity of experimental samples of drugs obtained from grass and roots of Alchemilla vulgaris L. against smallpox vaccine viruses and smallpox of mice. Development and registration of medicines. 2019;8(4):9–15 (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2019-8-4-9-15.Бадальян З. В., Темирбулатова А. М., Степанова Э. Ф. Разработка технологии и фармакологические исследования нативного сока подорожника. Известия Самарского научного центра РАН. 2014;1–3:718–720.Badalyan Z. V., Temirbulatova A. M., Stepanova E. F. Development of technology and pharmacological studies of native psyllium juice. Proceedings of the Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences. 2014;1–3:718–720. (In Russ.)Фатыхова Д. Г., Карамова Н. С., Абдрахимова Й. Р., Ильинская О. Н. Исследование антигенотоксических свойств соков растений Chelidonium majus L., Plantago major L. и Tussilago farfara L. Экологическая генетика. 2010;8(2):56–65. DOI: 10.17816/ecogen8256-65.Fatykhova D. G., Karamova N. S., Abdrakhimova Y. R., Ilyinskaya O. N. Study of the antigenotoxic properties of plant juices Chelidonium majus L., Plantago major L. and Tussilago farfara L. Ecological genetics. 2010;8(2):56–65. (In Russ.) DOI: 10.17816/ecogen8256-65.Лежнева Л. П. Реализация лечебных свойств фитокомплекса из свежесобранных листьев крапивы при разработке лекарственных форм. Современные проблемы науки и образования. 2011;2:24.Lezhneva L. P. Realization of medical properties of phytocomplex from fresh nettle leaves by working out of medicinals forms. Modern problems of science and education. 2011;2:24. (In Russ.)Оленников Д. Н., Зилфикаров И. Н., Торопова А. А., Ибрагимов Т. А. Химический состав сока каллизии душистой (callisia fragrans wood.) и его антиоксидантная активность (in vitro). Химия растительного сырья. 2008;4:95–100. DOI: 10.24412/Fdio0DXS2bs.Olennikov D. N., Zilfikarov I. N., Toropova A. A., Ibragimov T. A. Chemical composition of Callisia fragrans wood. juice and its antioxidant activity (in vitro). Chemistry of plant raw materials. 2008;4:95–100. (In Russ.) DOI: 10.24412/Fdio0DXS2bs.Бородина А. В., Юшкова Т. А., Зорина Е. В. Изучение психомоторной активности сока манжетки обыкновенной. В сб.: Материалы IX Российской (итоговой) научно-практической конференции с международным участием студентов и молодых ученых «Авиценна-2018». Новосибирск: ИПЦ НГМУ; 2018. Т. 2. С. 331–332.Borodina A. V., Yushkova T. A., Zorina E. V. The study of the psychomotor activity of the juice of the cuff ordinary. In: Proceedings of the IX Russian (final) scientific and practical conference with international participation of students and young scientists "Avicenna-2018". Novosibirsk: CPI NSMU; 2018. V. 2. P. 331–332. (In Russ.)Черемных Е. В., Зорина Е. В., Белоногова В. Д. Разработка показателей качества свежей травы манжетки обыкновенной. В сб.: Научно-практическая конференция с международным участием «Создание новых лекарств – от идеи до производства». 15 декабря 2021 года. Пермь: ПГФА; 2021. С. 118–121.Cheremnykh E. V., Zorina E. V., Belonogova V. D. Development of indicators of the quality of the fresh grass of the common mantle. In: Scientific and practical conference with international participation "Creation of new drugs – from idea to production". December 15, 2021. Perm: PGFA; 2021. P. 118–121. (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.