410012, г. Саратов, ул. Б. Казачья, д. 112
112, B. Kazachya str., Saratov, 410012
410012, г. Саратов, ул. Б. Казачья, д. 112
112, B. Kazachya str., Saratov, 410012
119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2
8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991
119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2
8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991
119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2
8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991
119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2
8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991
119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2
8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991
Введение. Перспективными источниками биологически активных соединений (БАС) являются экстракты, полученные из различных морфологических частей растений многочисленного рода Astragalus L. Одними из основных групп БАС, выделенных из растений этого рода, являются флавоноиды, сапонины и полисахариды. Достаточно изученными являются Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge) и Astragalus mongholicus Bge., экстракты которых обладают широким спектром фармакологической активности. Расширение номенклатуры лекарственного растительного сырья и исследование групп БАС, определяющих основные фармакологические эффекты, являются актуальными исследованиями в фармакогнозии. С этой точки зрения представляют интерес малоизученные виды астрагала (Astragalus henningii (Stev.) Klok., Astragalus testiculatus Pall., Astragalus varius S.G. Gmel., Astragalus dasyanthus Pall.), массово произрастающие на территории Поволжья.
Цель. Выделение и идентификация 5-ти агликонов флавоноидов в гидролизатах водно-спиртовых извлечений из травы астрагала: A. henningii, A. testiculatus, A.varius, A. dasyanthus методом ВЭЖХ/УФ.
Материалы и методы. Объектами исследования являлась трава четырех видов астрагала (A. henningii, A. testiculatus, A.varius, A. dasyanthus), заготовленная в период массового цветения на территории Саратовской области и высушенная до воздушно-сухого состояния. Для изучения состава фенольных соединений проводили экстракцию 70%-м этиловым спиртом в соотношении сырье : экстрагент (1 : 10) путем настаивания в течение 7 дней. Кислотный гидролиз проводили хлористоводородной кислотой 37 % при нагревании в течение 40 минут. Полученные гидролизаты анализировали на хроматографе Agilent 1260 (Agilent Technologies, США) с диодно-матричным детектором, ручным вводом проб (ручной инжектор Agilent G1328C, Agilent Technologies США) и системой для сбора и обработки хроматографических данных Agilent OpenLab CDS по индивидуально подобранному градиенту элюирования подвижной фазы (0,1%-й раствор ортофосфорной кислоты/ацетонитрил). Соединения в гидролизатах идентифицировали по временам удерживания и УФ-спектрам смеси стандартных образцов (СО): кверцетина, изорамнетина, лютеолина, кемпферола и апигенина.
Результаты и обсуждение. Подобран градиент элюирования для одновременного определения 5 агликонов флавоноидов с единичным временем анализа 13 минут. Данные условия позволили идентифицировать соединения в гидролизатах водно-спиртовых извлечений четырёх видов астрагала. Лютеолин, кверцетин и апигенин обнаружены в гидролизатах A. henningii, A. testiculatus, A. varius, изорамнетин и кемпферол обнаружены в A. henningii и A. varius. Ни один из анализируемых агликонов не найден в гидролизате A. dasyanthus.
Заключение. После предварительного подбора оптимальных условий хроматографического разделения смеси 5 агликонов флавоноидов были проанализированы гидролизаты четырех видов астрагала. Полученные данные указывают на перспективность дальнейшего изучения химического состава астрагалов и подтверждают целесообразность их использования для получения новых фитопрепаратов.
Introduction. Promising sources of biologically active compounds (BAS) are extracts obtained from various morphological parts of plants of the numerous genus Astragalus L. One of the main groups of BAS isolated from plants of this genus are flavonoids, saponins, and polysaccharides. Sufficiently studied are Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge) and Astragalus mongholicus Bge., whose extracts have a wide range of pharmacological activity. Expansion of the nomenclature of medicinal plant materials and the study of BAS groups that determine the main pharmacological effects are topical studies in pharmacognosy. From this point of view, little-studied species of Astragalus (Astragalus henningii (Stev.) Klok., Astragalus testiculatus Pall., Astragalus varius S.G. Gmel., Astragalus dasyanthus Pall.), massively growing in the Volga region, are of interest.
Aim. Isolation and identification of 5 aglycones of flavonoids in hydrolysates of water-alcohol extracts from Astragalus herb: A. henningii, A. testiculatus, A.varius, A. dasyanthus by HPLC/UV.
Materials and methods. The objects of the study were the herb of four types of Astragalus (A. henningii, A. testiculatus, A.varius, A. dasyanthus), harvested during the period of mass flowering in the Saratov region and dried to an air-dry state. To study the composition of phenolic compounds, extraction was carried out with 70 % ethanol in the ratio of raw material : extracting agent 1 : 10 by infusion for 7 days. Acid hydrolysis was carried out with hydrochloric acid 37 % with heating for 40 min. The resulting hydrolysates were analyzed on an Agilent 1260 chromatograph (Agilent Technologies, USA) with a diode array detector, manual sample injection (Agilent G1328C manual injector, Agilent Technologies, USA) and an Agilent OpenLab CDS chromatographic data collection and processing system using an individually selected elution gradient of the mobile phase (0.1 % solution of orthophosphoric acids/acetonitrile). Compounds in the hydrolysates were identified by the retention times and UV spectra of a mixture of reference standards (RS) of quercetin, isorhamnetin, luteolin, kaempferol, and apigenin.
Results and discussion. An elution gradient was selected for one time determination of 5 aglycones of flavonoids with a single analysis time of 13 minutes. These conditions made it possible to identify compounds in the hydrolyzates of water-alcohol extracts of four types of Astragalus. Luteolin, quercetin and apigenin were found in hydrolyzates of A. henningii, A. testiculatus and A. varius; isorhamnetin and kaempferol were found in A. henningii and A. varius. None of the analyzed aglycones was found in the A. dasyanthus hydrolyzate.
Conclusion. After preliminary selection of the optimal conditions for the chromatographic separation of a mixture of 5 aglycones of flavonoids, hydrolysates of four types of Astragalus were analyzed. The data obtained indicate the prospects for further study of the chemical composition of Astragalus and confirm the expediency of their use for obtaining of new herbal remedies.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.