pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2023-12-3-134-142pharmjournal-1552Research ArticleМЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВANALYTICAL METHODSИдентификация и количественное определение флавоноидов методом ВЭЖХ-УФ в сырье некоторых представителей рода Щавель (Rumex) трех сроков вегетацииIdentification and Quantitative Determination of Flavonoids by HPLC-UV Method in the Raw Materials of Some Representatives of the Genus Rumex of Three Vegetation Timehttps://orcid.org/0000-0002-9960-6699ПолуяновА. М.PoluyanovA. M.

117246, г. Москва, Научный проезд, д. 19; 117149, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8; 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

19, Nauchny proezd, Moscow, 117246; 8, Simferopol Boulevard, Moscow, 117149; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

a.poluyanov@scientific-compliance.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7500-5880СоколоваА. Ю.SokolovaA. Yu.

117246, г. Москва, Научный проезд, д. 19; 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

19, Nauchny proezd, Moscow, 117246; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

https://orcid.org/0009-0003-8969-8854КойноваА.-Д.KoynovaA.-D.

117246, г. Москва, Научный проезд, д. 19; 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

19, Nauchny proezd, Moscow, 117246; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

https://orcid.org/0009-0001-7712-3418КуликоваС. Д.KulikovaS. D.

117246, г. Москва, Научный проезд, д. 19; 117149, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8; 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

19, Nauchny proezd, Moscow, 117246; 8, Simferopol Boulevard, Moscow, 117149; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

https://orcid.org/0000-0002-4183-7822МалашенкоЕ. А.MalashenkoE. A.

117149, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8; 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8, Simferopol Boulevard, Moscow, 117149; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

https://orcid.org/0000-0003-1591-4019БобковаН. В.BobkovaN. V.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2; 119192, г. Москва, Ломоносовский пр-т, д. 27, корп. 1

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991;27/1, Lomonosovsky prospect, Moscow, 119192

Общество с ограниченной ответственностью «Сайнтифик Комплайнс» (ООО «СК»); Общество с ограниченной ответственностью «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»); Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)LLC "Scientific Compliance" (LLC «SС»); LLC "Center for Pharmaceutical Analytics" (LLC «CPHA»); I. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)Общество с ограниченной ответственностью «Сайнтифик Комплайнс» (ООО «СК»); Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)LLC "Scientific Compliance" (LLC «SС»); I. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)Общество с ограниченной ответственностью «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»); Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)LLC "Center for Pharmaceutical Analytics" (LLC «CPHA»); I. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет); Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова» (МГУ имени М. В. Ломоносова). Факультет фундаментальной медициныI. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University); Lomonosov Moscow State University. Faculty of Fundamental Medicine202330082023123134142Copyright © Полуянов А.М., Соколова А.Ю., Койнова А., Куликова С.Д., Малашенко Е.А., Бобкова Н.В., 20232023Полуянов А.М., Соколова А.Ю., Койнова А., Куликова С.Д., Малашенко Е.А., Бобкова Н.В.Poluyanov A.M., Sokolova A.Y., Koynova A., Kulikova S.D., Malashenko E.A., Bobkova N.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/1552Введение

Введение. Изучение динамики накопления биологически активных веществ (далее – БАВ) применительно к фенологическим фазам развития растений представляет большой научный и практический интерес. Количественное содержание агликонов и гликозидов флавоноидов зависит от жизненного цикла растения и фазы его вегетации.

Цель

Цель. Идентификация и количественное определение флавоноидов в подземных органах Rumex confertus Willd., Rumex aquaticus L., Rumex crispus L. и Rumex obtusifolius L., собранных в разные фазы вегетации.

Материалы и методы

Материалы и методы. Извлечения из подземных органов изучаемых растений были получены по методике из фармакопейной статьи на R. confertus. Хроматографическое разделение и детектирование осуществляли на высокоэффективном жидкостном хроматографе Nexera-i LC-2040 (Shimadzu Corporation, Япония). Хроматограф оснащён колоночным термостатом, хроматографической колонкой Grace HPLC-COLUMN 250 × 4,6 мм платина C8-EPS 5 мм (Grace, США) и колонкой Guard Phenomenex SecurityGuardTM Cartridges Widepore C18 4 × 3,0 мм, дегазатором, автосамплером (объем ввода: 10 мкл) и ультрафиолетовым детектором. Детектирование проводили при длине волны λ = 365 ± 2 нм. Подвижной фазой была смесь 0,1%-й фосфорной кислоты в воде (об./об.) (элюент А); ацетонитрил (элюент В), скорость потока: 0,9 мл/мин.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Все исследуемые объекты были проанализированы, с помощью внешнего стандарта была подтверждена подлинность содержащихся веществ и рассчитано их количественное содержание. Для веществ, которые были идентифицированы – проведена количественная оценка, среди них: 3-O-рутинозид кверцитина (рутин), 3-O-рутинозид изорамнитина (нарциссин), 3-O-гликозид кемпферола (астрагалин), лютеолин, кемпферол и изорамнитин. 7-O-гликозид лютеолина (цинарозид) и 7-O-β-D-гликозид апигенина (космосиин) не обнаружены. Наибольший вклад в общее содержание флавоноидов вносит агликон – лютеолин. Отмечено, что этот агликон содержится в большем количестве по сравнению с другими флавоноидам во всех исследованных объектах, независимо от фазы вегетации.

Заключение

Заключение. В процессе исследования разработана методика количественного определения флавоноидов в водно-спиртовых экстрактах. В подземных органах Щ. конского, Щ. водного, Щ. курчавого и Щ. туполистного трёх различных вегетаций были идентифицированы и количественно определены агликоны и гликозиды флавоноидов.

Introduction

Introduction. The study of the dynamics of accumulation of biologically active substances (hereinafter – BAS) in relation to the phonological phases of plant development is of great scientific and practical interest. The quantitative content of aglycones and glycosides of flavonoids depends on the life cycle of the plant and its vegetation phase.

Aim

Aim. To identify and quantify flavonoids in the underground organs of Rumex confertus Willd., Rumex aquaticus L., Rumex crispus L. and Rumex obtusifolius L. harvested during different phases of vegetation.

Materials and methods

Materials and methods. Extracts from the underground organs of the studied plants, obtained according to the method from the pharmacopoeial article on R. confertus, were analyzed. Chromatographic separation and detection were performed on a Nexera-i LC-2040 high-performance liquid chromatograph (Shimadzu Corporation, Japan). The chromatograph was equipped with a column thermostat, chromatography column Grace HPLC-COLUMN 250 × 4.6mm platinum C8-EPS 5 mm (Grace, США) and Guard column Phenomenex SecurityGuardTM Cartridges Widepore C18 4 × 3,0 mm, a degasser, an autosampler (injection volume: 10 µl), and an ultraviolet detector. Detection was carried out at a wavelength λ = 365 ± 2 nm. Mobile phase contains 0.1 % phosphoric acid in water (v/v) (eluent A); acetonitrile (eluent B) with flow rate: 0.9 ml/min.

Results and discussion

Results and discussion. All studied objects were analyzed. The authenticity of the substances contained were confirmed using the external standard, and their quantitative content was determined. The discovered and quantified substances were: 3-O-rutinoside of quercetin (rutin), 3-O-rutinoside of isorhamnetin (narcissin), 3-O-glucoside of kaempferol (astragalin), luteolin, kaempferol and isorhamnetin. 7-O-glucoside of luteolin (cynaroside) and 7-O-beta-D-glucoside apigenin (cosmosiin) were not found. The aglycone luteolin had the biggest share in the total quantitative content of flavonoids. It is noted that this aglycone is contained in larger quantities in relation to other flavonoids in all studied objects, regardless of the phase of vegetation.

Conclusion

Conclusion. In the process of the research, a method for the quantitative determination of flavonoids in alcohol-water extracts was developed. Aglycones and glycosides of flavonoids were identified and quantified in the underground organs of R. confertus Willd., R. aquaticus L., R. crispus L. and R. obtusifolius L. of three different vegetations.

флавоноидыВЭЖХ-УФподземные органыR. confertusR. crispusR. obtusifoliusR. aquaticusflavonoidsHPLC-UVunderground organsR. confertusR. crispusR. obtusifoliusR. aquaticusReferencesLi J.-J., Li Y.-X., Li N., Zhu H.-T., Wang D., Zhang Y.-J. The genus Rumex (Polygonaceae): an ethnobotanical, phytochemical and pharmacological review. Natural Products and Bioprospecting. 2022;12(1):21. DOI: 10.1007/s13659-022-00346-z.Li J.-J., Li Y.-X., Li N., Zhu H.-T., Wang D., Zhang Y.-J. The genus Rumex (Polygonaceae): an ethnobotanical, phytochemical and pharmacological review. Natural Products and Bioprospecting. 2022;12(1):21. DOI: 10.1007/s13659-022-00346-z.Vasas A., Orbán-Gyapai O., Hohmann J. The Genus Rumex: Review of traditional uses, phytochemistry and pharmacology. Journal of Ethnopharmacology. 2015;175:198–228 DOI: 10.1016/j.jep.2015.09.001.Vasas A., Orbán-Gyapai O., Hohmann J. The Genus Rumex: Review of traditional uses, phytochemistry and pharmacology. Journal of Ethnopharmacology. 2015;175:198–228 DOI: 10.1016/j.jep.2015.09.001.Belščak-Cvitanović A., Durgo K., Huđek A., Bačun-Družina V., Komes D. Overview of polyphenols and their properties. Polyphenols: Properties, Recovery, and Applications. 2018;3–44. DOI: 10.1016/B978-0-12-813572-3.00001-4.Belščak-Cvitanović A., Durgo K., Huđek A., Bačun-Družina V., Komes D. Overview of polyphenols and their properties. Polyphenols: Properties, Recovery, and Applications. 2018;3–44. DOI: 10.1016/B978-0-12-813572-3.00001-4.Jucá M. M., Cysne Filho F. M. S., de Almeida J. C., da Silva Mesquita D., de Moraes Barriga J. R., Ferreira Dias K. C., Barbosa T. M., Costa Vasconcelos L., Moreira Leal L. K. A., Ribeiro J. E., Mendes Vasconcelos S. M. Flavonoids: biological activities and therapeutic potential. Natural Product Research. 2020;34(5):692–705. DOI: 10.1080/14786419.2018.1493588.Jucá M. M., Cysne Filho F. M. S., de Almeida J. C., da Silva Mesquita D., de Moraes Barriga J. R., Ferreira Dias K. C., Barbosa T. M., Costa Vasconcelos L., Moreira Leal L. K. A., Ribeiro J. E., Mendes Vasconcelos S. M. Flavonoids: biological activities and therapeutic potential. Natural Product Research. 2020;34(5):692–705. DOI: 10.1080/14786419.2018.1493588.Berillo D., Kozhahmetova M., Lebedeva L. Overview of the Biological Activity of Anthraquinons and Flavanoids of the Plant Rumex Species. Molecules. 2022;27(4):1204. DOI: 10.3390/molecules27041204.Berillo D., Kozhahmetova M., Lebedeva L. Overview of the Biological Activity of Anthraquinons and Flavanoids of the Plant Rumex Species. Molecules. 2022;27(4):1204. DOI: 10.3390/molecules27041204.Feduraev P., Skrypnik L., Nebreeva S., Dzhobadze G., Vatagina A., Kalinina E., Pungin A., Maslennikov P., Riabova A., Krol O., Chupakhina G. Variability of Phenolic Compound Accumulation and Antioxidant Activity in Wild Plants of Some Rumex Species (Polygonaceae). Antioxidants. 2022;11(2):311. DOI: 10.3390/antiox11020311.Feduraev P., Skrypnik L., Nebreeva S., Dzhobadze G., Vatagina A., Kalinina E., Pungin A., Maslennikov P., Riabova A., Krol O., Chupakhina G. Variability of Phenolic Compound Accumulation and Antioxidant Activity in Wild Plants of Some Rumex Species (Polygonaceae). Antioxidants. 2022;11(2):311. DOI: 10.3390/antiox11020311.Feduraev P., Chupakhina G., Maslennikov P., Tacenko N., Skrypnik L. Variation in Phenolic Compounds Content and Antioxidant Activity of Different Plant Organs from Rumex crispus L. and Rumex obtusifolius L. at Different Growth Stages. Antioxidants (Basel). 2019;8(7):237. DOI: 10.3390/antiox8070237.Feduraev P., Chupakhina G., Maslennikov P., Tacenko N., Skrypnik L. Variation in Phenolic Compounds Content and Antioxidant Activity of Different Plant Organs from Rumex crispus L. and Rumex obtusifolius L. at Different Growth Stages. Antioxidants (Basel). 2019;8(7):237. DOI: 10.3390/antiox8070237.Poluyanov A. M., Sokolova A. Yu., Malashenko E. A., Sergunova E. V., Bobkova N. V. Isolation, identification and quantitative determination of anthracene derivatives by HPLC-UV method in the raw materials of some representatives of the genus Rumex of three vegetation times. Drug development & registration. 2022;11(4):216–225. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2022-11-4-216-225.Poluyanov A. M., Sokolova A. Yu., Malashenko E. A., Sergunova E. V., Bobkova N. V. Isolation, identification and quantitative determination of anthracene derivatives by HPLC-UV method in the raw materials of some representatives of the genus Rumex of three vegetation times. Drug development & registration. 2022;11(4):216–225. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2022-11-4-216-225.Matvienko U. A., Durnova N. A., Poluyanov A. M., Bobkova N. V., Turenko V. N., Smirnov V. V., Ramenskaya G. V. Isolation and Identification of Aglicones of Flavonoids of Some Species of the Genus Astragalus L. of the Volga Region Flora. Drug development & registration. 2023;12(1):106–113. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2023-12-1-106-113.Matvienko U. A., Durnova N. A., Poluyanov A. M., Bobkova N. V., Turenko V. N., Smirnov V. V., Ramenskaya G. V. Isolation and Identification of Aglicones of Flavonoids of Some Species of the Genus Astragalus L. of the Volga Region Flora. Drug development & registration. 2023;12(1):106–113. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2023-12-1-106-113.Kotsupiy O. V., Zagurskaya Yu. V., Ufimtsev V. I. Determination of phenolic compounds in water-ethanol extracts of Populus tremula L. leaves using high-performance liquid chromatography. Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology. 2020;10(3):470–478 DOI: 10.21285/2227-2925-2020-10-3-470-478.Kotsupiy O. V., Zagurskaya Yu. V., Ufimtsev V. I. Determination of phenolic compounds in water-ethanol extracts of Populus tremula L. leaves using high-performance liquid chromatography. Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology. 2020;10(3):470–478 DOI: 10.21285/2227-2925-2020-10-3-470-478.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.