634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2
2, Moscow tract, Tomsk, 634050
634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2
2, Moscow tract, Tomsk, 634050
634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2
2, Moscow tract, Tomsk, 634050
634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2
2, Moscow tract, Tomsk, 634050
634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2
2, Moscow tract, Tomsk, 634050
Введение. Известно широкое применение препаратов гепарина для лечения и профилактики венозных тромбоэмболических осложнений. Одним из препаратов низкомолекулярного гепарина, успешно применяемых в клинической практике, является надропарин кальция. Современный подход к оценке качества лекарственных препаратов предполагает использование эталонов, в сравнении с которыми осуществляется контроль качества лекарственного средства – стандартных образцов (СО). Важнейшим специфичным параметром при оценке подлинности низкомолекулярных гепаринов является характеристика фракционного состава.
Цель. Целью работы являлась разработка, аттестация и определение стабильности в течение срока годности вторичного стандартного образца для определения подлинности надропарина кальция в рамках совершенствования системы контроля качества предприятия с перспективой создания отечественного фармакопейного стандартного образца.
Материалы и методы. Объектом разработки и аттестации являлся стандартный образец предприятия – низкомолекулярный гепарин, полученный на базе ОПУ ЦВТ ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России. Аттестуемый стандартный образец получали очисткой надропарина кальция методом твердофазной экстракции. Полноту очистки подтверждали сравнением хроматограмм очищенных образцов с хроматограммами международного стандартного образца. Характеристики молекулярно-массового распределения определяли хроматографически. Стабильность аттестуемого СОП (стандартный образец предприятия) изучали при двух условиях хранения – при температуре ниже 8 °C в сухом состоянии в течение 16 месяцев и в растворе при температуре –40 °C в течение 6 месяцев – путем оценки трендов молекулярно-массового распределения.
Результаты и обсуждение. Для каждой серии аттестуемого стандартного образца в двух параллельных определениях рассчитаны молекулярная масса и молекулярно-массовые характеристики, представлена репрезентативная хроматограмма. Значения относительного стандартного отклонения молекулярной массы образцов и содержания контролируемых фракций не превышало 2,5 %. Детальный анализ молекулярно-массового распределения показал «классическую» зависимость RSD (относительное стандартное отклонение) от величины среднего со значительным увеличением до 30 % при малых значениях доли фракции (менее 0,5 %). Установлено, что в течение 16 месяцев при температуре хранения ниже 8 °C молекулярная масса и молекулярно-массовые характеристики стандартных образцов низкомолекулярного гепарина значимо не изменяются. Однако в растворе СОП при температуре хранения –40 °C в течение 6 месяцев деградировали более чем на 10 %.
Заключение. По результатам исследования разработан протокол получения стандартного образца предприятия низкомолекулярного гепарина для стандартизации субстанции надропарина кальция по показателю «молекулярно-массовое распределение». Установленный срок хранения образца – не менее 16 месяцев при температуре ниже 8 °C. Показана стабильность растворов стандартного образца при температуре хранения –40 °C в течение 3 месяцев.
Introduction. The widespread use of heparin preparations for the treatment and prevention of venous thromboembolic complications is known. One of the low molecular weight heparin drugs successfully used in clinical practice is calcium nadroparin. The modern approach to assessing the quality of medicines involves the use of standards, in comparison with which the quality control of the drug is carried out – standard samples (SS). The most important specific parameter in assessing the authenticity of low molecular weight heparins is the characteristic of the fractional composition.
Aim. The aim of the work was to develop, attestation and determine the stability during the shelf life of a secondary standard sample to determine the authenticity of calcium nadroparin as part of improving the quality control system of the enterprise with the prospect of creating a domestic pharmacopoeia standard sample.
Materials and methods. The object of development and attestation was the standard sample of the enterprise – low molecular weight heparin, obtained on the basis of the Technology implementation center of Siberian state medical university. The certified standard sample was obtained by purification of calcium nadroparin by solid-phase extraction. The completeness of the purification was confirmed by comparing the chromatograms of the purified samples with the chromatograms of the international standard sample. The characteristics of the molecular weight distribution were determined chromatographically. The stability of the certified SSE (the standard sample of the enterprise) was studied under two storage conditions – at a temperature below 8 °C in a dry state for 16 months and in solution at –40 °C for 6 months by evaluating trends in molecular weight distribution.
Results and discussion. For each batch of the certified standard sample, the molecular weight and molecular weight characteristics are calculated in 2 parallel definitions, and a representative chromatogram is presented. The values of the relative standard deviation of the molecular weight of the samples and the content of the controlled fractions did not exceed 2.5 %. A detailed analysis of the molecular weight distribution showed the "classical" dependence of RSD (relative standard deviation) from the average value with a significant increase up to 30 % for small fraction values (less than 0.5 %). It was found that during 16 months at a storage temperature below 8 ºC, the molecular weight and molecular weight characteristics of standard samples of low molecular weight heparin did not significantly change. However, in the SSE solution at a storage temperature of minus 40 °C for 6 months, they degraded by more than 10 %.
Conclusion. According to the results of the study, a protocol has been developed for obtaining a standard sample of low-molecular-weight heparin for the standardization of the calcium nadroparin substance according to the indicator "molecular weight distribution". The established shelf life of the sample is at least 16 months at temperatures below 8 °C. The stability of solutions of the standard sample at a storage temperature of –40 °C for 3 months is shown.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.