pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2024-13-4-1795pharmjournal-1933Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPRECLINICAL AND CLINICAL STUDIESВалидация биоаналитической методики определения и оценка фармакокинетики нового лекарственного средства на основе полисахарида аира болотного в эксперименте на лабораторных животныхPharmacokinetics of a new drug based on polysaccharide from acorus calamus in an experiment on laboratory animalshttps://orcid.org/0000-0001-5505-7141КривощековС. В.KrivoshchekovS. V.

634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2

2, Moskovsky trakt, Tomsk, 634050

ksv_tsu@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4635-8046ЯновскаяЕ. А.YanovskayaE. A.

634028, г. Томск, пр. Ленина, д. 3

3, Prospekt Lenina, Tomsk, 634028

https://orcid.org/0000-0002-4635-8046ГуртоР. В.GurtoR. V.

634028, г. Томск, пр. Ленина, д. 3

3, Prospekt Lenina, Tomsk, 634028

https://orcid.org/0000-0002-7479-0733БрюшининаО. С.BryushininaO. S.

634028, г. Томск, пр. Ленина, д. 3

3, Prospekt Lenina, Tomsk, 634028

https://orcid.org/0009-0005-9919-7353ИсаковД. А.IsakovD. A.

634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2

2, Moskovsky trakt, Tomsk, 634050

https://orcid.org/0009-0008-9365-800XЗыковаА. В.ZykovaA. V.

634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2

2, Moskovsky trakt, Tomsk, 634050

https://orcid.org/0000-0002-1400-8914ЗюзьковаЮ. Г.Zyuz’kovaYu. G.

634028, г. Томск, пр. Ленина, д. 3

3, Prospekt Lenina, Tomsk, 634028

https://orcid.org/0000-0002-1120-4979ГурьевА. М.GuryevA. M.

634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2

2, Moskovsky trakt, Tomsk, 634050

https://orcid.org/0000-0002-3829-7132УдутВ. В.UdutV. V.

634028, г. Томск, пр. Ленина, д. 3

3, Prospekt Lenina, Tomsk, 634028

https://orcid.org/0000-0002-2153-7945БелоусовМ. В.BelousovM. V.

634050, г. Томск, Московский тракт, д. 2

2, Moskovsky trakt, Tomsk, 634050

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России)РоссияSiberian State Medical University, SSMURussian FederationФедеральное государственное бюджетное научное учреждение «Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук». Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е. Д. ГольдбергаРоссияTomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences. Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative MedicineRussian Federation202413092024134190201Copyright © Кривощеков С.В., Яновская Е.А., Гурто Р.В., Брюшинина О.С., Исаков Д.А., Зыкова А.В., Зюзькова Ю.Г., Гурьев А.М., Удут В.В., Белоусов М.В., 20242024Кривощеков С.В., Яновская Е.А., Гурто Р.В., Брюшинина О.С., Исаков Д.А., Зыкова А.В., Зюзькова Ю.Г., Гурьев А.М., Удут В.В., Белоусов М.В.Krivoshchekov S.V., Yanovskaya E.A., Gurto R.V., Bryushinina O.S., Isakov D.A., Zykova A.V., Zyuz’kova Y.G., Guryev A.M., Udut V.V., Belousov M.V.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/1933Введение

Введение. α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронан – водорастворимый гетерополисахарид, выделенный из корневищ аира болотного (Acorus calamus L.) и обладающий противоопухолевым, антиметастатическим, иммуномодулирующим и гепатопротекторным действием, защитным действием на угнетенное в ходе цитостатического лечения кроветворение.

Цель

Цель. Валидация биоаналитической методики определения α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. и изучение фармакокинетических параметров нового лекарственного средства на его основе после однократного введения 120 мг/кг крысам и 24, 30, 42 мг/кг кроликам.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследовании использованы в качестве основных животных 8 крыс-самцов (средняя масса – 300 г). В качестве второго вида животных использовали 6 кроликов-самцов (средняя масса тела – 2,5 кг). Эксперимент по оценке доз проведен на 24 кроликах (масса тела – 2,3–2,5 кг) Количественное определение α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. в плазме крови животных проводили методом ВЭЖХ-МС/МС, аналитическая форма – галактуроновая кислота. Методика пробоподготовки биообразцов включала стадию ферментативного гидролиза α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. раствором пектиназы до образования галактуроновой кислоты.

Результаты и обсуждения

Результаты и обсуждения. Изучена фармакокинетика нового лекарственного средства α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. после однократного введения доз 120 мг/кг крысам и 24, 30, 42 мг/кг кроликам. Среднее время пребывания лекарственного средства в организме кролика составило 1,0 ± 0,21 ч, время полувыведения – 0,7 ± 0,15 ч. Среднее время пребывания лекарственного средства в организме крысы составило 1,16 ч, время полувыведения T1/2 – 0,80 ч. После однократного внутривенного введения кроликам 24, 30 и 42 мг/кг максимальная концентрация в системном кровотоке достигается через 5 мин после введения и составляет в среднем 133,95 ± 27,04, 145,86 ± 40,90 и 226,13 ± 41,27 мкг/мл соответственно, период полураспределения варьировался от 0,22 до 0,26 ч, период полувыведения – от 3,52 до 3,96 ч.

Заключение

Заключение. Проведена оценка фармакокинетических параметров α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. на животных, основанная на использовании методики количественного определения галактуроновой кислоты методом ВЭЖХ-МС/МС.

Introduction

Introduction. α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane is a water-soluble heteropolysaccharide isolated from the rhizomes of calamus marsh (Acorus calamus L.) and has antitumor, antimetastatic, immunomodulatory and hepatoprotective effects, protective effect on hematopoiesis suppressed during cytostatic treatment.

Aim

Aim. Validation of the bioanalytical method for the determination of α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane Acorus calamus L. and the study of the pharmacokinetic parameters of a new drug based on it after a single administration of 120 mg/kg to rats and 24, 30, 42 mg/kg to rabbits.

Materials and methods

Materials and methods. In the study, 8 male rats (average weight – 300 g) were used as the main animals. 6 male rabbits (average body weight – 2.5 kg) were used as an additional animal species. The dose assessment experiment was carried out on 24 rabbits (body weight – 2.3–2.5 kg). The quantitative determination of α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane Acorus calamus L. in the blood plasma of animals was carried out by HPLC-MS/MS, the analytical form was galacturonic acid. The method of sample preparation of biological samples included the stage of enzymatic hydrolysis of α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane Acorus calamus L. with a solution of pectinase for the formation of galacturonic acid.

Results and discussions

Results and discussions. The pharmacokinetics of the new drug α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane Acorus calamus L. was studied after a single dose of 120 mg/kg to rats and 24, 30, 42 mg/kg to rabbits. The average residence time of the drug in the rabbit's body was 1.0 ± 0.21 hours, the half-life was 0.7 ± 0.15 hours. The average residence time of the drug in the rat body was 1.16 hours, the half-life T1/2 was 0.80 hours. After a single intravenous administration to rabbits of 24, 30 and 42 mg/kg, the maximum concentration in the systemic bloodstream is reached 5 minutes after administration and averages 133.95 ± 27.04, 145.86 ± 40.90 and 226.13 ± 41.27 µg/ml, respectively, the half-life ranged from 0.22 to 0.26 h, the half-life from 3.52 to 3.96 hours.

Conclusion

Conclusion. The pharmacokinetic parameters of α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane Acorus calamus L. were evaluated in animals based on the use of the method of quantitative determination of galacturonic acid by HPLC-MS/MS.

полисахаридα(12)-L-рамно-α(14)-D-галактопиранозилуронангалактуроновая кислотааир болотныйAcorus calamus L.фармакокинетикаВЭЖХ-МС/МСpolysaccharideα(12)-L-rhamno-α(14)-D-galactopyranosyluronanegalacturonic acidAcorus calamus L.pharmacokineticsHPLC-MS/MSРабота выполнена в рамках прикладного научного исследования 720000Ф.99.1.БН62АБ30000 в рамках государственного задания № 056-00116-23-01.ReferencesГурьев А. М., Белоусов М. В., Юсубов М. С., Ахмеджанов Р. Р., Зуева Е. П., Лопатина К. А. Исследование острой токсичности комплекса водорастворимых полисахаридов корневищ аира болотного (Acorus calamus L.). Бюллетень сибирской медицины. 2010;9(1):36–39. DOI: 10.20538/1682-0363-2010-1-36-39.Guriyev A. M., Belousov M. V., Yusubov M. S., Akhmedzhanov R. R., Zuyeva E. P., Lopatina K. A. The investigation of acute toxicity of water-soluble polysaccharides extracted from calamus root (Acorus calamus L.). Bulletin of Siberian Medicine. 2010;9(1):36–39. (In Russ.) DOI: 10.20538/1682-0363-2010-1-36-39.Лопатина К. А., Разина Т. Г., Зуева Е. П., Крылова С. Г., Гурьев А. М., Амосова Е. Н., Рыбалкина О. Ю., Сафонова Е. А., Ефимова Л. А., Белоусов М. В. Доклиническое исследование лекарственной формы α(1,2)-L-рамно-α(1,4)-D-галактопиранозилуронана из корневищ аира болотного Acorus calamus L. в онкологическом эксперименте. Сибирский онкологический журнал. 2015;1:59–63.Lopatina K. A., Razina T. G., Zueva E. P., Krylova S. G., Guryev A. M., Amosova E. N., Rybalkina O. Yu., Safonova E. A., Efimova L. A., Belousov M. V. Preclinical study of α(1,2)-L-rhamno-α(1,4)-D-galactopyranosyluronane from rhizomes Acorus calamus L. in cancer experiment. Siberian journal of oncology. 2015;1:59–63. (In Russ.)Лопатина К. А., Гурьев А. М., Разина Т. Г., Амосова Е. Н., Крылова С. Г., Шилова Н. В., Зуева Е. П. Действие водорастворимых полисахаридов корневищ аира болотного на функциональную активность клеток лимфоузлов в условиях цитостатической терапии перевиваемой опухоли. Сибирский онкологический журнал. 2006;3(19):59–63.Lopatina K. A., Guriev A. M., Razina T. G., Amosova E. N., Krylova S. G., Shilova N. V., Zueva E. P. Influence of polysaccharides from Acorus calamus rizomes on functional activity of murine limphnode cells after experimental tumor chemotherapy. Siberian journal of oncology. 2006;3(19):59–63. (In Russ.)Сафонова Е. А,, Гурьев А. М., Разина Т. Г., Зуева Е. П., Ефимова Л. А., Лопатина К. А. Повышение эффективности химиотерапии с помощью фармакологически активных фракций, выделенных из полисахаридного комплекса аира болотного (Acorus calamus L.). Российский биотерапевтический журнал. 2012;11(4):55–58.Safonova E. A., Guryev A. M., Razina T. G., Zueva E. P., Efimova L. A., Lopatina K. A. Increase of chemotherapy effeciency be means of fractions isolated from polysaccharides complex Acorus calamus L. Russian Journal of Biotherapy. 2012;11(4):55–58. (In Russ.)Mugale M. N., Dev K., More B. S., Mishra V. S., Washimkar K. R., Singh K., Maurya R., Kumar Rath S., Chattopadhyay D., Chattopadhyay N. A Comprehensive Review on Preclinical Safety and Toxicity of Medicinal Plants. Clinical Complementary Medicine and Pharmacology. 2024;4(1):100129. DOI: 10.1016/j.ccmp.2024.100129.Mugale M. N., Dev K., More B. S., Mishra V. S., Washimkar K. R., Singh K., Maurya R., Kumar Rath S., Chattopadhyay D., Chattopadhyay N. A Comprehensive Review on Preclinical Safety and Toxicity of Medicinal Plants. Clinical Complementary Medicine and Pharmacology. 2024;4(1):100129. DOI: 10.1016/j.ccmp.2024.100129.Namdari R., Jones K., Chuang S. S., Van Cruchten S., Dincer Z., Downes N., Mikkelsen L. F., Harding J., Jäckel S., Jacobsen B., Kinyamu-Akunda J., Lortie A., Mhedhbi S., Mohr S., Schmitt M. W., Prior H. Species selection for nonclinical safety assessment of drug candidates: Examples of current industry practice. Regulatory Toxicology and Pharmacology. 2021;126:105029. DOI: 10.1016/j.yrtph.2021.105029.Namdari R., Jones K., Chuang S. S., Van Cruchten S., Dincer Z., Downes N., Mikkelsen L. F., Harding J., Jäckel S., Jacobsen B., Kinyamu-Akunda J., Lortie A., Mhedhbi S., Mohr S., Schmitt M. W., Prior H. Species selection for nonclinical safety assessment of drug candidates: Examples of current industry practice. Regulatory Toxicology and Pharmacology. 2021;126:105029. DOI: 10.1016/j.yrtph.2021.105029.Гурьев А. М., Белоусов М. В., Ахмеджанов Р. Р., Юсубов М. С., Чурин А. А., Карпова Г. В. Исследование влияния длительного введения водорастворимых полисахаридов аира болотного (Acorus calamus L.) на функциональные показатели лабораторных животных. Бюллетень сибирской медицины. 2010;9(6):18–23. DOI: 10.20538/1682-0363-2010-6-18-23.Gurieyv A. M., Belousov M. V., Akhmedzhanov R. R., Yusubov M. S., Churin A. A., Karpova G. V. An investigation of the introduction of water-soluble polysaccharides calamus root (Acorus calamus L.) effect on the experimental animals functions. Bulletin of Siberian Medicine. 2010;9(6):18–23. (In Russ.) DOI: 10.20538/1682-0363-2010-6-18-23.Nesterkina M., Bilokon S., Alieksieieva T., Kravchenko I., Hirsch A. K. H. Genotoxic and mutational potential of monocyclic terpenoids (carvacrol, carvone and thymol) in Drosophila melanogaster. Toxicology Reports. 2023;10:327–333. DOI: 10.1016/j.toxrep.2023.02.009.Nesterkina M., Bilokon S., Alieksieieva T., Kravchenko I., Hirsch A. K. H. Genotoxic and mutational potential of monocyclic terpenoids (carvacrol, carvone and thymol) in Drosophila melanogaster. Toxicology Reports. 2023;10:327–333. DOI: 10.1016/j.toxrep.2023.02.009.De Oliveira Dos Santos A. M., Duarte A. E., Costa A. R., da Silva A. A., Rohde C., Silva D. G., de Amorim É. M., da Cruz Santos M. H., Pereira M. G., Deprá M, de Santana S. L., da Silva Valente V. L., Teixeira C. S. Canavalia ensiformis lectin induced oxidative stress mediate both toxicity and genotoxicity in Drosophila melanogaster. International Journal of Biological Macromolecules. 2022;222(B):2823–2832. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2022.10.061.De Oliveira Dos Santos A. M., Duarte A. E., Costa A. R., da Silva A. A., Rohde C., Silva D. G., de Amorim É. M., da Cruz Santos M. H., Pereira M. G., Deprá M, de Santana S. L., da Silva Valente V. L., Teixeira C. S. Canavalia ensiformis lectin induced oxidative stress mediate both toxicity and genotoxicity in Drosophila melanogaster. International Journal of Biological Macromolecules. 2022;222(B):2823–2832. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2022.10.061.Неупокоева О. В., Лопатина К. А., Воронова О. Л., Сафонова Е. А., Зуева Е. П., Чурин А. А. Изучение мутагенных свойств α(1,2)-1-рамно-α(1,4)-d-галактопиранозилуронана Acorus calamus L. Тихоокеанский медицинский журнал. 2015;(2):22–23.Neupokoeva O. V., Lopatina K. A., Voronova O. L., Safonova E. A., Zueva E. P., Churin A. A. Mutagenic characteristics research α(1,2)-1-ramno-α(1,4)-d-galactopiranosiluronan Acorus calamus L. Pacific Medical Journal. 2015;(2):22–23. (In Russ.)Миронов А. Н., ред. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К; 2013. 944 с.Mironov A. N., editor. Guidelines for conducting preclinical studies of medicines. Moscow: Grif i K; 2013. 944 p. (In Russ.)Мирошниченко И. И., Кравцова О. Ю. Организация фармакокинетических исследований. Фармакокинетика и Фармакодинамика. 2021;3:12–19. DOI: 10.37489/2587-7836-2021-3-12-19.Miroshnichenko I. I., Kravtsova O. Yu. Organizing of pharmacokinetic investigations. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics. 2021;(3):12–19. (In Russ.) DOI: 10.37489/2587-7836-2021-3-12-19.Wu W., Li K., Zhao C., Ran X., Zhang Y., Zhang T. A rapid HPLC-MS/MS method for the simultaneous determination of luteolin, resveratrol and their metabolites in rat plasma and its application to pharmacokinetic interaction studies. Journal of Chromatography B. 2022;1191:123118. DOI: 10.1016/j.jchromb.2022.123118.Wu W., Li K., Zhao C., Ran X., Zhang Y., Zhang T. A rapid HPLC-MS/MS method for the simultaneous determination of luteolin, resveratrol and their metabolites in rat plasma and its application to pharmacokinetic interaction studies. Journal of Chromatography B. 2022;1191:123118. DOI: 10.1016/j.jchromb.2022.123118.Zhang R., Li P., Zhou J., Guo P., Liu Y., Shi S. A novel, simple and reliable method for the determination of hydronidone and its metabolites M3 and M4 in human plasma and urine by HPLC-MS/MS and its application to a pharmacokinetic study in health Chinese subjects. Analytical Biochemistry. 2022;655:114842. DOI: 10.1016/j.ab.2022.114842.Zhang R., Li P., Zhou J., Guo P., Liu Y., Shi S. A novel, simple and reliable method for the determination of hydronidone and its metabolites M3 and M4 in human plasma and urine by HPLC-MS/MS and its application to a pharmacokinetic study in health Chinese subjects. Analytical Biochemistry. 2022;655:114842. DOI: 10.1016/j.ab.2022.114842.Ligacheva A. A., Danilets M. G., Trofimova E. S. T., Sherstoboev E. Yu., Zhdanov V. V., Guriev A. M., Belousov M. V., Yusubov M. S., Korzh A. P., Krivoshchekov S. V., Dygai A. M. Effects of Water-Soluble Polysaccharides with Different Chemical Structure, Isolated from Acorus calamus L. and Trifolium pratense L., on Nitric Oxide Production: A Screening Study. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2016;160(3):330–335. DOI: 10.1007/s10517-016-3163-2.Ligacheva A. A., Danilets M. G., Trofimova E. S. T., Sherstoboev E. Yu., Zhdanov V. V., Guriev A. M., Belousov M. V., Yusubov M. S., Korzh A. P., Krivoshchekov S. V., Dygai A. M. Effects of Water-Soluble Polysaccharides with Different Chemical Structure, Isolated from Acorus calamus L. and Trifolium pratense L., on Nitric Oxide Production: A Screening Study. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2016;160(3):330–335. DOI: 10.1007/s10517-016-3163-2.Bartella L., Bouza M., Rocío-Bautista P., Di Donna L., García-Reyes J. F., Molina-Díaz A. Direct wine profiling by mass spectrometry (MS): A comparison of different ambient MS approaches. Microchemical Journal. 2022;179:107479. DOI: 10.1016/j.microc.2022.107479.Bartella L., Bouza M., Rocío-Bautista P., Di Donna L., García-Reyes J. F., Molina-Díaz A. Direct wine profiling by mass spectrometry (MS): A comparison of different ambient MS approaches. Microchemical Journal. 2022;179:107479. DOI: 10.1016/j.microc.2022.107479.Moreira M., Guido L., Cruz J., Barros A. Determination of galacturonic acid content in pectin from fruit juices by liquid chromatographydiode array detection-electrospray ionization tandem mass spectrometry. Open Chemistry. 2010;8(6):1236–1243. DOI: 10.2478/s11532-010-0101-4.Moreira M., Guido L., Cruz J., Barros A. Determination of galacturonic acid content in pectin from fruit juices by liquid chromatographydiode array detection-electrospray ionization tandem mass spectrometry. Open Chemistry. 2010;8(6):1236–1243. DOI: 10.2478/s11532-010-0101-4.Fan B., Wei G., Gan X., Li T., Qu Z., Xu S., Liu C., Qian C. Study on the varied content of Polygonatum cyrtonema polysaccharides in the processing of steaming and shining for nine times based on HPLC-MS/MS and chemometrics. Microchemical Journal. 2020;159:105352. DOI: 10.1016/j.microc.2020.105352.Fan B., Wei G., Gan X., Li T., Qu Z., Xu S., Liu C., Qian C. Study on the varied content of Polygonatum cyrtonema polysaccharides in the processing of steaming and shining for nine times based on HPLC-MS/MS and chemometrics. Microchemical Journal. 2020;159:105352. DOI: 10.1016/j.microc.2020.105352.Гугля Е. Б. Применение жидкостной хроматомасс-спектрометрии в доклинических исследованиях лекарственных веществ. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2014;1:65–71.Guglya E. B. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry application in drug discovery and preclinical study. Bulletin of Russian State Medical University. 2014;1:65–71. (In Russ.)Fan B., Li T., Song X., Wu C., Qian C. A rapid, accurate and sensitive method for determination of monosaccharides in different varieties of Osmanthus fragrans Lour by pre-column derivatization with HPLC-MS/MS. International Journal of Biological Macromolecules. 2019;125:221–231. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.12.033.Fan B., Li T., Song X., Wu C., Qian C. A rapid, accurate and sensitive method for determination of monosaccharides in different varieties of Osmanthus fragrans Lour by pre-column derivatization with HPLC-MS/MS. International Journal of Biological Macromolecules. 2019;125:221–231. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.12.033.Fan B., Wei G., Gan X., Li T., Qu Z., Xu S., Liu C., Qian C. Study on the varied content of Polygonatum cyrtonema polysaccharides in the processing of steaming and shining for nine times based on HPLC-MS/MS and chemometrics. Microchemical Journal. 2020;159:105352. DOI: 10.1016/j.microc.2020.105352.Fan B., Wei G., Gan X., Li T., Qu Z., Xu S., Liu C., Qian C. Study on the varied content of Polygonatum cyrtonema polysaccharides in the processing of steaming and shining for nine times based on HPLC-MS/MS and chemometrics. Microchemical Journal. 2020;159:105352. DOI: 10.1016/j.microc.2020.105352.Ковалёв Г. И., Золотарёв Ю. А., Дадаян А. К., Шрам С. И., Абдуллина А. А., Васильева Е. В., Колыванов Г. Б., Жердев В. П. Изучение фармакокинетики [<sup>3</sup>H]-циклопролилглицина в крови крыс. Фармакокинетика и Фармакодинамика. 2018;3:48–56. DOI: 10.24411/2587-7836-2018-10024.Kovalev G. I., Zolotarev Yu. A., Dadayan A. K., Shram S. I., Abdullina  A. A., Vasileva E. V., Kolyvanov  G. B., Zherdev V. P. The Study of [<sup>3</sup>H]-Cycloprolylglycine Pharmacokinetics in Rat Blood. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics. 2018;(3):48–56. (In Russ.) DOI: 10.24411/2587-7836-2018-10024.Мирошниченко И. И. Основы фармакокинетики. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2002. 192 с.Miroshnichenko I. I. Fundamentals of pharmacokinetics. Moscow: GEOTAR-Media; 2002. 192 p. (In Russ.)Zhang Y., Huo M., Zhou J., Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Computer Methods and Programs in Biomedicine. 2010;99(3):306–314. DOI: 10.1016/j.cmpb.2010.01.007.Zhang Y., Huo M., Zhou J., Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Computer Methods and Programs in Biomedicine. 2010;99(3):306–314. DOI: 10.1016/j.cmpb.2010.01.007.Лакин Г. Ф. Биометрия. 4-е издание. М.: Высшая школа; 1990. 352 с.Lakin G. F. Biometrics. 4<sup>th</sup> edition. Moscow: Vysshaya shkola. 1990. 352 p. (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.