150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5; 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000; 108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5; 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000; 108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5; 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000; 108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5; 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000; 108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
150000, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5; 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д. 108/1
5, Revolutsionnaya str., Yaroslavl, 150000; 108/1, Respublikanskaya str., Yaroslav, 150000
Введение. 3-(2-бутил-5-хлоро-1Н-имидазол-4-ил)-N-[4-метокси-3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-карбоксамид (R004) является новой перспективной молекулой для терапии ревматоидного артрита. Данное соединение находится на стадии доклинического исследования, в ходе которого вместе с эффективностью и безопасностью необходимо изучить его фармакокинетику. При этом необходимо установить основные фармакокинетические параметры лекарственного средства и его метаболитов в плазме крови при однократном введении.
Цель. Оценка линейности фармакокинетики и относительной биодоступности 3-(2-бутил-5-хлоро-1Н-имидазол-4-ил)-N-[4-метокси-3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-карбоксамида после однократного введения субстанции крысам.
Материалы и методы. Субстанцию R004 вводили крысам однократно перорально в дозировках 10 мг/кг, 20 мг/кг и 40 мг/кг и внутрибрюшинно в дозировке 10 мг/кг. Исследование проводилось на 24 крысах линии Wistar: по 6 крыс на каждую из дозировок. Образцы крови отбирались до введения и через 30 мин, 1 ч, 1 ч 30 мин, 2 ч, 3 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч, 10 ч, 12 ч, 24 ч после введения лекарственного средства. Полученная плазма стабилизировалась 250 мМ раствором ацетата аммония для предотвращения гидролиза R004. Подготовку проб плазмы осуществляли путем осаждения белков ацетонитрильным раствором внутренних стандартов. Измерение концентрации R004 и его метаболитов 3-(2-бутил-5-хлоро-1Н-имидазол-4-ил)-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-карбоновой кислоты (М1) и 4-метокси-3-(трифторметил)анилина (M2) проводили с помощью ВЭЖХ-МС/МС. При оценке фармакокинетических параметров применялся некомпартментный подход.
Результаты и обсуждение. Разработанная биоаналитическая методика прошла полную валидацию согласно требованиям руководств ЕАЭС по проведению исследований биоэквивалентности и ICH M10. Аналитический диапазон определения в плазме R004 составил 2–2000 нг/мл, М1 и М2 – 1–1000 нг/мл. Зависимость параметров Cmax и AUC0–t изучаемого соединения и его метаболитов от введенной дозы носила линейный характер. Так, величина коэффициента корреляции Cmax R004 составил 0,9995, а параметра AUC0–t – 0,9932. Установлено наличие энтерогепатической рециркуляции R004. Величина относительной биодоступности R004 составила 21,26 %.
Заключение. Разработанная методика успешно применена для фармакокинетического исследования. R004 и его метаболиты обладают линейной фармакокинетикой при пероральном введении субстанции.
Introduction. 3-(2-butyl-5-chloro-1H-imidazole-4-yl)-N-[4-methoxy-3-(trifluoromethyl)phenyl]-4,5-dihydro-1,2-oxazole-5-carboxamide (R004) is a prospective new molecule for the treatment of rheumatoid arthritis. This compound is at the stage of preclinical research, during which its pharmacokinetics must be studied along with efficacy and safety. In this case, it is necessary to establish the main pharmacokinetic parameters of the drug and its metabolites in blood plasma after a single administration.
Aim. Evaluation of linearity of pharmacokinetics and relative bioavailability of 3-(2-butyl-5-chloro-1H-imidazole-4-yl)-N-[4-methoxy-3-(trifluoromethyl)phenyl]-4,5-dihydro-1,2-oxazole-5-carboxamide and its main metabolites in plasma after a single administration of the substance to rats.
Materials and methods. Substance R004 was administered to rats once orally at dosages of 10 mg/kg, 20 mg/kg and 40 mg/kg and intraperitoneally at a dosage of 10 mg/kg. The study was carried out using 24 Wistar rats: 6 rats were used for each of the dosage. Blood samples were collected before administration and 30 min, 1 h, 1 h, 30 min, 2 h, 3 h, 4 h, 6 h, 8 h, 10 h, 12 h, 24 h after administration of the drug. The obtained plasma was stabilized with a 250 mM ammonium acetate solution to prevent hydrolysis of R004. Plasma samples were prepared by means proteins precipitation by acetonitrile solution of internal standards. Measurement of the concentration of R004 and its metabolites 3-(2-butyl-5-chloro-1H-imidazole-4-yl)-4,5-dihydro-1,2-oxazole-5-carboxylic acid (M1) and 4-methoxy-3-(trifluoromethyl)aniline (M2) was performed using HPLC-MS/MS. A non-compartment approach was applied for evaluation pharmacokinetic parameters.
Results and discussion. The developed bioanalytical method has been fully validated in accordance with the requirements of the EAEU guideline for conducting bioequivalence study and ICH M10 guideline. The analytical range of determination in plasma of R004 was 2–2000 ng/ml, M1 and M2 – 1–1000 ng/ml. The dependence of the parameters Cmax and AUC0–t of the studied compound and its metabolites on the administered dose was linear. Thus, the value of the correlation coefficient of Cmax R004 was 0.9995, and value of the correlation coefficient of AUC0–t was 0.9991. The presence of enterohepatic recirculation R004 has been determined. The relative bioavailability of R004 was 21.26%.
Conclusion. The developed method was successfully applied for the pharmacokinetic research. R004 and its metabolites have linear pharmacokinetics in case of oral administration.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.