pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2025-14-2-2084pharmjournal-2097Research ArticleПОИСК И РАЗРАБОТКА НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВRESEARCH AND DEVELOPMENT OF NEW DRUG PRODUCTSПервый дженерик тирзепатида GP30931: физико-химическое и биологическое сходство с референтным лекарственным средствомThe first generic tirzepatide GP30931: physicochemical and biological similarity to the reference drughttps://orcid.org/0000-0003-3840-5049ЛуговикИ. А.LugovikI. A.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

Ilia.Lugovik@geropharm.comhttps://orcid.org/0000-0003-3024-4009БабинаА. В.BabinaA. V.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

https://orcid.org/0000-0002-9384-8064АрутюнянС. С.ArutyunyanS. S.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

https://orcid.org/0009-0005-8083-7154ЕрмолаеваД. О.ErmolaevaD. О.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

https://orcid.org/0000-0002-8445-1129СапароваВ. Б.SaparovaV. B.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А; 1127006, г. Москва, ул. Долгоруковская, д. 4

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515; 4, Dolgorukovskaya str., Moscow, 1127006

https://orcid.org/0009-0006-2654-7874КобелеваТ. Н.KobelevaT. N.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

https://orcid.org/0009-0008-8467-9781ЗаикинП. Г.ZaikinP. G.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

https://orcid.org/0000-0002-9110-1813МикушинаА. Д.MikushinaA. D.

194021, г. Санкт-Петербург, ул. Хлопина, д. 8, корпус 3, литера А

8/3A, Khlopina str., Saint Petersburg, 194021

https://orcid.org/0000-0002-5459-1438БукатинА. С.BukatinA. S.

194021, г. Санкт-Петербург, ул. Хлопина, д. 8, корпус 3, литера А

8/3A, Khlopina str., Saint Petersburg, 194021

https://orcid.org/0000-0002-3344-2513ЕлисеевИ. Е.EliseevI. E.

Школа информатики, физики и технологий. 199106, Санкт-Петербург, 25-я линия Васильевского острова, д. 6, корпус 1

School of Informatics, Physics and Technology. 6/1, 25 liniya Vasil'evskogo ostrova, Saint Petersburg, 199106

https://orcid.org/0000-0003-4934-8801ЗайчикБ. Ц.ZajchikB. Ts.

117198, г. Москва, Ленинский пр-т, д. 113/1, помещение 210Е-211Е

room 210E-211E, 113/1, Leninsky prospekt, Moscow, 117198

https://orcid.org/0009-0002-6889-9000КерученькоЯ. К.KeruchenkoY. S.

117198, г. Москва, Ленинский пр-т, д. 113/1, помещение 210Е-211Е

room 210E-211E, 113/1, Leninsky prospekt, Moscow, 117198

https://orcid.org/0000-0002-1053-2778ОхрименкоИ. С.OhrimenkoI. S.

Центр исследований молекулярных механизмов старения и возрастных заболеваний. 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский переулок, д. 9; Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии. 117997, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10

Center for Research of Molecular Mechanisms of Aging and Age-Related Diseases. Institutsky pereulok, 9, Dolgoprudny, Moscow region, 141701; Laboratory of Biomolecular NMR Spectroscopy. 16/10, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117997

https://orcid.org/0000-0002-3635-1609БочаровЭ. В.BocharovE. V.

Центр исследований молекулярных механизмов старения и возрастных заболеваний. 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский переулок, д. 9; Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии. 117997, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10

Center for Research of Molecular Mechanisms of Aging and Age-Related Diseases. Institutsky pereulok, 9, Dolgoprudny, Moscow region, 141701; Laboratory of Biomolecular NMR Spectroscopy. 16/10, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117997

https://orcid.org/0000-0003-2593-1963ТальдаевА. Х.TaldaevA. Kh.

Центр исследований молекулярных механизмов старения и возрастных заболеваний. 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский переулок, д. 9; Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии. 117997, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10

Center for Research of Molecular Mechanisms of Aging and Age-Related Diseases. Institutsky pereulok, 9, Dolgoprudny, Moscow region, 141701; Laboratory of Biomolecular NMR Spectroscopy. 16/10, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117997

https://orcid.org/0000-0002-1788-1153ЛушпаВ. А.LushpaV. A.

Центр исследований молекулярных механизмов старения и возрастных заболеваний. 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский переулок, д. 9; Лаборатория биомолекулярной ЯМР-спектроскопии. 117997, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10

Center for Research of Molecular Mechanisms of Aging and Age-Related Diseases. Institutsky pereulok, 9, Dolgoprudny, Moscow region, 141701; Laboratory of Biomolecular NMR Spectroscopy. 16/10, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117997

https://orcid.org/0000-0003-2308-0608МакаренкоИ. Е.MakarenkoI. E.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А; 1127006, г. Москва, ул. Долгоруковская, д. 4

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515; 4, Dolgorukovskaya str., Moscow, 1127006

https://orcid.org/0000-0003-4594-6097ДрайР. В.DraiR. V.

198515, г. Санкт-Петербург, поселок Стрельна, ул. Связи, д. 34, литера А

34A, Svyazi str., Strelna settlement, Saint Petersburg, 198515

Закрытое акционерное общество «Фарм-Холдинг»Closed Joint Stock Company "Pharm-Holding"Закрытое акционерное общество «Фарм-Холдинг»; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А. И. Евдокимова» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииClosed Joint Stock Company "Pharm-Holding"; Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "A. I. Yevdokimov Moscow State University of Medicine and Dentistry" of the Ministry of Healthcare of the Russion FederationФедеральное государственное бюджетное учреждение высшего образования и науки «Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук» (СПбАУ РАН им. Ж. И. Алферова; Академический университет им. Ж. И. Алферова, Алферовский университет)Alferov Federal State Budgetary Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences (Alferov University)Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский университет «Высшая школа экономики» (НИУ ВШЭ)Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education "National Research University "Higher School of Economics"Научно-исследовательский центр компании «АкваХром»Research and development center of the company "AquaChrom"Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Московский физико-технический институт (национальный исследовательский университет)» (МФТИ, Физтех); Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Государственный Научный Центр Российской Федерации Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН)Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education "Moscow Institute of Physics and Technology (National Research University)" (MIPT, Phystech); Shemyakin-Ovchinnikov Institute of bioorganic chemistry2025020620251425474Copyright © Луговик И.А., Бабина А.В., Арутюнян С.С., Ермолаева Д.О., Сапарова В.Б., Кобелева Т.Н., Заикин П.Г., Микушина А.Д., Букатин А.С., Елисеев И.Е., Зайчик Б.Ц., Керученько Я.К., Охрименко И.С., Бочаров Э.В., Тальдаев А.Х., Лушпа В.А., Макаренко И.Е., Драй Р.В., 20252025Луговик И.А., Бабина А.В., Арутюнян С.С., Ермолаева Д.О., Сапарова В.Б., Кобелева Т.Н., Заикин П.Г., Микушина А.Д., Букатин А.С., Елисеев И.Е., Зайчик Б.Ц., Керученько Я.К., Охрименко И.С., Бочаров Э.В., Тальдаев А.Х., Лушпа В.А., Макаренко И.Е., Драй Р.В.Lugovik I.A., Babina A.V., Arutyunyan S.S., Ermolaeva D.О., Saparova V.B., Kobeleva T.N., Zaikin P.G., Mikushina A.D., Bukatin A.S., Eliseev I.E., Zajchik B.T., Keruchenko Y.S., Ohrimenko I.S., Bocharov E.V., Taldaev A.K., Lushpa V.A., Makarenko I.E., Drai R.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/2097Введение

Введение. Метаболический синдром – мультифакторный комплекс метаболических нарушений, сопровождающийся сахарным диабетом 2 типа и абдоминальным ожирением. В фармакологической коррекции ожирения и сахарного диабета 2 типа наибольший эффект демонстрируют двойные агонисты глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1) и глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), в частности тирзепатид. Оригинальный препарат («Мунджаро», мнн: тирзепатид) не зарегистрирован в Евразийском экономическом союзе (ЕАЭС), что ограничивает его доступность для пациентов и приводит к необходимости разработки отечественного дженерика.

Цель

Цель. Проведение физико-химической и биологической характеризации препарата Седжаро® (GP30931) в сравнении с оригинальным препаратом Мунджаро® для установления их сопоставимости.

Материалы и методы

Материалы и методы. Исследованы три серии каждого препарата (раствор для подкожного введения, 25 мг/мл). Первичную структуру проверяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с масс спектрометрией (ВЭЖХ-МС), пептидного картирования и ЯМР (2D-ЯМР-1H-1H TOCSY). Вторичную структуру, структуры высшего порядка и агрегацию оценивали методами кругового дихроизма (КД), ядерного магнитного резонанса высокого разрешения (ЯМР), квантового выхода флуоресценции (КФ) и динамического рассеяния света (DLS). Профиль примесей анализировали с использованием эксклюзионной и обращенно фазовой ВЭЖХ. Функциональную активность определяли в клеточных тестах по активации кальциевых потоков через рецепторы GLP-1 и GIP с оценкой полумаксимальной эффективной концентрации (EC50); эквивалентность подтверждали методом двух односторонних тестов (TOST, 90 % доверительный интервал).

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. ВЭЖХ-МС и картирование подтвердили идентичные массу (4 810,52 Да) и аминокислотную последовательность. Спектры ЯМР, профили КД и КФ, а также ДЛС полностью совпадали, что позволяет заключить, что вторичные и третичные структуры препаратов структурно идентичны. Содержание всех видов примесей у GP30931 не превышало значений «Мунджаро». Различие значений EC50 для активации GLP-1 и GIP рецепторов составило ≤5 %, сравнительная биологическая активность находились в пределах 0,80–1,25.

Заключение

Заключение. Комплекс проведенных исследований с использованием ортогональных методов показал, что «Седжаро» (GP30931) и «Мунджаро» структурно идентичны, сопоставимы по профилю примесей и биологически эквивалентны. Полученные данные вносят значимый вклад в научное обоснование эквивалентности воспроизведенного препарата тирзепатида и референтного оригинального препарата, тем самым обеспечивая надежную основу для дальнейшей регистрации и клинического применения Седжаро® без проведения дополнительных клинических исследований.

Introduction

Introduction. Metabolic syndrome is a multifactorial complex of metabolic disorders accompanied by type 2 diabetes mellitus and abdominal obesity. In the pharmacological correction of obesity and type 2 diabetes mellitus, the greatest effect is demonstrated by dual agonists of glucagon-like peptide-1 (GLP-1) and glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP), in particular tirzepatide. The original drug (Mundjaro, pln: tirzepatide) is not registered in the Eurasian Economic Union (EAEU), which limits its availability to patients and leads to the need to develop a domestic generic.

Aim

Aim. Conducting a physicochemical and biological characterization of the drug Sejaro® (GP30931) in comparison with the original drug Mundjaro® to establish their comparability.

Materials and methods

Materials and methods. Three batches of each drug (solution for subcutaneous administration, 25 mg/ml) were studied. The primary structure was verified using high-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (HPLC-MS), peptide mapping and NMR (2D-NMR-1H-1H TOCSY). Secondary structure, higher order structures and aggregation were assessed by circular dichroism (CD), high-resolution nuclear magnetic resonance (NMR), fluorescence quantum yield (FQY) and dynamic light scattering (DLS). Impurity profiles were analyzed using size-exclusion and reversed-phase HPLC. Functional activity was determined in cellular tests for activation of calcium currents through GLP-1 and GIP receptors with an assessment of the half-maximal effective concentration (EC50); equivalence was confirmed by the two-sided test (TOST, 90 % confidence interval).

Results and discussion

Results and discussion. HPLC-MS and mapping confirmed identical mass (4,810.52 Da) and amino acid sequence. NMR spectra, CD and CF profiles, and DLS were completely consistent, which allows us to conclude that the secondary and tertiary structures of the preparations are structurally identical. The content of all types of impurities in GP30931 did not exceed the Munjaro values. The difference in EC50 values for activation of GLP-1 and GIP receptors was ≤5 %, the comparative biological activity was within 0.80–1.25.

Conclusion

Conclusion. The complex of studies conducted using orthogonal methods showed that "Sejaro" (GP30931) and "Mundjaro" are structurally identical, comparable in impurity profile and biologically equivalent. The obtained data make a significant contribution to the scientific substantiation of the equivalence of the reproduced drug tirzepatide and the reference original drug, thereby providing a reliable basis for further registration and clinical use of Sejaro® without conducting additional clinical studies.

тирзепатидGLP-1GIPвоспроизведенный пептидфизико химическая характеризацияЯМРдженерикtirzepatideGLP-1GIPrecombinant peptidephysicochemical characterizationNMRgenericСпонсор данного исследования – ООО «ГЕРОФАРМ».The sponsor of this study is LLC "GEROPHARM".ReferencesHirode G., Wong R. J. Trends in the prevalence of metabolic syndrome in the United States, 2011-2016. Jama. 2020;323(24):2526–2528. DOI: 10.1001/jama.2020.4501.Hirode G., Wong R. J. Trends in the prevalence of metabolic syndrome in the United States, 2011-2016. Jama. 2020;323(24):2526–2528. DOI: 10.1001/jama.2020.4501.Wang H. H., Lee D. K., Liu M., Portincasa P., Wang D. Q.-H. Novel insights into the pathogenesis and management of the metabolic syndrome. Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition. 2020;23(3):189–230. DOI: 10.5223/pghn.2020.23.3.189.Wang H. H., Lee D. K., Liu M., Portincasa P., Wang D. Q.-H. Novel insights into the pathogenesis and management of the metabolic syndrome. Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition. 2020;23(3):189–230. DOI: 10.5223/pghn.2020.23.3.189.Belenkov Yu. N., Privalova E. V., Kaplunova V. Y., Zektser V. Y., Vinogradova N. N., Ilgisonis I. S., Shakaryants G. A., Kozhevnikova M. V., Lishuta A. S. Metabolic Syndrome: Development of the Issue, Main Diagnostic Criteria. Rational Pharmacotherapy in Cardiology. 2018;14(5):757–764. (In Russ.) DOI: 10.20996/1819-6446-2018-14-5-757-764.Belenkov Yu. N., Privalova E. V., Kaplunova V. Y., Zektser V. Y., Vinogradova N. N., Ilgisonis I. S., Shakaryants G. A., Kozhevnikova M. V., Lishuta A. S. Metabolic Syndrome: Development of the Issue, Main Diagnostic Criteria. Rational Pharmacotherapy in Cardiology. 2018;14(5):757–764. (In Russ.) DOI: 10.20996/1819-6446-2018-14-5-757-764.Schwartz S. S., Epstein S., Corkey B. E., Grant S. F. A., Gavin III J. R., Aguilar R. B. The time is right for a new classification system for diabetes: rationale and implications of the β-cell–centric classification schema. Diabetes Care. 2016;39(2):179–186. DOI: 10.2337/dc15-1585.Schwartz S. S., Epstein S., Corkey B. E., Grant S. F. A., Gavin III J. R., Aguilar R. B. The time is right for a new classification system for diabetes: rationale and implications of the β-cell–centric classification schema. Diabetes Care. 2016;39(2):179–186. DOI: 10.2337/dc15-1585.Schwartz S. S., Epstein S., Corkey B. E., Grant S. F. A., Gavin III J. R., Aguilar R. B., Herman M. E. A unified pathophysiological construct of diabetes and its complications. Trends in Endocrinology & Metabolism. 2017;28(9):645–655. DOI: 10.1016/j.tem.2017.05.005.Schwartz S. S., Epstein S., Corkey B. E., Grant S. F. A., Gavin III J. R., Aguilar R. B., Herman M. E. A unified pathophysiological construct of diabetes and its complications. Trends in Endocrinology & Metabolism. 2017;28(9):645–655. DOI: 10.1016/j.tem.2017.05.005.Tsygankova O. V., Veretyuk V. V., Ametov A. S. Incretins today: multiple effects and therapeutic potential. Diabetes mellitus. 2019;22(1):70–78. (In Russ.) DOI: 10.14341/DM9841.Tsygankova O. V., Veretyuk V. V., Ametov A. S. Incretins today: multiple effects and therapeutic potential. Diabetes mellitus. 2019;22(1):70–78. (In Russ.) DOI: 10.14341/DM9841.DeFronzo R. A. From the triumvirate to the ominous octet: a new paradigm for the treatment of type 2 diabetes mellitus. Diabetes. 2009;58(4):773–795. DOI: 10.2337/db09-9028.DeFronzo R. A. From the triumvirate to the ominous octet: a new paradigm for the treatment of type 2 diabetes mellitus. Diabetes. 2009;58(4):773–795. DOI: 10.2337/db09-9028.Kim W., Egan J. M. The role of incretins in glucose homeostasis and diabetes treatment. Pharmacological Reviews. 2008;60(4):470–512. DOI: 10.1124/pr.108.000604.Kim W., Egan J. M. The role of incretins in glucose homeostasis and diabetes treatment. Pharmacological Reviews. 2008;60(4):470–512. DOI: 10.1124/pr.108.000604.Coskun T., Sloop K. W., Loghin C., Alsina-Fernandez J., Urva S., Bokvist K. B., Cui X., Briere D. A., Cabrera O., Roell W. C., Kuchibhotla U., Moyers J. S., Benson C. T., Gimeno R. E., D'Alessio D. A., Haupt A. LY3298176, a novel dual GIP and GLP-1 receptor agonist for the treatment of type 2 diabetes mellitus: from discovery to clinical proof of concept. Molecular Metabolism. 2018;18:3–14. DOI: 10.1016/j.molmet.2018.09.009.Coskun T., Sloop K. W., Loghin C., Alsina-Fernandez J., Urva S., Bokvist K. B., Cui X., Briere D. A., Cabrera O., Roell W. C., Kuchibhotla U., Moyers J. S., Benson C. T., Gimeno R. E., D'Alessio D. A., Haupt A. LY3298176, a novel dual GIP and GLP-1 receptor agonist for the treatment of type 2 diabetes mellitus: from discovery to clinical proof of concept. Molecular Metabolism. 2018;18:3–14. DOI: 10.1016/j.molmet.2018.09.009.Sweta, Gupta S., Bansal S., Devi S., Sharma S., Laxmi, Deepa. Tirzepatide a novel anti diabetic molecule unfold dual action. Discover Public Health. 2024;21(1):75. DOI: 10.1186/s12982-024-00200-2.Sweta, Gupta S., Bansal S., Devi S., Sharma S., Laxmi, Deepa. Tirzepatide a novel anti diabetic molecule unfold dual action. Discover Public Health. 2024;21(1):75. DOI: 10.1186/s12982-024-00200-2.Fernández-Carneado J., Vallès-Miret M., Arrastia-Casado S., Almazán-Moga A., Macias M. J., Martin-Malpartida P., Vilaseca M., Díaz-Lobo M., Vazquez M., Sanahuja R. M., Gambús G., Ponsati B. First generic Teriparatide: structural and biological sameness to its reference medicinal product. Pharmaceutics. 2024;16(4):537. DOI: 10.3390/pharmaceutics16040537.Fernández-Carneado J., Vallès-Miret M., Arrastia-Casado S., Almazán-Moga A., Macias M. J., Martin-Malpartida P., Vilaseca M., Díaz-Lobo M., Vazquez M., Sanahuja R. M., Gambús G., Ponsati B. First generic Teriparatide: structural and biological sameness to its reference medicinal product. Pharmaceutics. 2024;16(4):537. DOI: 10.3390/pharmaceutics16040537.Rogers-Crovak J. A., Delaney E. J., Detlefsen D. J. Recommendation for Clarifying FDA Policy in Evaluating "Sameness" of Higher Order Structure for Generic Peptide Therapeutics. The AAPS Journal. 2024;27(1):8. DOI: 10.1208/s12248-024-00994-8.Rogers-Crovak J. A., Delaney E. J., Detlefsen D. J. Recommendation for Clarifying FDA Policy in Evaluating "Sameness" of Higher Order Structure for Generic Peptide Therapeutics. The AAPS Journal. 2024;27(1):8. DOI: 10.1208/s12248-024-00994-8.Demmon S., Bhargava S., Ciolek D., Halley J., Jaya N., Joubert M. K., Koepf E., Smith P., Trexler-Schmidt M., Tsai P. A cross-industry forum on benchmarking critical quality attribute identification and linkage to process characterization studies. Biologicals. 2020;67:9–20. DOI: 10.1016/j.biologicals.2020.06.008.Demmon S., Bhargava S., Ciolek D., Halley J., Jaya N., Joubert M. K., Koepf E., Smith P., Trexler-Schmidt M., Tsai P. A cross-industry forum on benchmarking critical quality attribute identification and linkage to process characterization studies. Biologicals. 2020;67:9–20. DOI: 10.1016/j.biologicals.2020.06.008.Sun B., Willard F. S., Feng D., Alsina-Fernandez J., Chen Q., Vieth M., Ho J. D., Showalter A. D., Stutsman C., Ding L., Suter T. M., Dunbar J. D., Carpenter J. W., Mohammed F. A., Aihara E., Brown R. A., Bueno A. B., Emmerson P. J., Moyers J. S., Kobilka T. S., Coghlan M. P., Kobilka B. K., Sloop K. W. Structural determinants of dual incretin receptor agonism by tirzepatide. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2022;119(13):e2116506119. DOI: 10.1073/pnas.2116506119.Sun B., Willard F. S., Feng D., Alsina-Fernandez J., Chen Q., Vieth M., Ho J. D., Showalter A. D., Stutsman C., Ding L., Suter T. M., Dunbar J. D., Carpenter J. W., Mohammed F. A., Aihara E., Brown R. A., Bueno A. B., Emmerson P. J., Moyers J. S., Kobilka T. S., Coghlan M. P., Kobilka B. K., Sloop K. W. Structural determinants of dual incretin receptor agonism by tirzepatide. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2022;119(13):e2116506119. DOI: 10.1073/pnas.2116506119.Micsonai A., Wien F., Kernya L., Lee Y.-H., Goto Y., Réfrégiers M., Kardos J. Accurate secondary structure prediction and fold recognition for circular dichroism spectroscopy. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2015;112(24):E3095–E3103. DOI: 10.1073/pnas.1500851112.Micsonai A., Wien F., Kernya L., Lee Y.-H., Goto Y., Réfrégiers M., Kardos J. Accurate secondary structure prediction and fold recognition for circular dichroism spectroscopy. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2015;112(24):E3095–E3103. DOI: 10.1073/pnas.1500851112.Micsonai A., Moussong É., Wien F., Boros E., Vadászi H., Murvai N., Lee Y.-H., Molnár T., Réfrégiers M., Goto Y., Tantos Á., Kardos J. BeStSel: webserver for secondary structure and fold prediction for protein CD spectroscopy. Nucleic Acids Research. 2022;50(W1):W90–W98. DOI: 10.1093/nar/gkac345.Micsonai A., Moussong É., Wien F., Boros E., Vadászi H., Murvai N., Lee Y.-H., Molnár T., Réfrégiers M., Goto Y., Tantos Á., Kardos J. BeStSel: webserver for secondary structure and fold prediction for protein CD spectroscopy. Nucleic Acids Research. 2022;50(W1):W90–W98. DOI: 10.1093/nar/gkac345.Wang D., Park J., Patil S. M., Smith C. J., Leazer Jr. J. L., Keire D. A., Chen K. An NMR-based similarity metric for higher order structure quality assessment among U.S. marketed insulin therapeutics. Journal of Pharmaceutical Sciences. 2020;109(4):1519–1528. DOI: 10.1016/j.xphs.2020.01.002.Wang D., Park J., Patil S. M., Smith C. J., Leazer Jr. J. L., Keire D. A., Chen K. An NMR-based similarity metric for higher order structure quality assessment among U.S. marketed insulin therapeutics. Journal of Pharmaceutical Sciences. 2020;109(4):1519–1528. DOI: 10.1016/j.xphs.2020.01.002.Arbogast L. W., Brinson R. G., Marino J. P. Application of natural isotopic abundance <sup>1</sup>H-<sup>13</sup>C- and <sup>1</sup>H-<sup>15</sup>N-correlated two-dimensional NMR for evaluation of the structure of protein therapeutics. In: Methods in enzymology. New York: Academic Press; 2016. Volume 566. P. 3–34. DOI: 10.1016/bs.mie.2015.09.037.Arbogast L. W., Brinson R. G., Marino J. P. Application of natural isotopic abundance <sup>1</sup>H-<sup>13</sup>C- and <sup>1</sup>H-<sup>15</sup>N-correlated two-dimensional NMR for evaluation of the structure of protein therapeutics. In: Methods in enzymology. New York: Academic Press; 2016. Volume 566. P. 3–34. DOI: 10.1016/bs.mie.2015.09.037.Levy G. C., Godwin A. D., Hewitt J. M., Sutcliffe C. Natural abundance <sup>15</sup>N and <sup>13</sup>C spectroscopy. Aminobenzoic acids, substituted anilines, and related compounds. Journal of Magnetic Resonance. 1978;29(3):553–562. DOI: 10.1016/0022-2364(78)90013-6.Levy G. C., Godwin A. D., Hewitt J. M., Sutcliffe C. Natural abundance <sup>15</sup>N and <sup>13</sup>C spectroscopy. Aminobenzoic acids, substituted anilines, and related compounds. Journal of Magnetic Resonance. 1978;29(3):553–562. DOI: 10.1016/0022-2364(78)90013-6.Kelly S. M., Jess T. J., Price N. C. How to study proteins by circular dichroism. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Proteins and Proteomics. 2005;1751(2):119–139. DOI: 10.1016/j.bbapap.2005.06.005.Kelly S. M., Jess T. J., Price N. C. How to study proteins by circular dichroism. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Proteins and Proteomics. 2005;1751(2):119–139. DOI: 10.1016/j.bbapap.2005.06.005.Jones C. Circular dichroism of biopharmaceutical proteins in a quality-regulated environment. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2022;219:114945. DOI: 10.1016/j.jpba.2022.114945.Jones C. Circular dichroism of biopharmaceutical proteins in a quality-regulated environment. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2022;219:114945. DOI: 10.1016/j.jpba.2022.114945.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.