197022, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, литера А; 414041, Астраханская обл., г. Астрахань, ул. Яблочкова, д. 11, кв. 21
14A, Prof. Popova str., Saint-Petersburg, 197022; Apartment 21, 11, Yablochkova str., Astrakhan, Astrakhan Region, 414041
197022, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, литера А
14A, Prof. Popova str., Saint-Petersburg, 197022
197022, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, литера А
14A, Prof. Popova str., Saint-Petersburg, 197022
197022, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, литера А
14A, Prof. Popova str., Saint-Petersburg, 197022
197022, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, литера А
14A, Prof. Popova str., Saint-Petersburg, 197022
Введение. Кумарин и его производные – БАВ растительного происхождения, проявляющие некоторые виды фармакологической активности, а также токсикологические эффекты. Побочные действия препаратов – производных кумарина, а также отравления, возникающие в связи с применением крысиного яда, кумаринсодержащих растений и т. д., обосновывают актуальность разработки экспрессной методики анализа производных кумарина.
Цель. Разработать экспрессную методику полуколичественного определения производных кумарина с применением бумажной хроматографии, провести валидационные испытания и апробацию методики на растительных объектах.
Материалы и методы. Для разработки методики использовали субстанции кумарина и гидроксида натрия, фильтровальную бумагу марки ФС и УФ-фонарь (365 нм). Методика включает импрегнацию бумажных полосок растворами гидроксида натрия (5–30 %), пробоподготовку образцов экстракцией водой или этанолом с последующей фильтрацией и визуальную детекцию флуоресценции. Валидацию проводили с использованием стандартных образцов фенольных соединений (производные кумарина, гидроксикоричных, бензойных кислот и флавоноидов).
Результаты и обсуждение. В результате исследований установлены оптимальные условия методики: концентрация импрегнирующего раствора гидроксида натрия – 10 %, использование бумаги марки ФС, время детекции – 20 с. Показано, что методика обладает селективностью к производным кумарина при выполнении ряда испытаний, которые отражены в дереве принятия решений. Подтверждена возможность полуколичественного определения с пределом обнаружения 1 · 10–6 мг/мл, проведена апробация на синтетических и растительных объектах.
Заключение. Разработана экспресс-методика полуколичественного определения производных кумарина, основанная на их щелочном гидролизе на бумажной подложке с детекцией по флуоресценции. Методика отличается простотой, относительно высокой чувствительностью (предел обнаружения – 1 · 10–6 мг/мл) и была успешно апробирована на лекарственных средствах, растительном сырье и других объектах. Предлагаемая методика рекомендована для использования в качестве эффективного инструмента предварительного скрининга в лабораторной практике.
Introduction. Coumarin and its derivatives are biologically active substances (BAS) of plant origin that exhibit a range of pharmacological activities as well as toxicological effects. The adverse effects of coumarin derivative drugs, along with poisonings caused by the use of rodenticides, coumarin-containing plants, and other related factors, justify the relevance of developing a rapid analytical method for the detection of coumarin derivatives.
Aim. To develop a rapid semi-quantitative method for the determination of coumarin derivatives using paper chromatography, perform validation tests, and apply the method to plant-based samples.
Materials and methods. For the development of the method were used substances coumarin and sodium hydroxide, filter paper brand FS and UV-lamp (365 nm). The technique includes impregnating paper bars with NaOH solutions (5–30 %), sample preparation with water or ethanol extraction followed by filtration, and visual fluorescence detection. Validation was performed using standard samples of phenolic compounds (coumarin derivatives, hydroxycorium derivatives, benzoic acids and flavonoids).
Results and discussion. As a result of the studies, the optimal conditions of the technique were established: concentration of the impregnating solution of sodium hydroxide – 10 %, use of SF-mark paper and detection time of 20 seconds. It is shown that the method has selectivity to coumarin derivatives when performing a number of tests, which are reflected in the «decision tree». Confirmed the possibility of semi-quantitative determination with detection limit 1 · 10–6 mg/ml and testing on synthetic and plant objects.
Conclusion. A rapid semi-quantitative method for the determination of coumarin derivatives has been developed, based on their alkaline hydrolysis on a paper substrate with subsequent fluorescence detection. The method is characterized by simplicity, high sensitivity (limit of detection 1 · 10–6 mg/mL), and was successfully tested on medicinal products, plant materials, and other objects. The proposed methodology is recommended as an effective tool for preliminary screening in laboratory practice.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.