pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2026-15-3-2323pharmjournal-2446Research ArticleМЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВANALYTICAL METHODSИзучение аминокислотного состава сырья остролодочника волосистого (Oxytropis pilosa (L.) DC.), произрастающего на территории Саратовской областиStudy of the amino acid composition of raw material of Oxytropis pilosa (L.) DC., growing in the Saratov regionhttps://orcid.org/0000-0003-1642-5399КараваеваЛ. В.KaravaevaL. V.

410012, Приволжский федеральный округ, Саратовская область, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112

112, Bolshaya Kazachia str., Saratov, Saratov Region, Privolzhsky Federal District, 410012

https://orcid.org/0000-0002-1714-9165МатвиенкоУ. А.MatvienkoU. A.

410012, Приволжский федеральный округ, Саратовская область, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112

112, Bolshaya Kazachia str., Saratov, Saratov Region, Privolzhsky Federal District, 410012

matvienko.ulia2104@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-9960-6699ПолуяновА. М.PoluyanovA. M.

119048, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119048

https://orcid.org/0000-0003-4628-9519ДурноваН. А.DurnovaN. A.

410012, Приволжский федеральный округ, Саратовская область, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112; 119048, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

112, Bolshaya Kazachia str., Saratov, Saratov Region, Privolzhsky Federal District, 410012; 8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119048

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Саратовский государственный медицинский университет имени В. И. Разумовского» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО «Саратовский ГМУ имени В. И. Разумовского» Минздрава России)РоссияSaratov State Medical University named after V. I. RazumovskyRussian FederationФедеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)РоссияI. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)Russian FederationФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Саратовский государственный медицинский университет имени В. И. Разумовского» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО «Саратовский ГМУ имени В. И. Разумовского» Минздрава России); Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)РоссияSaratov State Medical University named after V. I. Razumovsky; I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)Russian Federation202609092026153207216Copyright © Караваева Л.В., Матвиенко У.А., Полуянов А.М., Дурнова Н.А., 20262026Караваева Л.В., Матвиенко У.А., Полуянов А.М., Дурнова Н.А.Karavaeva L.V., Matvienko U.A., Poluyanov A.M., Durnova N.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/2446Введение

Введение. Аминокислоты (АК) – ключевые компоненты живых организмов. Лекарственные растения – ценные источники АК, которые повышают биодоступность других метаболитов и потенцируют их фармакологическое действие. Однако аминокислотный состав многих растений, в том числе Oxytropis pilosa (L.) DC., остается неизученным.

Цель

Цель. Установление качественного и количественного состава свободных и связанных аминокислот в сырье О. pilosa, произрастающего на территории Саратовской области.

Материалы и методы

Материалы и методы. В качестве объекта исследования использовали сырье О. pilosa, заготовленное в период массового цветения на территории Саратовской области. Качественный анализ свободных АК проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) в системе «н-бутанол – ацетон – ледяная уксусная кислота – вода» (35 : 35 : 10 : 20); 2%-й спиртовой раствор нингидрина (детектор). Количественное определение суммы свободных АК выполняли спектрофотометрическим методом на спектрофотометре Shimadzu UV-1800 (Япония) при аналитической длине волны 568 нм. Методом ВЭЖХ осуществляли качественный и количественный анализ свободных и связанных АК на хроматографе Shimadzu LC-20 Prominence с детектором SPD-M20A (Япония) с автосемплером SIL-20A и системой для сбора и обработки хроматографических данных LabSolutions. Для идентификации обнаруженных соединений использовали стандартные образцы (СО) АК. Содержание АК выражали в мг/г сухого сырья. Полученные данные статистически обрабатывали с помощью MS Excel 2017.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Методом ТСХ определен состав свободных АК водных извлечений из травы, цветков и листьев О. pilosa. Во всех исследуемых образцах идентифицированы 6 АК (аспарагиновая кислота, пролин, серин, треонин, валин, изолейцин). Наибольшее содержание суммы свободных АК найдено в траве О. pilosa (30,70 ± 0,39 мг/г). В результате ВЭЖХ-анализа АК в извлечении из травы после предварительного гидролиза выявлено 15 АК, среди которых лидируют аланин (66,056 ± 0,584 мг/г), 4-гидроксипролин (25,912 ± 0,278 мг/г), пролин (17,834 ± 0,168 мг/г) и гистидин (13,030 ± 0,086 мг/г).

Заключение

Заключение. Впервые установлен качественный и количественный состав свободных и связанных АК в сырье О. pilosa. Общее содержание аминокислот составило 165,659 ± 0,806 мг/г, при этом незаменимых АК – 16,958 ± 0,139 мг/г.

Introduction

Introduction. Amino acids (AAs) are key components of living organisms. Medicinal plants are valuable sources of AAs, which enhance the bioavailability of other metabolites and potentiate their pharmacological effects. However, the amino acid composition of many plants, including Oxytropis pilosa (L.) DC., remains unexplored.

Aim

Aim. To establish the qualitative and quantitative composition of free and bound amino acids in O. pilosa raw material growing in the Saratov region.

Materials and methods

Materials and methods. O. pilosa raw material collected during the period of mass flowering in the Saratov region was used as the object of the study. Qualitative analysis of free AAs was performed by thin-layer chromatography (TLC) using an n-butanol – acetone – glacial acetic acid – water system (35 : 35 : 10 : 20) with 2 % ninhydrin in alcohol as the detection reagent. Quantitative determination of the total free AAs was carried out by spectrophotometry using a Shimadzu UV-1800 spectrophotometer (Japan) at an analytical wavelength of 568 nm. Qualitative and quantitative analysis of free and bound AAs was performed by HPLC on a Shimadzu LC-20 Prominence chromatograph equipped with an SPD-M20A detector (Japan), an SIL-20A autosampler, and LabSolutions data acquisition and processing software. Reference standards of AAs were used for compound identification. AA content was expressed in mg/g of dry raw material. The obtained data were statistically processed using MS Excel 2017.

Results and discussion

Results and discussion. The composition of free AAs in aqueous extracts from the herb, flowers, and leaves of O. pilosa was determined by TLC. Six AAs (aspartic acid, proline, serine, threonine, valine, and isoleucine) were identified in all studied samples. The highest total free AA content was found in the herb of O. pilosa (30.70 ± 0.39 mg/g). HPLC analysis of AAs in the extract from the herb after preliminary hydrolysis revealed 15 AAs, among which the predominant ones were alanine (66.056 ± 0.584 mg/g), 4-hydroxyproline (25.912 ± 0.278 mg/g), proline (17.834 ± 0.168 mg/g), and histidine (13.030 ± 0.086 mg/g).

Conclusion

Conclusion. The qualitative and quantitative composition of free and bound AAs in O. pilosa raw material has been established for the first time. The total amino acid content was 165.659 ± 0.806 mg/g, with essential AAs accounting for 16.958 ± 0.139 mg/g.

травацветкилистьяOxytropis pilosa (L.) DC.аминокислотыТСХВЭЖХспектрофотометрияherbflowersleavesOxytropis pilosa (L.) DC.amino acidsTLCHPLCspectrophotometryReferencesWu G. Amino acids: biochemistry and nutrition. Boca Raton: CRC press; 2021. 816 p. https://doi.org/10.1201/9781003092742Wu G. Amino acids: biochemistry and nutrition. Boca Raton: CRC press; 2021. 816 p. https://doi.org/10.1201/9781003092742Petkova D., Stoyanova S., Dinkov G., Bogdanov M. G. Beyond Protein Building Blocks: A Review of Biological Roles and Therapeutic Potential of Free Amino Acids. International Journal of Molecular Sciences. 2025;26(23):11264. https://doi.org/10.3390/ijms262311264Petkova D., Stoyanova S., Dinkov G., Bogdanov M. G. Beyond Protein Building Blocks: A Review of Biological Roles and Therapeutic Potential of Free Amino Acids. International Journal of Molecular Sciences. 2025;26(23):11264. https://doi.org/10.3390/ijms262311264Гудкова А. А., Шестакова Г. Ю., Чистякова А. С., Сливкин А. И. Аминокислотный состав Polemonium coeruleum L. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2021;3:86–92.Gudkova A. A., Shestakova G. Yu., Chistyakova A. S., Slivkin A. I. Amino acid composition of Polemonium coeruleum L. Proceedings of Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy. 2021;3:86–92. (In Russ.)Шамилов А. А., Бубенчикова В. Н., Гарсия Е. Р. Анализ аминокислотного и элементного состава травы черноголовки разрезной (Prunella laciniata L.), произрастающей на Северном Кавказе. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2021;2:114–119.Shamilov A. A., Bubenchikova V. N., Garsiya E. R. Alalysis of amino acids and element content of Prunella laciniata L. herba growing at North Caucausis. Proceedings of Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy. 2021;2:114–119. (In Russ.)Недилько О. В., Яницкая А. В. Изучение аминокислотного состава надземной и подземной частей солодки голой. Химия растительного сырья. 2020;1:251–256. https://doi.org/10.14258/jcprm.2020014678Nedil’ko O. V., Yanitskaya A. V. The study of amino acid content of Glycyrrhiza glabra overground and underground parts. Chemistry of Plant raw material. 2020;1:251–256. (in Russ.). https://doi.org/10.14258/jcprm.2020014678Олешко Г. И., Ярыгина Т. И., Зорина Е. В., Решетникова М. Д. Разработка унифицированной методики количественного определения суммы свободных аминокислот в лекарственном растительном сырье и экстракционных препаратах. Фармация. 2011;3:14–17.Oleshko G. I., Yarygina T. I., Zorina E. V., Reshetnikova M. D. Development of a unified method for quantitative determination of the amount of free amino acids in medicinal plant materials and extraction preparations. Pharmacy. 2011;3:14–17. (In Russ.)Холина А. Б., Козыренко М. М., Артюкова Е. В., Санданов Д. В., Андриянова Е. А. Филогенетические взаимоотношения видов Oxytropis DC. subg. Oxytropis и Phacoxytropis (Fabaceae) Азиатской России на основе анализа нуклеотидных последовательностей межгенных спейсеров хлоропластного генома. Генетика. 2016;52(8):895–909. https://doi.org/10.7868/S0016675816060060Kholina A. B., Kozyrenko M. M., Artyukova E. V., Sandanov D. V., Andriyanova E. A. Phylogenetic Relationships of the Species of Oxytropis DC. Subg. Oxytropis and Phacoxytropis (Fabaceae) from Asian Russia Inferred from the Nucleotide Sequence Analysis of the Intergenic Spacers of the Chloroplast Genome. Russian Journal of Genetics. 2016;52(8):895–909. (In Russ.) https://doi.org/10.7868/S0016675816060060Акулова З. В., Бобров Е. Г., Васильева Л. И. Васильченко И. Т., Миняева Н. А., Улле З. Г., Цвелев Н. Н., Чефранова З. В., Яковлев Г. П., под редакцией Федорова А. А. Флора европейской части СССР. Т. 6. Л: Издательство АН СССР; 1987. 254 с.Akulova Z. V., Bobrov E. G., Vasil’eva L. I. Vasil’chenko I. T., Minyaeva N. A., Ulle Z. G., Tsvelev N. N., Chefranova Z. V., Yakovlev G. P., edited by Fedorova A. A. Flora of the European part of the USSR. V. 6. Leningrad: Izdatel'stvo AN SSSR; 1987. 254 p. (In Russ.)Еленевский А. Г., Буланый Ю. И., Радыгина В. И. Конспект флоры Саратовской области. Саратов: Наука; 2008. 232 с.Elenevskiy A. G., Bulanyy Yu. I., Radygina V. I. Abstract of the flora of the Saratov region. Saratov: Nauka; 2008. 232 p. (In Russ.)Amirkhanova A. S., Ustenova G. O. Review of the current status of study Oxytropis. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research. 2018;11(4):50–55. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2018.v11i4.23656Amirkhanova A. S., Ustenova G. O. Review of the current status of study Oxytropis. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research. 2018;11(4):50–55. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2018.v11i4.23656Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hydrangeaceae-Haloragaceae. Л.: Наука; 1987. 326 с.Plant resources of the USSR: Flowering plants, their chemical composition, use; Families Hydrangeaceae-Haloragaceae. Leningrad: Nauka; 1987. 326 p. (In Russ.)Полуянов А. М., Матвиенко У. А., Соколова А. Ю., Савельева А. Е., Дурнова Н. А., Бобкова Н. В. Сравнительное изучение профиля свободных аминокислот в подземных органах нескольких видов рода Rumex на разных фазах вегетационного цикла. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2024;13(1):120–127. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2024-13-1-1719Poluyanov A. M., Matvienko U. A., Sokolova A. Yu., Savelyeva A. E., Durnova N. A., Bobkova N. V. Comparative Study of Free Amino Acid Profiles in Underground Organs of Several Species of the Genus Rumex During Different Phases of the Vegetation Cycle. Drug development & registration. 2024;13(1):120–127. (In Russ.) https://doi.org/10.33380/2305-2066-2024-13-1-1719Anumula K. R., Taylor P. B. Quantitative determination of phenyl isothiocyanate-derivatized amino sugars and amino sugar alcohols by high-performance liquid chromatography. Analytical Biochemistry. 1991;197(1):113–120. https://doi.org/10.1016/0003-2697(91)90365-ZAnumula K. R., Taylor P. B. Quantitative determination of phenyl isothiocyanate-derivatized amino sugars and amino sugar alcohols by high-performance liquid chromatography. Analytical Biochemistry. 1991;197(1):113–120. https://doi.org/10.1016/0003-2697(91)90365-ZTan Y.-Y., Wang J.-H. Li Q.-F. Content determination of free amino acids in glacial crazyweed (Oxytropis glacialis Benth ex Bge). Hubei Agricultural Sciences. 2003;1:76–78. https://doi.org/10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2003.01.034Tan Y.-Y., Wang J.-H. Li Q.-F. Content determination of free amino acids in glacial crazyweed (Oxytropis glacialis Benth ex Bge). Hubei Agricultural Sciences. 2003;1:76–78. https://doi.org/10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2003.01.034Amirhanova A. Sh., Ustenova G. O., Mombekob S. E., Turgumbayeva A. A., Eleken G K. Study of amino acid and fatty acid composition of medicinal plant raw materials Oxytropis glabra Lam. DC. Farmatsiya Kazakhstana. 2018;10:24–27. (In Kazakh)Amirhanova A. Sh., Ustenova G. O., Mombekob S. E., Turgumbayeva A. A., Eleken G K. Study of amino acid and fatty acid composition of medicinal plant raw materials Oxytropis glabra Lam. DC. Farmatsiya Kazakhstana. 2018;10:24–27. (In Kazakh)Li P., Yin Y.-L., Li D., Kim S. W., Wu G. Amino acids and immune function. British Journal of Nutrition. 2007;98(2):237–252. https://doi.org/10.1017/S000711450769936XLi P., Yin Y.-L., Li D., Kim S. W., Wu G. Amino acids and immune function. British Journal of Nutrition. 2007;98(2):237–252. https://doi.org/10.1017/S000711450769936XWu G., Bazer F. W., Burghardt R. C., Johnson G. A., Kim S. W., Knabe D. A., Li P., Li X., McKnight J. R., Satterfield M. C., Spencer T. E. Proline and hydroxyproline metabolism: implications for animal and human nutrition. Amino acids. 2011;40(4):1053–1063. https://doi.org/10.1007/s00726-010-0715-zWu G., Bazer F. W., Burghardt R. C., Johnson G. A., Kim S. W., Knabe D. A., Li P., Li X., McKnight J. R., Satterfield M. C., Spencer T. E. Proline and hydroxyproline metabolism: implications for animal and human nutrition. Amino acids. 2011;40(4):1053–1063. https://doi.org/10.1007/s00726-010-0715-zWu G. Amino acids: metabolism, functions, and nutrition. Amino acids. 2009;37(1):1–17. https://doi.org/10.1007/s00726-009-0269-0Wu G. Amino acids: metabolism, functions, and nutrition. Amino acids. 2009;37(1):1–17. https://doi.org/10.1007/s00726-009-0269-0Mehl A. A., Damião A. O., Viana S. D., Andretta C. P. Hard-to-heal wounds: a randomised trial of an oral proline-containing supplement to aid repair. Journal of Wound Care. 2021;30(1):26–31. https://doi.org/10.12968/jowc.2021.30.1.26Mehl A. A., Damião A. O., Viana S. D., Andretta C. P. Hard-to-heal wounds: a randomised trial of an oral proline-containing supplement to aid repair. Journal of Wound Care. 2021;30(1):26–31. https://doi.org/10.12968/jowc.2021.30.1.26Heidari R., Mohammadi H., Ghanbarinejad V., Ahmadi A., Ommati M. M., Niknahad H., Jamshidzadeh A., Azarpira N., Abdoli N. Proline supplementation mitigates the early stage of liver injury in bile duct ligated rats. Journal of Basic and Clinical Physiology and Pharmacology. 2018;30(1):91–101. https://doi.org/10.1515/jbcpp-2017-0221Heidari R., Mohammadi H., Ghanbarinejad V., Ahmadi A., Ommati M. M., Niknahad H., Jamshidzadeh A., Azarpira N., Abdoli N. Proline supplementation mitigates the early stage of liver injury in bile duct ligated rats. Journal of Basic and Clinical Physiology and Pharmacology. 2018;30(1):91–101. https://doi.org/10.1515/jbcpp-2017-0221Holeček M. Histidine in health and disease: metabolism, physiological importance, and use as a supplement. Nutrients. 2020;12(3):848. https://doi.org/10.3390/nu12030848Holeček M. Histidine in health and disease: metabolism, physiological importance, and use as a supplement. Nutrients. 2020;12(3):848. https://doi.org/10.3390/nu12030848Ling Z.-N., Jiang Y.-F., Ru J.-N., Lu J.-H., Ding B., Wu J. Amino acid metabolism in health and disease. Signal Transduction and Targeted Therapy. 2023;8(1):345. https://doi.org/10.1038/s41392-023-01569-3Ling Z.-N., Jiang Y.-F., Ru J.-N., Lu J.-H., Ding B., Wu J. Amino acid metabolism in health and disease. Signal Transduction and Targeted Therapy. 2023;8(1):345. https://doi.org/10.1038/s41392-023-01569-3Meletis C. D., Barker J. E. Therapeutic uses of amino acids. Alternative & Complementary Therapies. 2005;11(1):24–28. https://doi.org/10.1089/ACT.2005.11.24Meletis C. D., Barker J. E. Therapeutic uses of amino acids. Alternative & Complementary Therapies. 2005;11(1):24–28. https://doi.org/10.1089/ACT.2005.11.24Zou P., Costas C., Lu R., Cameselle C., Lin S., Zhang F., Wei Z., Otero P. Exploring the mechanism of flavonoid amination and its potential biological implications from an in-vitro and in-vivo perspective. Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 2026;66(9):1706–1726. https://doi.org/10.1080/10408398.2025.2554286Zou P., Costas C., Lu R., Cameselle C., Lin S., Zhang F., Wei Z., Otero P. Exploring the mechanism of flavonoid amination and its potential biological implications from an in-vitro and in-vivo perspective. Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 2026;66(9):1706–1726. https://doi.org/10.1080/10408398.2025.2554286

The authors declare that there are no conflicts of interest present.