pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2026-15-3-2369pharmjournal-2452Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPRECLINICAL AND CLINICAL STUDIESБезопасность противоопухолевого лекарственного средства на основе рекомбинантного штамма VV-GMCSF-Lact вируса осповакцины (доклинические исследования)Safety of an antitumor drug based on the recombinant vaccinia virus strain VV-GMCSF-Lact (preclinical studies)https://orcid.org/0000-0003-3145-1878КулигинаЕ. В.KuliginaE. V.

630090, г. Новосибирск, пр. Академика Лаврентьева, д. 8; 630090, г. Новосибирск, Советский район, микрорайон Академгородок, ул. Инженерная, д. 28

8, prospekt Akademika Lavrentieva, Novosibirsk, 630090;28, Inzhenernaya str., Akademgorodok Microdistrict, Sovetsky District, Novosibirsk, 630090 

kuligina@1bio.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0520-4021РжевскийД. И.RzhevskyD. I.

142290, Московская область, г. Пущино, проспект Науки, д. 6

6, prospekt Nauki, Pushchino, Moscow Region, 142290

https://orcid.org/0000-0002-2279-9285МурашевА. Н.MurashevA. N.

142290, Московская область, г. Пущино, проспект Науки, д. 6

6, prospekt Nauki, Pushchino, Moscow Region, 142290

https://orcid.org/0000-0002-2420-0483КочневаГ. В.KochnevaG. V.

630559, Новосибирская область, рабочий поселок Кольцово

Koltsovo, Novosibirsk Region, 630559

https://orcid.org/0000-0001-7788-2249КовальО. А.KovalO. A.

630090, г. Новосибирск, пр. Академика Лаврентьева, д. 8

8, prospekt Akademika Lavrentieva, Novosibirsk, 630090

https://orcid.org/0000-0001-5849-5892РихтерВ. А.RichterV. A.

630090, г. Новосибирск, пр. Академика Лаврентьева, д. 8

8, prospekt Akademika Lavrentieva, Novosibirsk, 630090

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины им. Д. Г. Кнорре Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН); Общество с ограниченной ответственностью «Онкостар»РоссияInstitute of Chemical Biology and Fundamental Medicine of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences (ICBFM SB RAS); Limited Liability Company "Oncostar"Russian FederationФилиал Федерального государственного бюджетного учреждения науки Государственного научного центра Российской Федерации Института биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова Российской академии наук (Филиал ГНЦ ИБХ РАН)РоссияBranch of the M. M. Shemyakin Yu. A. Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry of the Russian Academy of SciencesRussian FederationФедеральное бюджетное учреждение науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"» РоспотребнадзораРоссияState Research Center of Virology and Biotechnology "Vector"Russian FederationФедеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины им. Д. Г. Кнорре Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН)РоссияInstitute of Chemical Biology and Fundamental Medicine of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences (ICBFM SB RAS)Russian Federation202609092026153256270Copyright © Кулигина Е.В., Ржевский Д.И., Мурашев А.Н., Кочнева Г.В., Коваль О.А., Рихтер В.А., 20262026Кулигина Е.В., Ржевский Д.И., Мурашев А.Н., Кочнева Г.В., Коваль О.А., Рихтер В.А.Kuligina E.V., Rzhevsky D.I., Murashev A.N., Kochneva G.V., Koval O.A., Richter V.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/2452Введение

Введение. Виротерапия – один из наиболее перспективных и активно развивающихся подходов в противоопухолевой терапии. Разработанный коллективом авторов ИХБФМ СО РАН и ГНЦВБ «Вектор» противоопухолевый препарат на основе рекомбинантного штамма VV-GMCSF-Lact вируса осповакцины продемонстрировал высокую противоопухолевую эффективность в отношении опухолей человека и животных. Для дальнейшей фармацевтической разработки вирусного препарата необходимо оценить его общую токсичность и фармакологическую безопасность в доклинических исследованиях.

Цель

Цель. Оценка общей токсичности и фармакологической безопасности противоопухолевого препарата на основе рекомбинантного штамма VV-GMCSF-Lact вируса осповакцины.

Материалы и методы

Материалы и методы. Исследование нетоксичного дозового уровня лекарственного средства (ЛС) проводили на самках мышей ICR, крыс Wistar и кроликов калифорнийских при внутривенном (в/в) введении ЛС в дозах, максимально возможных для каждого вида животных. Острую токсичность оценивали на мышах ICR и крысах SD при однократном в/в или подкожном (п/к) введении препарата в двух дозах: 1 × 107 БОЕ (эквипотенциальная терапевтическая доза для человека) и максимально возможной для каждого вида животных. Исследования субхронической токсичности проводили на крысах SD и кроликах NZW (новозеландский белый кролик) при многократном п/к введении ЛС (4 инъекции с интервалом в 1 неделю) в дозах 1 × 107 БОЕ и 5 × 107 БОЕ. Фармакологическую безопасность ЛС оценивали на крысах SD в рамках исследований субхронической токсичности.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. При исследовании нетоксичного дозового уровня онколитического вируса VV-GMCSF-Lact с доказанной противоопухолевой активностью достигнуты дозы, превышающие однократную терапевтическую дозу для человека (1 × 107 БОЕ) в 7,5 раз (мыши), 30 раз (крысы) и 150 раз (кролики). Наблюдаемые клинические признаки свидетельствуют о достижении доз, близких к максимально переносимым. Исследование острой токсичности показало, что при п/к введении препарат безопасен в дозах, эквивалентных терапевтической, пятикратной (мыши) и двадцатикратной (крысы) терапевтической для человека; при в/в введении в обозначенных дозах ЛС способно вызывать ответную реакцию со стороны органов иммунной системы. В исследованиях субхронической токсичности установлено, что ЛС безопасно в дозах 1 × 107 БОЕ и 5 × 107 БОЕ и не оказывает токсического влияния на показатели двигательной активности, сердечно-сосудистой и дыхательной систем.

Заключение

Заключение. Доклинические исследования общей токсичности и фармакологической безопасности ЛС с доказанной противоопухолевой активностью, разработанного на основе рекомбинантного штамма VV-GMCSF-Lact вируса осповакцины, показали, что ЛС безопасно в использованных дозах и может быть рекомендовано для клинических исследований.  

Introduction

Introduction. Virotherapy is one of the most promising and rapidly developing approaches in antitumor therapy. An antitumor drug based on the recombinant vaccinia virus strain VV-GMCSF-Lact, developed by a team of researchers of the Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS and the State Research Center of Virology and Biotechnology "Vector", has demonstrated high antitumor efficacy against human and animal tumors. For further pharmaceutical development of VV-GMCSF-Lact evaluation of its systemic toxicity and pharmacological safety in preclinical studies is required.

Aim

Aim. Evaluation of the general toxicity and pharmacological safety of an antitumor drug based on the recombinant strain of vaccinia virus VV-GMCSF-Lact.

Materials and methods

Materials and methods. A non-toxic dose level study in females of ICR mice, Wistar rats, and California rabbits after intravenous (iv) administration at the maximum possible doses for each animal species was conducted. Acute toxicity of the drug was evaluated in ICR mice and SD rats with a single iv or subcutaneous (sc) administration of the drug at two doses: 1 × 107 PFU (human equipotent therapeutic dose) and the maximal dose for each animal species. Subchronic toxicity was studied in SD rats and New Zealand White rabbits with multiple sc administration (4 injections at 1-week intervals) of the drug at doses of 1 × 107 PFU and 5 × 107 PFU. The pharmacological safety of the drug was assessed in SD rats as part of subchronic toxicity studies.

Results and discussion

Results and discussion. When determining the non-toxic dose level of the oncolytic virus VV-GMCSF-Lact with proven antitumor activity, doses exceeding the single human therapeutic dose (1 × 107 PFU) by 7.5 times (mice), 30 times (rats), and 150 times (rabbits) were achieved. The observed clinical signs indicated that the achieved doses were close to the maximum tolerated. Acute toxicity studies showed that subcutaneous administration of the drug was safe at doses equivalent to the human therapeutic dose, as well as at 5-fold (mice) and 20-fold (rats) the human therapeutic dose. Intravenous administration at the indicated doses could induce a response from the organs of the immune system. Subchronic toxicity study showed that the drug was safe at doses of 1 × 107 PFU and 5 × 107 PFU and did not exert toxic effects on motor activity, the cardiovascular system, or the respiratory system.

Conclusion

Conclusion. Preclinical studies of the general toxicity and pharmacological safety of a drug with proven antitumor activity, developed on the basis of the recombinant VV-GMCSF-Lact strain of the vaccinia virus, showed that the drug is safe at the doses used and can be recommended for clinical trials.

доклинические исследованиявиротерапиявирус осповакциныVV-GMCSF-Lactбезопасностьтоксичностьpreclinical studiesanticancer drugsvirotherapyrecombinant vaccinia virusVV-GMCSF-LactsafetytoxicityРабота выполнена за счет средств государственного контракта от 22.11.2017 г. № 14.N08.11.0189 по теме «Доклинические исследования лекарственного средства, действующего на рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), для лечения рака молочной железы».This research was funded by the State Contract dated 22.11.2017 No. 14.N08.11.0189 «Preclinical studies of a drug acting on the epidermal growth factor receptor (EGFR) for the treatment of breast cancer».ReferencesКаприн А. Д., Старинский В. В., Шахзадова А. О., ред. Состояние онкологической помощи населению России в 2024 году. М.: ООО «Компания ПолиграфМастер»; 2025. 275 с.Kaprin A. D., Starinsky V. V., Shakhzadova A. O., editors. The state of oncological care for the population of Russia in 2024. Moscow: LLC "PoligrafMaster Company"; 2025. 275 p. (In Russ.)Ma R., Li Z., Chiocca E. A., Caligiuri M. A., Yu J. The emerging field of oncolytic virus-based cancer immunotherapy. Trends in Cancer. 2023.9(2):122–139. https://doi.org/10.1016/j.trecan.2022.10.003Ma R., Li Z., Chiocca E. A., Caligiuri M. A., Yu J. The emerging field of oncolytic virus-based cancer immunotherapy. Trends in Cancer. 2023.9(2):122–139. https://doi.org/10.1016/j.trecan.2022.10.003Alwithenani A., Hengswat P., Chiocca E. A. Oncolytic viruses as cancer therapeutics: From mechanistic insights to clinical translation. Molecular Therapy. 2025;33(5):2217–2228. http://doi.org/10.1016/j.ymthe.2025.03.035Alwithenani A., Hengswat P., Chiocca E. A. Oncolytic viruses as cancer therapeutics: From mechanistic insights to clinical translation. Molecular Therapy. 2025;33(5):2217–2228. http://doi.org/10.1016/j.ymthe.2025.03.035Xiao D., Zhang H., Liu Y., Li Y., Li G., Ning Y. Oncolytic viruses: advanced strategies in cancer therapy. Signal Transduction and Targeted Therapy. 2026;11(1):45. http://doi.org/10.1038/s41392-025-02343-3Xiao D., Zhang H., Liu Y., Li Y., Li G., Ning Y. Oncolytic viruses: advanced strategies in cancer therapy. Signal Transduction and Targeted Therapy. 2026;11(1):45. http://doi.org/10.1038/s41392-025-02343-3Vasileva N., Ageenko A., Byvakina A., Sen’kova A., Kochneva G., Mishinov S., Richter V., Kuligina E. The Recombinant Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact and Chemotherapy Drugs against Human Glioma. International Journal of Molecular Sciences. 2024;25(8);4244. https://doi.org/10.3390/ijms25084244Vasileva N., Ageenko A., Byvakina A., Sen’kova A., Kochneva G., Mishinov S., Richter V., Kuligina E. The Recombinant Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact and Chemotherapy Drugs against Human Glioma. International Journal of Molecular Sciences. 2024;25(8);4244. https://doi.org/10.3390/ijms25084244Stawowczyk M., Ye Y., Chen N. G. Vaccinia Virus—A Swiss Army Knife Against Cancer. Cancers. 2025;17(14):2324. http://doi.org/10.3390/cancers17142324Stawowczyk M., Ye Y., Chen N. G. Vaccinia Virus—A Swiss Army Knife Against Cancer. Cancers. 2025;17(14):2324. http://doi.org/10.3390/cancers17142324Kochneva G., Sivolobova G., Tkacheva A., Grazhdantseva A., Troitskaya O., Nushtaeva A., Tkachenko A., Kuligina E., Richter V., Koval O. Engineering of double recombinant vaccinia virus with enhanced oncolytic potential for solid tumor virotherapy. Oncotarget. 2016;7(45):74171–74188. https://doi.org/10.18632/oncotarget.12367Kochneva G., Sivolobova G., Tkacheva A., Grazhdantseva A., Troitskaya O., Nushtaeva A., Tkachenko A., Kuligina E., Richter V., Koval O. Engineering of double recombinant vaccinia virus with enhanced oncolytic potential for solid tumor virotherapy. Oncotarget. 2016;7(45):74171–74188. https://doi.org/10.18632/oncotarget.12367Кулигина Е. В., Коваль О. А., Рихтер В. А., Кочнева Г. В., Сиволобова Г. Ф., Гражданцева А. А., Трошкова Г. П. Противоопухолевое средство на основе рекомбинантного штамма вируса осповакцины и способ его получения. Патент РФ на изобретение № RU 2730657 С1. 24.08.2020. Доступно по https://patents.google.com/patent/RU2730657C1/ Ссылка активна на 13.07.2026.Kuligina E. V., Koval O. A., Richter V. A., Kochneva G. V., Sivolobova G. F., Grazhdantseva A. A., Troshkova G. P. Antineoplastic agent based on recombinant vaccinia virus strain contains recombinant strain VV-GMCSF-Lact and method of its production. Patent RUS № 2730657 С1. 24.08.2020. Available at: https://patents.google.com/patent/RU2730657C1/ Accessed: 13.07.2026. (In Russ.)Кочнева Г. В., Ткачева А. В., Сиволобова Г. Ф., Гражданцева А. А., Юнусова А. Ю., Рябчикова Е. И., Кулигина Е. В., Коваль О. А., Рихтер В. А. Противоопухолевый потенциал рекомбинантного штамма вируса осповакцины, продуцирующего секретируемый химерный белок, состоящий из гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора человека и онкотоксического белка лактаптина. Биофармацевтический журнал. 2017;9(1):11–21.Kochneva G. V., Tkacheva A. V., Sivolobova G. F., Grazhdantseva A. A., Unusova A. Yu., Ryabchikova E. I., Kuligina E. V., Koval O. A., Richter V. A. Antitumor potential of recombinant vaccinia virus strain, which produces a secreted chimera protein, composed of human GM-CSF and oncotoxic peptide lactaptin. Journal of Biopharmaceuticals. 2017;9(1):11–21. (In Russ.)Кочнева Г. В., Гражданцева А. А., Сиволобова Г. Ф., Ткачева А. В., Швалов А. Н., Юнусова А. Ю., Рябчикова Е. И., Нетесов С. В. Модель искусственного метастазирования эпидермоидной карциномы человека А431 на мышах линии nude для исследования онколитической активности вируса осповакцины. Вавиловский журнал генетики и селекции. 2015;19(4):480–486. https://doi.org/10.18699/VJ15.064Kochneva G. V., Grazhdantseva A. A., Sivolobova G. F., Tkacheva A. V., Shvalov A. N., Unusova A. Yu., Ryabchikova E. I., Netesov S. V. A model of the artificial metastasis of human epidermoid carcinoma A431 in nude mice for examination of the oncolytic activity of vaccinia virus. Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2015;19(4):480–486. (In Russ.) https://doi.org/10.18699/VJ15.064Koval O., Kochneva G., Tkachenko A., Troitskaya O., Sivolobova G. Grazhdantseva A., Nushtaeva A., Kuligina E., Richter V. Recombinant vaccinia viruses coding transgenes of apoptosis-inducing proteins enhance apoptosis but not immunogenicity of infected tumor cells. Bio-Med Research International. 2017;(30):3620510. https://doi.org/10.1155/2017/3620510Koval O., Kochneva G., Tkachenko A., Troitskaya O., Sivolobova G. Grazhdantseva A., Nushtaeva A., Kuligina E., Richter V. Recombinant vaccinia viruses coding transgenes of apoptosis-inducing proteins enhance apoptosis but not immunogenicity of infected tumor cells. Bio-Med Research International. 2017;(30):3620510. https://doi.org/10.1155/2017/3620510Vasileva N., Ageenko A., Dmitrieva M., Nushtaeva A., Mishinov S., Kochneva G., Richter V., Kuligina E. Double Recombinant Vaccinia Virus: A Candidate Drug against Human Glioblastoma. Life. 2021;11(10):1084. https://doi.org/10.3390/life11101084Vasileva N., Ageenko A., Dmitrieva M., Nushtaeva A., Mishinov S., Kochneva G., Richter V., Kuligina E. Double Recombinant Vaccinia Virus: A Candidate Drug against Human Glioblastoma. Life. 2021;11(10):1084. https://doi.org/10.3390/life11101084Васильева Н. С., Агеенко А. Б., Рихтер В. А., Кулигина Е. В. Сигнальные пути, определяющие эффективность терапии глиобластомы вирусом осповакцины. Acta Naturae. 2022;14(53):62–70.Vasilyeva N. S., Ageenko A. B., Richter V. A., Kuligina E. V. Signaling pathways determining the efficacy of vaccinia virus therapy for glioblastoma. Acta Naturae. 2022;14(53):62–70. (In Russ.)Ageenko A., Vasileva N., Yusubalieva G., Sen’kova A., Romashchenko A., Gubskiy I., Zabozlaev F., Zavyalov E., Dymova M., Richter V., Kuligina E. Efficacy of Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact Against Immunocompetent Glioma. Cells. 2025;14(20):1619. https://doi.org/10.3390/cells14201619Ageenko A., Vasileva N., Yusubalieva G., Sen’kova A., Romashchenko A., Gubskiy I., Zabozlaev F., Zavyalov E., Dymova M., Richter V., Kuligina E. Efficacy of Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact Against Immunocompetent Glioma. Cells. 2025;14(20):1619. https://doi.org/10.3390/cells14201619Миронов А. Н., Меркулов В. А., Бунятян Н. Д., Бондарев В. П., и др., ред. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (иммунобиологические лекарственные препараты). М.: Гриф и К; 2012. 532 с.Mironov A. N., Merkulov V. A., Bunyatyan N. D., Bondarev V. P., et al., editors. Guidelines for Conducting Preclinical Studies of Medicinal Products (Immunobiological Medicinal Products). Moscow: Grif i K; 2012. 532 p. (In Russ.)Kemp V., van den Wollenberg D. J. M., Camps M. G. M., van Hall T., Kinderman P., Pronk-van Montfoort N., Hoeben R. C. Arming oncolytic reovirus with GM-CSF gene to enhance immunity. Cancer Gene Therapy. 2019;26:268–281. https://doi.org/10.1038/s41417-018-0063-9Kemp V., van den Wollenberg D. J. M., Camps M. G. M., van Hall T., Kinderman P., Pronk-van Montfoort N., Hoeben R. C. Arming oncolytic reovirus with GM-CSF gene to enhance immunity. Cancer Gene Therapy. 2019;26:268–281. https://doi.org/10.1038/s41417-018-0063-9Shi X., Sun K., Li L., Xian J., Wang P., Jia, F., Xu F. Oncolytic Activity of Sindbis Virus with the Help of GM-CSF in Hepatocellular Carcinoma. International Journal of Molecular Sciences. 2024;25(13):7195. https://doi.org/10.3390/ijms25137195Shi X., Sun K., Li L., Xian J., Wang P., Jia, F., Xu F. Oncolytic Activity of Sindbis Virus with the Help of GM-CSF in Hepatocellular Carcinoma. International Journal of Molecular Sciences. 2024;25(13):7195. https://doi.org/10.3390/ijms25137195Cao H., Ye J., Li X., Si Y., Jin X., Xiong S., Ji T., Ding Y., Ma D., Gao Q., Wang X., Dai Z., Li F. A novel GM-CSF-encoding oncolytic adenovirus induces profound autophagy and promotes viral replication to enhance anti-tumor efficacy. Cancer Gene Therapy. 2025;32:1276–1291. https://doi.org/10.1038/s41417-025-00962-0Cao H., Ye J., Li X., Si Y., Jin X., Xiong S., Ji T., Ding Y., Ma D., Gao Q., Wang X., Dai Z., Li F. A novel GM-CSF-encoding oncolytic adenovirus induces profound autophagy and promotes viral replication to enhance anti-tumor efficacy. Cancer Gene Therapy. 2025;32:1276–1291. https://doi.org/10.1038/s41417-025-00962-0Ageenko A. B., Vasileva N. S., Chesnokova A. S., Semenov D. V., Byvakina A. A., Dymova M. A., Sen’kova A. V., Nushtaeva A. A., Leonteva A. A., Savinovskaya Yu. I., Kochneva G. V., Richter V. A., Kuligina E. V. Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact and Human GM-CSF Against GL261 Glioma in Immunocompetent Mice. Pharmaceuticals. 2026;19(3):434. https://doi.org/10.3390/ph19030434Ageenko A. B., Vasileva N. S., Chesnokova A. S., Semenov D. V., Byvakina A. A., Dymova M. A., Sen’kova A. V., Nushtaeva A. A., Leonteva A. A., Savinovskaya Yu. I., Kochneva G. V., Richter V. A., Kuligina E. V. Oncolytic Virus VV-GMCSF-Lact and Human GM-CSF Against GL261 Glioma in Immunocompetent Mice. Pharmaceuticals. 2026;19(3):434. https://doi.org/10.3390/ph19030434Thorne S. H., Hwang T.-H. H., O’Gorman W. E., Bartlett D. L., Sei S., Kanji F., Brown C., Werier J., Cho J.-H., Lee D.-E., Wang Y., Bell J., Kirn D. H. Rational strain selection and engineering creates a broad-spectrum, systemically effective oncolytic poxvirus, JX-963. Journal of Clinical Investigation. 2007;117(11):3350–3358. https://doi.org/10.1172/JCI32727Thorne S. H., Hwang T.-H. H., O’Gorman W. E., Bartlett D. L., Sei S., Kanji F., Brown C., Werier J., Cho J.-H., Lee D.-E., Wang Y., Bell J., Kirn D. H. Rational strain selection and engineering creates a broad-spectrum, systemically effective oncolytic poxvirus, JX-963. Journal of Clinical Investigation. 2007;117(11):3350–3358. https://doi.org/10.1172/JCI32727Kim J. H., Oh J. Y., Park B. H., Lee D. E., Kim J. S., Park H. E., Roh M. S., Je J. E., Yoon J. H., Thorne S. H., Kirn D., Hwang T. H. Systemic armed oncolytic and immunologic therapy for cancer with JX-594, a targeted poxvirus expressing GM-CSF. Molecular Therapy. 2006;14(3):361–370. https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2006.05.008Kim J. H., Oh J. Y., Park B. H., Lee D. E., Kim J. S., Park H. E., Roh M. S., Je J. E., Yoon J. H., Thorne S. H., Kirn D., Hwang T. H. Systemic armed oncolytic and immunologic therapy for cancer with JX-594, a targeted poxvirus expressing GM-CSF. Molecular Therapy. 2006;14(3):361–370. https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2006.05.008Pencavel T. D., Wilkinson M. J., Mansfield D. C., Khan A. A., Seth R., Karapanagiotou E. M., Roulstone V., Aguilar R. J., Chen N. G., Szalay A. A., Hayes A. J., Harrington K. J. Isolated limb perfusion with melphalan, tumour necrosis factor-alpha and oncolytic vaccinia virus improves tumour targeting and prolongs survival in a rat model of advanced extremity sarcoma. International Journal of Cancer. 2015;136(4):965–976. https://doi.org/10.1002/ijc.29059Pencavel T. D., Wilkinson M. J., Mansfield D. C., Khan A. A., Seth R., Karapanagiotou E. M., Roulstone V., Aguilar R. J., Chen N. G., Szalay A. A., Hayes A. J., Harrington K. J. Isolated limb perfusion with melphalan, tumour necrosis factor-alpha and oncolytic vaccinia virus improves tumour targeting and prolongs survival in a rat model of advanced extremity sarcoma. International Journal of Cancer. 2015;136(4):965–976. https://doi.org/10.1002/ijc.29059Haddad D. Genetically Engineered Vaccinia Viruses As Agents for Cancer Treatment, Imaging, and Transgene Delivery. Frontiers in Oncology. 2017;7:96. https://doi.org/10.3389/fonc.2017.00096Haddad D. Genetically Engineered Vaccinia Viruses As Agents for Cancer Treatment, Imaging, and Transgene Delivery. Frontiers in Oncology. 2017;7:96. https://doi.org/10.3389/fonc.2017.00096Rasa A., Alberts P. Oncolytic virus preclinical toxicology studies. Journal of Applied Toxicology. 2023;43(5):620–648. https://doi.org/10.1002/jat.4408Rasa A., Alberts P. Oncolytic virus preclinical toxicology studies. Journal of Applied Toxicology. 2023;43(5):620–648. https://doi.org/10.1002/jat.4408Li M., Zhang M., Ye Q., Liu Y., Qian W. Preclinical and clinical trials of oncolytic vaccinia virus in cancer immunotherapy: a comprehensive review. Cancer Biology & Medicine. 2023;20(9):646–661. https://doi.org/10.20892/j.issn.2095-3941.2023.0202Li M., Zhang M., Ye Q., Liu Y., Qian W. Preclinical and clinical trials of oncolytic vaccinia virus in cancer immunotherapy: a comprehensive review. Cancer Biology & Medicine. 2023;20(9):646–661. https://doi.org/10.20892/j.issn.2095-3941.2023.0202

The authors declare that there are no conflicts of interest present.