pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»pharmjournal-338Research ArticleЭФФЕКТИВНОСТЬ И БЕЗОПАСНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВDRUG PRODUCTS EFFICACY AND SAFETYРАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЕННОСТИ ПРЕПАРАТА ИНТЕРФЕРОНА АЛЬФА-2ADEVELOPMENT AND VALIDATION OF IMMUNOASSAY FOR IMMUNOGENICITY OF INTERFERON-ALPHA 2A DRUGSМитюшоваЕ. В.MityushovaE. V.noemail@neicon.ruФаустоваН. М.FaustovaN. M.noemail@neicon.ruПожарицкаяО. Н.PozharitskayaO. N.noemail@neicon.ruМакаровВ. Г.MakarovV. G.noemail@neicon.ruШиковА. Н.ShikovA. N.noemail@neicon.ruЗАО «Институт экспериментальной фармакологии»JSC «Institute of Experimental Pharmacology»АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ»JSC «SRA «House of Pharmacy»ЗАО «Санкт-Петербургский институт фармации»JSC «St.-Petersburg Institute of Pharmacy»20170901201901194200Copyright © Митюшова Е.В., Фаустова Н.М., Пожарицкая О.Н., Макаров В.Г., Шиков А.Н., 20192019Митюшова Е.В., Фаустова Н.М., Пожарицкая О.Н., Макаров В.Г., Шиков А.Н.Mityushova E.V., Faustova N.M., Pozharitskaya O.N., Makarov V.G., Shikov A.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/338

Интерфероны (IFN) - одна из первых групп цитокинов, которые были клонированы и экспрессированы в микроорганизмах. Применение интерферонов в клинической практике может приводить к широкому спектру побочных эффектов, в том числе к возникновению нежелательных последствий для иммунной системы, что и обуславливает необходимость проведения исследований их иммуногенности. Для определения концентрации антител к человеческому рекомбинантному IFN-α-2a в плазме крови лабораторных животных использован и валидирован метод непрямого иммуноферментного анализа. Методика специфична для определения концентрации антител в плазме крови мышей. Линейный диапазон методики составил 3,75-60,00 нг/мл, предел обнаружения 2,19 нг/мл. Точность, междневная и внутридневная прецизионности не превышают 15% на всех уровнях концентраций, что удовлетворяет всем валидационным требованиям.

Interferons were one of the first groups of cytokines to be cloned and produced in bacteria. Interferon-based drugs are widely used for treatment of various infections, inflammatory and autoimmune diseases and malignant tumors. Clinical use of interferons can result in wide range of side effects, including unwanted influence on immune system of patients. Therefore it is important to study immunogenicity of interferones. The method of indirect ELISA was adopted and validated for analysis of antibodies to human recombinant interferon in mice blood plasma. The specificity was confirmed for mice antibodies. The linearity was 3.75-60.00 ng/ml, the detection limit was 2.19 ng/ml. Accuracy, interday and intraday precision did not exceed 15% at all concentration levels, that satisfies all validation requirements.

иммуноглобулиныантителаальфа-интерферонплазмаИФАвалидацияimmunoglobulinsantibodyalpha-interferonblood plasmaELISAvalidationReferencesS.A. Stifter, C.G. Feng. Interfering with immunity: detrimental role of type I IFNs during infection // Journal of Immunology. 2015. V. 194. P. 2455-2465.S.A. Stifter, C.G. Feng. Interfering with immunity: detrimental role of type I IFNs during infection // Journal of Immunology. 2015. V. 194. P. 2455-2465.L. Grine, L. Dejager, C. Libert, R.E. Vandenbroucke. An inflammatory triangle in psoriasis: TNF, type I IFNs and IL-17 // Cytokine & Growth Factor Reviews. 2015. V. 26. P. 25-33.L. Grine, L. Dejager, C. Libert, R.E. Vandenbroucke. An inflammatory triangle in psoriasis: TNF, type I IFNs and IL-17 // Cytokine & Growth Factor Reviews. 2015. V. 26. P. 25-33.Ю.А. Вавиленкова. Современные представления о системе интерферона // Вестник Смоленской государственной медицинской академии. 2012. Т. 11(2). С. 74-82.Ю.А. Вавиленкова. Современные представления о системе интерферона // Вестник Смоленской государственной медицинской академии. 2012. Т. 11(2). С. 74-82.И.Г. Никитин. Пегилированные интерфероны-альфа: новые возможности лечения хронического гепатита С // Фарматека. 2002. Т. 9. С. 4.И.Г. Никитин. Пегилированные интерфероны-альфа: новые возможности лечения хронического гепатита С // Фарматека. 2002. Т. 9. С. 4.I. Garcia, P.A. Prats, M. Cervantes et al. Factors that influence the immunogenicity of human recombinant interferon alpha-2b in mice // Biotechnologia Applicada. 2002. V. 19. P.15-18.I. Garcia, P.A. Prats, M. Cervantes et al. Factors that influence the immunogenicity of human recombinant interferon alpha-2b in mice // Biotechnologia Applicada. 2002. V. 19. P.15-18.R.S. Yalow, S.A. Berson. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man // Journal of Clinical Investigation. 1960. V.39. P. 1157-1175.R.S. Yalow, S.A. Berson. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man // Journal of Clinical Investigation. 1960. V.39. P. 1157-1175.М. Тертон, Д.Р. Бангхем, К.А. Колкотт. Новые методы иммуноанализа. - М.: Мир. 1991. 280 c.М. Тертон, Д.Р. Бангхем, К.А. Колкотт. Новые методы иммуноанализа. - М.: Мир. 1991. 280 c.Иммунологические методы / Под ред. Г.Фримеля. - М.: Медицина. 1987. 472 с.Иммунологические методы / Под ред. Г.Фримеля. - М.: Медицина. 1987. 472 с.ELISA Instruction Manual (Cloud Clone Corp). URL: http://www.cloud-clone.us/manual/ELISA-Kit-for-Immunoglobulin-G-(IgG)-E90544Mu.pdf (Дата обращения 24.11.2015).ELISA Instruction Manual (Cloud Clone Corp). URL: http://www.cloud-clone.us/manual/ELISA-Kit-for-Immunoglobulin-G-(IgG)-E90544Mu.pdf (Дата обращения 24.11.2015).М.В. Шестакова, О.К. Викулова. Биосимиляры: презумпция «виновности» // Сахарный диабет. 2011. № 4. С. 91-99.М.В. Шестакова, О.К. Викулова. Биосимиляры: презумпция «виновности» // Сахарный диабет. 2011. № 4. С. 91-99.P. Tagliaferri, P. Tassone, S. Blotta et al. Antitumor therapeutic strategies based on the targeting of epidermal growth factor-induced survival pathways // Cancer Immunology, Immunotherapy. 2005. V.54. P.1-10.P. Tagliaferri, P. Tassone, S. Blotta et al. Antitumor therapeutic strategies based on the targeting of epidermal growth factor-induced survival pathways // Cancer Immunology, Immunotherapy. 2005. V.54. P.1-10.Directive 2010/63/EU of 22/09/2010 Guide for the care and use of laboratory animals 8th edition. National Academy of Sciences. Washington, D.C. 2010.Directive 2010/63/EU of 22/09/2010 Guide for the care and use of laboratory animals 8th edition. National Academy of Sciences. Washington, D.C. 2010.Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств. - М.: Министерство здравоохранения и социального развития РФ. 2007. 49 с.Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств. - М.: Министерство здравоохранения и социального развития РФ. 2007. 49 с.M. Deutsch, S.J. Hadziyannis. Old and emerging therapies in chronic hepatitis C: an update // Journal of Viral Hepatitis. 2008. V.15. P.2-11.M. Deutsch, S.J. Hadziyannis. Old and emerging therapies in chronic hepatitis C: an update // Journal of Viral Hepatitis. 2008. V.15. P.2-11.G.V. Papatheodoridis, S. Manolakopoulos, A.J. Archimandritis. Current treatment indications and strategies in chronic hepatitis B virus infection // World Journal of Gastroenterology. 2008. V.14. P.6902-6910.G.V. Papatheodoridis, S. Manolakopoulos, A.J. Archimandritis. Current treatment indications and strategies in chronic hepatitis B virus infection // World Journal of Gastroenterology. 2008. V.14. P.6902-6910.Guidance for Industry: Bioanalytical method validation. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER). U.S. Government Printing Office: Washington, DC, 2001.Guidance for Industry: Bioanalytical method validation. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER). U.S. Government Printing Office: Washington, DC, 2001.Валидация методов контроля химических и физико-химических показателей качества МИБП: порядок проведения и представления результатов. Методические указания. МУ 3.3.2.1886-04. 2004.Валидация методов контроля химических и физико-химических показателей качества МИБП: порядок проведения и представления результатов. Методические указания. МУ 3.3.2.1886-04. 2004.Н.В. Свежова, Д.Б. Шаркова, В.А. Громов и др. Методы математической обработки данных в иммуноферментном анализе // Клиническая лабораторная диагностика. 2008. №1. С. 3-9Н.В. Свежова, Д.Б. Шаркова, В.А. Громов и др. Методы математической обработки данных в иммуноферментном анализе // Клиническая лабораторная диагностика. 2008. №1. С. 3-9А.М. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова. Теория и практика иммуноферментного анализа. - М.: Высшая школа. 1991. 288 с.А.М. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова. Теория и практика иммуноферментного анализа. - М.: Высшая школа. 1991. 288 с.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.