pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2019-8-4-38-46pharmjournal-736Research ArticleМЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВANALYTICAL METHODSИзучение лекарственного растительного сырья грецкого орехаInvestigation of Walnut Herbal Drug Raw MaterialЧебышевН. В.ChebyshevN. V.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

СтреляеваА. В.StrelyaevaA. V.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

ЛежаваД. И.LezhavaD. I.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

dianos1993@mail.ruЛуферовА. Н.LuferovA. N.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

БобковаН. В.BobkovaN. V.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

КарташоваН. В.KartashovaN. V.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

КузнецовР. М.KuznetsovR. M.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)I. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)201926112019843846Copyright © Чебышев Н.В., Стреляева А.В., Лежава Д.И., Луферов А.Н., Бобкова Н.В., Карташова Н.В., Кузнецов Р.М., 20192019Чебышев Н.В., Стреляева А.В., Лежава Д.И., Луферов А.Н., Бобкова Н.В., Карташова Н.В., Кузнецов Р.М.Chebyshev N.V., Strelyaeva A.V., Lezhava D.I., Luferov A.N., Bobkova N.V., Kartashova N.V., Kuznetsov R.M.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/736Введение

Введение. Грецкий орех (Juglans regia L.) – лекарственное растение, содержащее большое количество биологически активных веществ. В качестве лекарственного сырья рядом авторов предлагается использовать листья грецкого ореха, в которых идентифицированы юглон, флавоноиды, дубильные вещества, аскорбиновая кислота и другие вещества. В настоящий момент разработана и предложена методика стандартизации данного вида сырья. Однако лекарственное растение грецкий орех может быть источником других видов сырья, таких как плоды грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости, коры грецкого ореха, перегородок грецкого ореха. Данные виды лекарственного сырья содержат большое количество биологически активных веществ и обладают большим потенциалом фармакологической активности. Поэтому изучение с последующей стандартизацией лекарственного растительного сырья плодов грецкого ореха в стадии молочно- восковой зрелости и коры грецкого ореха является актуальным.

Цель

Цель. Целью исследования является изучение внешних признаков, микроскопии сырья коры грецкого ореха и плодов грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости и химического состава спиртового извлечения из данных видов сырья.

Материалы и методы

Материалы и методы. В работе использовались методы хромато-масс-спектрометрии, ТСХ.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. При описании внешних признаков и микроскопии были выявлены диагностические признаки как цельного, так и измельченного сырья, и порошка коры грецкого ореха, плодов грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости. Спиртовое извлечение, полученное из лекарственного растительного сырья коры грецкого ореха, представляет собой прозрачную жидкость бурого цвета. Спиртовое извлечение, полученное из лекарственного растительного сырья плодов грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости, представляет собой прозрачную, зелено-бурую жидкость с ароматным запахом.

Заключение

Заключение. Методом ТСХ в коре грецкого ореха идентифицирована галловая кислота. Методом хромато-масс-спектрометрии в спиртовом извлечении из плодов грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости удалось идентифицировать 17 соединений, относящимся к различным классам БАВ. Были идентифицированы сахара, флавоноиды, фенольные соединения кумарины, органические кислоты. В спиртовом извлечении из коры грецкого ореха определены маркерные соединения, совокупность которых делает возможным быструю идентификацию данного вида сырья методом хромато-масс-спектрометрии. 

Introduction

Introduction. Walnut (Juglans regia L.) is a medicinal plant containing a large number of biologically active substances. A number of authors propose to use walnut leaves as medicinal raw materials, in which juglone, flavonoids, tannins, ascorbic acid and other substances are identified. Currently, a standardization technique for this type of raw material has been developed and proposed. However, the medicinal plant walnut can be a source of other types of raw materials, such as milky-waxed walnuts, walnut bark, and walnut partitions. These types of medicinal raw materials contain a large number of biologically active substances and have a great potential for pharmacological activity. Therefore, the study with the subsequent standardization of medicinal plant material of walnut fruits in the stage of milk-wax ripeness and walnut bark is relevant.

Aim

Aim. The aim of the study is to study the external signs, microscopy of raw walnut bark and walnut fruit in the stage of milky-wax ripeness and chemical composition of alcohol extract from these types of raw materials.

Materials and methods

Materials and methods. Chromato-mass spectrometry and TLC were used in the work.

Results and discussion

Results and discussion. When describing external signs and microscopy, diagnostic signs of both whole and crushed raw materials, and powder of walnut bark, and fruits of walnut in the stage of milky-wax ripeness were revealed. Alcohol extract obtained from medicinal plant raw materials walnut bark is a clear brown liquid. Alcohol extract obtained from medicinal plant raw materials of walnut fruit at the stage of milky-wax ripeness is a transparent, green-brown liquid with a fragrant odor.

Conclusion

Conclusion. Gallic acid was identified by TLC in walnut bark. Chromato-mass spectrometry in alcohol extraction from the fruit of walnut in the stage of milky-wax maturity was able to identify 17 compounds belonging to different classes of biologically active substances. Sugars, flavonoids, coumarin phenolic compounds, organic acids were identified. In alcoholic extraction from the bark of a walnut, marker compounds have been determined, the combination of which makes it possible to quickly identify this type of raw material using chromatography-mass spectrometry. 

грецкий орехкора грецкого орехаплоды грецкого орехаwalnutwalnut barkwalnut fruitReferencesАндриенко М. В., Затоковский Ф. Т. Грецкий орех в Приднестровье Садоводство и Виноградарство. М.: Медицина. 1989: 328.Andrienko M. V., Zatokovsky F. T. Walnut in Transdniestria Sadovodstvo and Vinogradarstvo. M.: Meditsina. 1989: 328 (in Russ.).Атлас лекарственных растений СССР. М.: ГИМЛ, 1962: 404.Atlas of Medicinal Plants of the USSR. M.: GUGK. 1962: 404 (in Russ.).Дайронас Ж. В., Пшукова И. В. Изучение состава липофильной фракции листьев ореха грецкого, произрастающего на Кавказских Минеральных Водах. Химия растительного сырья. 2010; 4: 91–93.Dayronas Zh. V., Pshukova I. V. Study of the composition of the lipophilic fraction of walnut leaves growing in the Caucasian Mineral Waters Chemistry of plant raw materials. Chemistry of plant raw materials. 2010. 4: 91–93 (in Russ.).Щеглова Т. А., Курилов Д. В., Стреляева А. В. Изучение химического состава и антиоксидантной активности настойки матричной гомеопатической листьев шалфея лекарственного. Фармация. 2012; 3: 27–30.Shcheglova T. A., Kurilov D. V., Strelyaeva A. V. The chemical composition and antioxidant activity of mother tincture from the leaves of Salvia officinalis. Pharmacy. 2012; 3: 27–30 (in Russ.).Solar A., Colaric M., Usenik V., Stampar F. Seasonal variations of selected flavonoids, phenolic acids and quinones in annual shoots of common walnut (Juglans regia L.). Plant Science 2006; 106: 453– 461. Doi: 10.1016/j.plantsci.2005.09.012.Solar A., Colaric M., Usenik V., Stampar F. Seasonal variations of selected flavonoids, phenolic acids and quinones in annual shoots of common walnut (Juglans regia L.). Plant Science 2006; 106: 453–461. Doi: 10.1016/j.plantsci.2005.09.012.Fernández-Agulló A., Pereira E., Freire M. S., Valentão P., Andrade P. B., González-Álvarez J., Pereira J. A. Influence of solvent on the antioxidant and antimicrobial properties of walnut (Juglans regia L.) green husk extracts. Industrial Crops and Products. 2013; 42: 126–132. Doi: 10.1016/j.indcrop.2012.05.021.Fernández-Agulló A., Pereira E., Freire M. S., Valentão P., Andrade P. B., González-Álvarez J., Pereira J. A. Influence of solvent on the antioxidant and antimicrobial properties of walnut (Juglans regia L.) green husk extracts. Industrial Crops and Products. 2013; 42: 126–132. Doi: 10.1016/j.indcrop.2012.05.021.Залыгина Е. В., Кошевая И. П., Подплетняя Е. А. Противомикробная активность густого водно-спиртового экстракта незрелых плодов ореха грецкого. Wschodnioeuropejskie Czasopismo Naukowe. 2017; 1-1(17): 127–134.Zalygina E. V., Koshevaya I. P., Podpletnyaya E. A. Antimicrobial activity of a thick aqueous-alcoholic extract of unripe walnut fruit. Czasopismo Naukowe. 2017; 1-1(17): 127–134 (in Russ.).Залыгина Е. В., Подплетняя Е. А. Исследование противоязвенной активности густого экстракта незрелых плодов грецкого ореха на модели диклофенак-индуцированной язвы желудка крыс. Актуальні питання фармацевтичної і медичної науки та практики. 2017; 10(3): 324–328.Zalygina E. V., Podpletnyaya E. A. Investigation of the antiulcer activity of a thick extract of unripe walnut fruit on a model of diclofenacinduced gastric ulcer of rats. Topical issues in pharmaceutical and medical science and practice. 2017; 10(3): 324–328. (in Ukraine).Верниковский В. В., Дайронас Ж. В., Зилфикаров И. Н., Хаджиева З. Д. Экстракция биологически активных веществ из сырья ореха грецкого: Современные подходы. Фармация. 2019; 1: 5–9. Doi: 10.29296/25419218-2019-01-01.Vernikovskiy V. V., Dayronas Zh. V., Zilfikarov I. N., Khadzhieva Z. D. Extraction of biologically active substances from raw walnut raw materials: Modern approaches. Pharmacy. 2019; 1: 5–9 (in Russ.).Carvalho M., Ferreira P. J., Mendes V. S., Silva R., Pereira J. A., Jerónimo C., Silva B. M. Human cancer cell antiproliferative and antioxidant activities of Juglans regia L. Food and Chemical Toxicology. 2010; 48: 441–447. Doi: 10.1016/j.fct.2009.10.043.Carvalho M., Ferreira P. J., Mendes V. S., Silva R., Pereira J. A., Jerónimo C., Silva B. M. Human cancer cell antiproliferative and antioxidant activities of Juglans regia L. Food and Chemical Toxicology. 2010; 48: 441–447. Doi: 10.1016/j.fct.2009.10.043.Raja V., Ahmad, S. I., Irshad M., Wani W. A., Siddiqi W. A, Shreaz S. Anticandidal activity of ethanolic root extract of Juglans regia (L.): Effect on growth, cell morphology, and key virulence factors. Journal de Mycologie Médicale. 2017; 27(4): 476–486. Doi: 10.1016/j.mycmed.2017.07.002.Raja V., Ahmad, S. I., Irshad M., Wani W. A., Siddiqi W. A, Shreaz S. Anticandidal activity of ethanolic root extract of Juglans regia (L.): Effect on growth, cell morphology, and key virulence factors. Journal de Mycologie Médicale. 2017; 27(4): 476–486. Doi: 10.1016/j.mycmed.2017.07.002.Куркин В. А., Рыжов В. М., Тарасенко Л. В., Железникова А. С., Помогайбин А. В. Морфолого-анатомическое исследование рахисов и черешков листа ореха грецкого (Juglans regia L.) Фундаментальные исследования. 2014; 5-1: 102–108.Kurkin V. A., Ryzhov V. M., Tarasenko L. V., Zheleznikova A. S., Pomogaybin A. V. Morphological-anatomical study of rachises and stalks of walnut leaf (Juglans regia L.) Basic research. 2014; 5-1: 102– 108 (in Russ.).Dev T. N., Apraj V., Bhagwat A., Mallya R., Sawant L., Pandita N. Pharmacognostic and Phytochemical Investigation of Juglans regia Linn. Bark. Pharmacognosy Journal. 2011; 3(25): 39-43. Doi: 10.5530/ pj.2011.25.7.Dev T. N., Apraj V., Bhagwat A., Mallya R., Sawant L., Pandita N. Pharmacognostic and Phytochemical Investigation of Juglans regia Linn. Bark. Pharmacognosy Journal. 2011; 3(25): 39-43. Doi: 10.5530/pj.2011.25.7.Pereira J. A., Oliveira I., Sousa A., Valenta˜o P., Andrade P. B., Ferreira I.C.F.R., Ferreres F., Bento A., Seabra R., Estevinho L. Walnut (Juglans regia L.) leaves: Phenolic compounds, antibacterial activity and antioxidant potential of different cultivars. Food and Chemical Toxicology. 2007; 45: 2287–2295. Doi: 10.1016/j.fct.2007.06.004.Pereira J. A., Oliveira I., Sousa A., Valenta˜o P., Andrade P. B., Ferreira I.C.F.R., Ferreres F., Bento A., Seabra R., Estevinho L. Walnut (Juglans regia L.) leaves: Phenolic compounds, antibacterial activity and antioxidant potential of different cultivars. Food and Chemical Toxicology. 2007; 45: 2287–2295. Doi: 10.1016/j.fct.2007.06.004.Labuckas D. O., Maestri D. M., Perello M., Martinez M. L., Lamarque A. L. Phenolics from walnut (Juglans regia L.) kernels: Antioxidant activity and interactions with proteins. Food Chemistry. 2008; 107: 607–612. Doi: 10.1016/j.foodchem.2007.08.051.Labuckas D. O., Maestri D. M., Perello M., Martinez M. L., Lamarque A. L. Phenolics from walnut (Juglans regia L.) kernels: Antioxidant activity and interactions with proteins. Food Chemistry. 2008; 107: 607–612. Doi: 10.1016/j.foodchem.2007.08.051.Abdallah I. B., Tlili N., Martinez-Force E., Gracia Pérez Rubio A., Perez-Camino M. C., Albouchi A., Boukhcina S. Content of carotenoids, tocopherols, sterols, triterpenic and aliphatic alcohols, and volatile compounds in six walnuts (Juglans regia L.) varieties. Food Chemistry. 2015; 173: 972–978. Doi: 10.1016/j.foodchem.2014.10.095.Abdallah I. B., Tlili N., Martinez-Force E., Gracia Pérez Rubio A., Perez-Camino M. C., Albouchi A., Boukhcina S. Content of carotenoids, tocopherols, sterols, triterpenic and aliphatic alcohols, and volatile compounds in six walnuts (Juglans regia L.) varieties. Food Chemistry. 2015; 173: 972–978. Doi: 10.1016/j.foodchem.2014.10.095.Oliveira I., Sousa A., Ferreira I.C.F.R., Bento A., Estevinho L., Pereira J. A. Total phenols, antioxidant potential and antimicrobial activity of walnut (Juglans regia L.) green husks. Food and Chemical Toxicology. 2008; 46: 2326–2331. Doi: 10.1016/j.fct.2008.03.017.Oliveira I., Sousa A., Ferreira I.C.F.R., Bento A., Estevinho L., Pereira J. A. Total phenols, antioxidant potential and antimicrobial activity of walnut (Juglans regia L.) green husks. Food and Chemical Toxicology. 2008; 46: 2326–2331. Doi: 10.1016/j.fct.2008.03.017.Pereira J. A., Oliveira I., Sousa A., Ferreira I.C.F.R., Bento A., Estevinho L. Bioactive properties and chemical composition of six walnuts (Juglans regia L.) cultivars. Food and Chemical Toxicology. 2008; 46: 2103–2111. Doi: 10.1016/j.fct.2008.02.002.Pereira J. A., Oliveira I., Sousa A., Ferreira I.C.F.R., Bento A., Estevinho L. Bioactive properties and chemical composition of six walnuts (Juglans regia L.) cultivars. Food and Chemical Toxicology. 2008; 46: 2103–2111. Doi: 10.1016/j.fct.2008.02.002.Colaric M., Veberic R., Solar A., Hudina M., Stampar F. Phenolic Acids, Syringaldehyde, and Juglone in Fruits of Different Cultivars of Juglans regia L. J. Agric. Food Chemistry. 2005; 53: 6390−6396. Doi: 10.1021/jf050721n.Colaric M., Veberic R., Solar A., Hudina M., Stampar F. Phenolic Acids, Syringaldehyde, and Juglone in Fruits of Different Cultivars of Juglans regia L. J. Agric. Food Chemistry. 2005; 53: 6390−6396. Doi: 10.1021/jf050721n.Горлов И. Ф., Юрина И. С. и др. Заявка № 2000128372/13(030034) на патент на изобр.: Способ получения экстракта грецких орехов молочно-восковой спелости в авиационном керосине, 13.11.2000.Gorlov I. F., Yurina I. S. et al. Application № 2000128372/13(030034) for a patent for an image: A method for obtaining an extract of walnuts of milky wax ripeness in aviation kerosene, 13.11.2000 (in Russ.).Самылина И. А., Стреляева А. В., Лазарева Н. Б., Садыков В. М. Гомеопатические препараты из фармакопейного лекарственного растительного сырья: Учебное пособие. М.: ООО Издательство «Медицинское информационное агентство», 2012: 432.Samylina I. A, Strelyaeva A. V., Lazareva N. B., Sadykov V. M. Homeopathic preparations from pharmacopeial medicinal plant raw materials: Textbook. M.: Publishing House «Medical Information Agency». 2012: 432 (in Russ.).Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издание. 2015. Avaliable at: http://193.232.7.120/feml/clinical_ref/pharmacopoeia_1_html/HTML/Russian Federation State Pharmacopoeia XIII ed. 2015. Avaliable at: http://193.232.7.120/feml/clinical_ref/pharmacopoeia_1_html/HTML/ (in Russ.).Самылина И. А., Ермакова В. А., Бобкова Н. В., Аносова О. Г. Лекарственное растительное сырье, сборы. Растительные порошки. Лекарственные средства на основе измельченного сырья. Фармакогнозия атлас. Том 3. Издательская группа «ГЭОТАР – Медиа». 2009: 448.Samylina I. A., Ermakova V. A., Bobkova N. V., Anosova O. G. Pharmacognosy atlas. Volume 3. Publishing group «GEOTAR – Media». 2009: 488 (in Russ.).Орлова О. Ю., Насонова Ю. К. Использование грецкого ореха молочно-восковой спелости для разработки функциональных продуктов питания. Научный журнал НИУ ИТМО. Серия: Процессы и аппараты пищевых производств. 2014; 2: 20.Orlova, O. Yu., Nasonova, Yu. K. The use of milky-wax ripeness for the development of functional foods. Scientific journal NRU ITMO. Series: Processes and Food Production Equipment. 2014; 2: 20 (in Russ.).Ермакова В. А., Бобкова Н. В., Самылина И. А. Микроскопическое исследование незрелых плодов грецкого ореха. «Традиционная медицина – 2007» Сборник научных трудов конгресса. М.: изд-во «Федерального научного клинико-экспериментального центра традиционных методов диагностики и лечения Росздрава – 2007». 2007: 43–47.Ermakova V. A., Bobkova N. V., Samylina I. A. Microscopic examination of immature walnut fruit. «Traditional Medicine – 2007» Collection of scientific papers of the congress M.: Publishing house of the «Federal Scientific Clinical and Experimental Center for Traditional Diagnostic and Treatment Methods of Roszdrav - 2007». 2007: 43–47 (in Russ.).Дайронас Ж. В. Морфолого-анатомическое изучение коры ореха грецкого (Juglans Regia L.), ореха серого (Juglans cinerea L.) и ореха чёрного (Juglans nigra L.) Современные проблемы науки и образования. 2015; 1-2: 234.Dayronas Zh. V. Morphological and anatomical study of walnut walnut (Juglans regia L.), gray walnut (Juglans cinerea L.) and walnut black (Juglans nigra L.) Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. 2015; 1-2: 234 (in Russ.).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.