pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2020-9-2-133-139pharmjournal-803Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPRECLINICAL AND CLINICAL STUDIESРазработка и валидация методики количественного определения валганцикловира и его метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФDevelopment and Validation of Valganciclovir and its Active Metabolite Ganciclovir Determination in Human Plasma by HPLC-UV MethodКомаровТ. Н.KomarovT. N.

Комаров Тимофей Николаевич

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Timofey N. Komarov

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

t.n.komarov@yandex.ruШохинИ. Е.ShohinI. E.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Igor E. Shohin

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

МискивО. А.MiskivO. A.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Olga A. Miskiv

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

БогдановаД. С.BogdanovaD. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Dana S. Bogdanova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

АлешинаА. В.AleshinaA. V.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Alexandra V. Aleshina

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

МедведевЮ. В.MedvedevYu. V.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3, 

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Yuri V. Medvedev

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246, 

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

БагаеваН. С.BagaevaN. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Natalia S. Bagaeva

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»)LLC «CPHA»ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»); ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)LLC «CPHA»; I. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)20203005202092133139Copyright © Комаров Т.Н., Шохин И.Е., Мискив О.А., Богданова Д.С., Алешина А.В., Медведев Ю.В., Багаева Н.С., 20202020Комаров Т.Н., Шохин И.Е., Мискив О.А., Богданова Д.С., Алешина А.В., Медведев Ю.В., Багаева Н.С.Komarov T.N., Shohin I.E., Miskiv O.A., Bogdanova D.S., Aleshina A.V., Medvedev Y.V., Bagaeva N.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/803Введение

Введение. Вирусные инфекции являются серьезной проблемой, возникающей в процессе применения иммунодепрессантов в ходе подготовки к трансплантации органов и в послеоперационном периоде. Цитомегаловирусная (ЦМВ) инфекция – одна из основных причин заболеваний у людей с ослабленным иммунитетом. Она оказывает непосредственное влияние на отторжение трансплантатов. Кроме того, ЦМВ часто является причиной других иммунных осложнений. Для лечения и профилактики данного инфекционного заболевания используют противовирусные лекарственные препараты. Валганцикловир является пролекарством, активным метаболитом которого является ганцикловир. Валганцикловир является препаратом выбора при лечении ЦМВ-инфекций. В настоящее время нет опубликованных методик о совместном определении валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектированием. В данной работе приведена разработка и валидация методики совместного определения валганцикловира и ганцикловира в плазме крови после пробоподготовки способом осаждения белков.

Цель

Цель. Целью исследования является разработка методики количественного определения валганцикловира и его активного метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектором (ВЭЖХ-УФ) для проведения фармакокинетических исследований.

Материалы и методы

Материалы и методы. Количественное определение валганцикловира и его метаболита ганцикловира в плазме крови проводили методом ВЭЖХ-УФ. В качестве пробоподготовки был использован способ осаждения белков.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, калибровочная кривая (линейность), точность, прецизионность, предел количественного определения, перенос пробы, стабильность.

Заключение

Заключение. Разработана и валидирована методика количественного определения валганцикловира и его активного метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФ. Подтвержденные аналитические диапазоны методики составили 5,0–1000,0 нг/мл для валганцикловира и 100,0–10000,0 нг/мл для ганцикловира в плазме крови. Полученные аналитические диапазоны позволяют применять разработанную методику для проведения аналитической части исследований фармакокинетики препаратов, содержащих валганцикловир.

Introduction

Introduction. Viral infections are a serious problem that occurs during the use of immunosuppressants in preparation for organ transplantation and in the postoperative period. Cytomegalovirus (CMV) infection is one of the main causes of diseases in people with weakened immune systems. It has a direct impact on one’s body and makes it more likely to reject a transplanted organ. Antiviral drugs are used to treat and prevent this infectious disease. Valganciclovir is a prodrug whose active metabolite is ganciclovir. Valganciclovir is the drug of choice in the treatment of CMV infections. Currently, there are no researches on the matter of simultaneous determination of both valganciclovir and ganciclovir in human blood plasma by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet detection. This research delivers a thorough description of development and validation of a particular method for simultaneous determination of valganciclovir and ganciclovir in the plasma after sample preparation by the method of protein precipitation.

Aim

Aim. The aim of this study is to develop method for the quantitative determination of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir in human plasma by HPLC-UV for pharmacokinetic studies.

Materials and methods

Materials and methods. Quantitative determination of tadalafil in plasma by HPLC-UV. A sample was prepared using protein precipitation.

Results and discussion

Results and discussion. This method was validated by next validation parameters: selectivity, matrix effect, calibration curve, accuracy, precision, lower limit of quantification, carry-over and stability.

Conclusion

Conclusion. The method of the quantitative determination of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir in human plasma was developed and validated by HPLC-UV. The analytical range of the was 5,0–1000,0 ng/ml for valganciclovir and 100,0–10000,0 ng/ml for ganciclovir in plasma. Method could be applied to determination of valganciclovir and ganciclovir in plasma for PK and BE studies.

валганцикловирганцикловирплазмаВЭЖХ-УФколичественное определениевалидациябиоэквивалентностьvalganciclovirganciclovirplasmaHPLC-UVquantitative determinationvalidationbioequivalenceReferencesTeshima D., Otsubo K., Yoshida T., Itoh Y., Oishi R. A simple and simultaneous determination of acyclovir and ganciclovir in human plasma by high‐performance liquid chromatography. Biomedical Chromatography. 2003; 17(8): 500–503. DOI: 10.1002/bmc.258.Teshima D., Otsubo K., Yoshida T., Itoh Y., Oishi R. A simple and simultaneous determination of acyclovir and ganciclovir in human plasma by high‐performance liquid chromatography. Biomedical Chromatography. 2003; 17(8): 500–503. DOI: 10.1002/bmc.258.Czock D., Scholle C., Rasche F. M., Schaarschmidt D., Keller F. Pharmacokinetics of valganciclovir and ganciclovir in renal impairment. Clinical Pharmacology & Therapeutics. 2002; 72(2): 142– 150. DOI: 10.1067/mcp.2002.126306.Czock D., Scholle C., Rasche F. M., Schaarschmidt D., Keller F. Pharmacokinetics of valganciclovir and ganciclovir in renal impairment. Clinical Pharmacology & Therapeutics. 2002; 72(2): 142– 150. DOI: 10.1067/mcp.2002.126306.Perrottet N., Beguin A., Meylan P., Pascual M., Manuel O., Buclin T., Biollaz J., Decosterd L. A. Determination of aciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography–spectrofluorimetric detection and stability studies in blood samples. Journal of Chromatography B. 2007; 852(1-2): 420–429. DOI: 10.1016/j.jchromb.2007.01.045.Perrottet N., Beguin A., Meylan P., Pascual M., Manuel O., Buclin T., Biollaz J., Decosterd L. A. Determination of aciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography–spectrofluorimetric detection and stability studies in blood samples. Journal of Chromatography B. 2007; 852(1-2): 420–429. DOI: 10.1016/j.jchromb.2007.01.045.Karpov I. A., Solovey N. V. Valganciclovir as a highly effective drug for the prevention and treatment of herpetic infections. Medical news. 2018; 3: 282 (in Russ.).Karpov I. A., Solovey N. V. Valganciclovir as a highly effective drug for the prevention and treatment of herpetic infections. Medical news. 2018; 3: 282 (in Russ.).Padullés A., Colom H., Armendariz Y., Cerezo G., Caldes A., Pou L., Torras J., Grinyó J. M., Lloberas N. Determination of ganciclovir in human plasma by ultra performance liquid chromatography–UV detection. Clinical biochemistry. 2012; 45(4-5): 309–314. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.12.014.Padullés A., Colom H., Armendariz Y., Cerezo G., Caldes A., Pou L., Torras J., Grinyó J. M., Lloberas N. Determination of ganciclovir in human plasma by ultra performance liquid chromatography–UV detection. Clinical biochemistry. 2012; 45(4-5): 309–314. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.12.014.Singh O., Saxena S., Mishra S., Khuroo A., Monif T. Determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometric detection. Clinical biochemistry. 2011; 44(10-11): 907–915. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.04.003.Singh O., Saxena S., Mishra S., Khuroo A., Monif T. Determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometric detection. Clinical biochemistry. 2011; 44(10-11): 907–915. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.04.003.Chu F., Kiang C. H., Sung M. L., Huang B., Reeve R. L., Tarnowski T. A rapid, sensitive HPLC method for the determination of ganciclovir in human plasma and serum. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis. 1999; 21(3): 657–667. DOI: 10.1016/S0731-7085(99)00161-2.Chu F., Kiang C. H., Sung M. L., Huang B., Reeve R. L., Tarnowski T. A rapid, sensitive HPLC method for the determination of ganciclovir in human plasma and serum. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis. 1999; 21(3): 657–667. DOI: 10.1016/S0731-7085(99)00161-2.Dao Y. J., Jiao Z., Zhong M. K. Simultaneous determination of aciclovir, ganciclovir, and penciclovir in human plasma by highperformance liquid chromatography with fluorescence detection. Journal of Chromatography B. 2008; 867(2): 270–276. DOI: 10.1016/j.jchromb.2008.04.022.Dao Y. J., Jiao Z., Zhong M. K. Simultaneous determination of aciclovir, ganciclovir, and penciclovir in human plasma by highperformance liquid chromatography with fluorescence detection. Journal of Chromatography B. 2008; 867(2): 270–276. DOI: 10.1016/j.jchromb.2008.04.022.Dogan-Topal B., Ozkan S. A., Uslu B. Simultaneous determination of abacavir, efavirenz and valganciclovir in human serum samples by isocratic HPLC-DAD detection. Chromatographia. 2007; 66(1): 25-30.Dogan-Topal B., Ozkan S. A., Uslu B. Simultaneous determination of abacavir, efavirenz and valganciclovir in human serum samples by isocratic HPLC-DAD detection. Chromatographia. 2007; 66(1): 25-30.Xu H. R., Li X. N., Chen W. L., Liu G. Y., Chu N. N., Yu C. A sensitive assay for simultaneous determination of plasma concentrations of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir by LC/MS/MS. Journal of Chromatography B. 2007; 848(2): 329–334. DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.10.053.Xu H. R., Li X. N., Chen W. L., Liu G. Y., Chu N. N., Yu C. A sensitive assay for simultaneous determination of plasma concentrations of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir by LC/MS/MS. Journal of Chromatography B. 2007; 848(2): 329–334. DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.10.053.Mironov A. N. Guidelines for the examination of medicines. T. II. M.: Grif and K. 2013: 280 (in Russ.).Mironov A. N. Guidelines for the examination of medicines. T. II. M.: Grif and K. 2013: 280 (in Russ.).Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.