pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2021-10-1-120-128pharmjournal-898Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPRECLINICAL AND CLINICAL STUDIESОпределение валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МСDevelopment and Validation of Valganciclovir and its Active Metabolite Ganciclovir Determination in Human Plasma by HPLC-MS/MS Methodhttps://orcid.org/0000-0001-8354-7877КомаровТ. Н.KomarovT. N.

Комаров Тимофей Николаевич

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Timofey N. Komarov

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

t.komarov@cpha.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1185-8630ШохинИ. Е.ShohinI. E.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Igor E. Shohin

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0001-7684-358XТокареваМ. А.TokarevaM. A.

119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Margarita A. Tokareva

8/2, Trubetskaya str., Mosсow, 119991

https://orcid.org/0000-0001-6621-1060АрчаковаО. А.ArchakovaO. A.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Olga A. Archakova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-4894-7001БогдановаД. С.BogdanovaD. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Dana S. Bogdanova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-2611-501XАлешинаА. В.AleshinaA. V.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Alexandra V. Aleshina

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0001-7496-8186БагаеваН. С.BagaevaN. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Natalia S. Bagaeva

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-2727-2148ДавыдановаВ. В.DavydanovaV. V.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Veronika V. Davydanova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»)РоссияLLC «CPHA»Russian FederationФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет)РоссияI. M. Sechenov First MSMU of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)Russian Federation202125022021101120128Copyright © Комаров Т.Н., Шохин И.Е., Токарева М.А., Арчакова О.А., Богданова Д.С., Алешина А.В., Багаева Н.С., Давыданова В.В., 20212021Комаров Т.Н., Шохин И.Е., Токарева М.А., Арчакова О.А., Богданова Д.С., Алешина А.В., Багаева Н.С., Давыданова В.В.Komarov T.N., Shohin I.E., Tokareva M.A., Archakova O.A., Bogdanova D.S., Aleshina A.V., Bagaeva N.S., Davydanova V.V.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/898Введение

Введение. В настоящее время физико-химические методы анализа активно используются для определения содержания лекарственных веществ в биологических жидкостях. Особенно широкое распространение приобрела высокоэффективная жидкостная хроматография с различными способами детектирования. Одной из наиболее сложных практических задач является хроматографическое разделение так называемых слабоудерживаемых соединений – лекарственных веществ, плохо удерживаемых на хроматографической колонке. Одними из таких веществ являются валганцикловир и ганцикловир.

Цель

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для проведения фармакокинетических исследований.

Материалы и методы

Материалы и методы. Определение валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки использован способ осаждения ацетонитрилом.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность.

Заключение

Заключение. Разработана и валидирована методика определения валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. Подтвержденные аналитические диапазоны методики составили 5,00–1000,00 нг/мл для валганцикловира и 50,00–10000,00 нг/мл для ганцикловира в плазме крови. Аналитические диапазоны позволяют применять разработанную методику для проведения исследований фармакокинетики препаратов валганцикловира и ганцикловира.

Introduction

Introduction. Currently, physicochemical methods of quantification are actively used to determine the content of drugs in biological fluids. High-performance liquid chromatography with various detection methods is particularly widespread. One of the most difficult practical tasks is the chromatographic separation of so-called poorly retained compounds – drug substances poorly retained on the chromatographic column. Valganciclovir and Ganciclovir are among such substances.

Aim

Aim. The aim of this study is to develop a method for valganciclovir and ganciclovir in human plasma by high performance liquid chromatography with tandem mass-spectrometry (HPLC-MS/MS) for pharmacokinetic studies.

Materials and methods

Materials and methods. Determination of valganciclovir and ganciclovir in plasma by HPLC-MS/MS. The samples were processed by acetonitrile protein precipitation.

Results and discussion

Results and discussion. This method was validated by next parameters: selectivity, matrix effect, calibration curve, accuracy, precision, recovery, lower limit of quantification, carry-over and stability.

Conclusion

Conclusion. The method of the determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma was developed and validated by HPLC-MS/MS. The linearity in plasma sample was achieved in the concentration range of 5.00–1000.00 ng/ml for valganciclovir and 50.00–10000.00 ng/ml for ganciclovir. Method could be applied to valganciclovir and ganciclovir determination in plasma for PK and BE studies.

валганцикловирганцикловирплазмаВЭЖХ-МС/МСвалидациябиоэквивалентностьvalganciclovirganciclovirplasmaHPLC-MS/MSvalidationbioequivalenceReferencesКарпов И. А., Соловей Н. В. Валганцикловир как высокоэффективное лекарственное средство профилактикии терапии герпетических инфекций. Медицинские новости. 2018;3:56–59.Karpov I. A., Salavei M. U. Valganciclovir as a highly effective drug for the prevention and treatment of herpes infections. Meditsinskie novosti. 2018;3:56–59. (In Belarus).Xu H.-R., Li X.-N., Chen W.-L., Liu G.-Y., Chu N.-N., Yu C. A sensitive assay for simultaneous determination of plasma concentrations of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir by LC/MS/MS. Journal of Chromatography B. 2007;848(2):329–334. DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.10.053.Xu H.-R., Li X.-N., Chen W.-L., Liu G.-Y., Chu N.-N., Yu C. A sensitive assay for simultaneous determination of plasma concentrations of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir by LC/MS/MS. Journal of Chromatography B. 2007;848(2):329–334. DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.10.053.Singh O., Saxena S., Mishra S., Khuroo A., Monif T. Determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometric detection. Clinical Biochemistry. 2011;44(10-11):907–915. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.04.003.Singh O., Saxena S., Mishra S., Khuroo A., Monif T. Determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometric detection. Clinical Biochemistry. 2011;44(10-11):907–915. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.04.003.Valganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01610.Valganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01610.Ganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01004.Ganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01004.Acyclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00787.Acyclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00787.Teshima D., Otsubo K., Yoshida T., Itoh Y., Oishi R. A simple and simultaneous determination of acyclovir and ganciclovir in human plasma by high‐performance liquid chromatography. Biomedical Chromatography. 2003;17(8):500–503. DOI: 10.1002/bmc.258.Teshima D., Otsubo K., Yoshida T., Itoh Y., Oishi R. A simple and simultaneous determination of acyclovir and ganciclovir in human plasma by high‐performance liquid chromatography. Biomedical Chromatography. 2003;17(8):500–503. DOI: 10.1002/bmc.258.Padullés A., Colom H., Armendariz Y., Cerezo G., Caldes A., Pou L., Torras J., Grinyó J. M., Lloberas N. Determination of ganciclovir in human plasma by ultra performance liquid chromatography–UV detection. Clinical Biochemistry. 2012;45(4-5):309–314. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.12.014.Padullés A., Colom H., Armendariz Y., Cerezo G., Caldes A., Pou L., Torras J., Grinyó J. M., Lloberas N. Determination of ganciclovir in human plasma by ultra performance liquid chromatography–UV detection. Clinical Biochemistry. 2012;45(4-5):309–314. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.12.014.Heinig K., Wirz T., Gajate-Perez A., Belli S. Determination of Ganciclovir and its prodrug Valganciclovir by hydrophilic interaction liquid chromatography–tandem mass spectrometry. Journal of Chromatography B. 2011;879(5-6):436–442. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.12.033.Heinig K., Wirz T., Gajate-Perez A., Belli S. Determination of Ganciclovir and its prodrug Valganciclovir by hydrophilic interaction liquid chromatography–tandem mass spectrometry. Journal of Chromatography B. 2011;879(5-6):436–442. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.12.033.Dogan-Topal B., Ozkan S. A., Uslu B. Simultaneous determination of abacavir, efavirenz and valganciclovir in human serum samples by isocratic HPLC-DAD detection. Chromatographia. 2007;66(1):25– 30. DOI: 10.1365/s10337-007-0302-y.Dogan-Topal B., Ozkan S. A., Uslu B. Simultaneous determination of abacavir, efavirenz and valganciclovir in human serum samples by isocratic HPLC-DAD detection. Chromatographia. 2007;66(1):25– 30. DOI: 10.1365/s10337-007-0302-y.Комаров Т. Н., Шохин И. Е., Мискив О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Медведев Ю. В., Багаева Н. С. Разработка и валидация методики количественного определения валганцикловира и его метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФ. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(2):133–139. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-2-133-139.Komarov T. N., Shohin I. E., Miskiv O. A., Bogdanova D. S., Aleshina A. V., Medvedev Yu. V., Bagaeva N. S. Development and Validation of Valganciclovir and its Active Metabolite Ganciclovir Determination in Human Plasma by HPLC-UV Method. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv = Drug development & registration. 2020;9(2):133–139. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-2-133-139.Миронов А. Н., ред. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К; 2013. 280 с.Mironov A. N. Rukovodstvo po ekspertize lekarstvennykh sredstv [Guidelines for the examination of medicines]. V. II. Moscow: Grif i K; 2013: 280 p. (In Russ.).Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.