Тринеева Ольга Валерьевна
фармацевтический факультет, кафедра фармацевтической химии и фармацевтической технологии
394006, Воронеж, Университетская пл., д. 1
Olga V. Trineeva
1, University sq., Voronezh, 394006
Введение. Как известно, подбор оптимальных условий анализа извлечений из лекарственного растительного сырья (ЛРС), а также лекарственных растительных препаратов и фармацевтических субстанций растительного происхождения, характеризующихся сложным вариабельным составом биологически активных веществ (БАВ), методом ТСХ представляет определенные трудности. Для конструирования подвижных фаз для разделения смесей БАВ растительного происхождения в тонком слое сорбента применяются следующие подходы: литературные источники; стандартные подвижные фазы; метод «элюирования пятна»; схема, предложенная фирмой Camag (Швейцария); модель «ПРИЗМА»; вариокамеры и др. В зарубежной литературе встречаются публикации по обобщению имеющихся экспериментальных данных по определению различных природных групп БАВ в объектах растительного происхождения. Однако в подобных обзорах не выявлены закономерности хроматографического поведения отдельных БАВ в тонком слое, а также влияние различных факторов на воспроизводимость величин Rf. Изучение возможности теоретического подхода к выбору оптимальных условий хроматографирования групп БАВ различной полярности, позволяющих провести их разделение, идентификацию и количественное определение методом ТСХ является актуальным и мало разработанным направлением хроматографии в целом.Цель. Целью настоящей работы являлась разработка теоретического подхода к выбору оптимальных условий хроматографического разделения различных групп БАВ растительного происхождения в тонком слое сорбента.Материалы и методы. Для исследования закономерностей хроматографического поведения в тонком слое представителей основных классов БАВ, присутствующих в ЛРС (аминокислоты, флавоноиды, дубильные вещества, простые сахара, аскорбиновая кислота, жирорастворимые витамины), было изучено значение основного фактора, влияющего на параметры эффективности хроматографического процесса – полярности элюента. В качестве объектов исследования использовали готовое измельченное сырье листьев крапивы двудомной, выпускаемое отечественным производителем, соответствующее требованиям нормативной документации, а также плоды облепихи крушиновидной, собранные на территории Воронежской области, согласно правилам заготовки ЛРС различных морфологических групп в свежем и высушенном виде.Результаты и обсуждение. Установлены закономерности элюирования и математические модели, описывающие хроматографическое поведение растительных БАВ в тонком слое сорбента. По совокупности полученных результатов с позиций эффективности хроматографического процесса были выбраны и теоретически обоснованы оптимальные условия их ТСХ-анализа. Для исследования качественного состава БАВ и достижения четкого разделения зон на хроматограммах разработаны и апробированы на изучаемом ЛРС ТСХ-методики с применением простого, фронтального или двумерного хроматографирования.Заключение. Показано, что определение и разделение в тонком слое сорбента гидрофильных и липофильных БАВ ЛРС при совместном присутствии требует различных подходов и приемов. В работе предложен алгоритм выбора подвижной фазы и приемов хроматографирования БАВ ЛРС. Выявленные математические модели, описывающие хроматографическое поведение БАВ, позволят подбирать условия, в которых возможно определять отдельные составляющие многокомпонентных смесей без предварительного разделения. Разработанные методики определения БАВ могут быть также использованы для стандартизации и оценки качества других видов ЛРС, фитопрепаратов и фармацевтических субстанций растительного происхождения.
Introduction. As is known, the selection of optimal conditions for the analysis of extracts from medicinal plant raw materials (MPМ), as well as medicinal herbal preparations and pharmaceutical substances of plant origin, characterized by a complex variable composition of biologically active substances (BAS) by TLC, presents certain difficulties. For the design of mobile phases for the separation of mixtures of BAS of plant origin, in a thin layer of sorbent, the following approaches are used: literary sources; standard mobile phases; spot elution method; the scheme proposed by the firm Camag (Switzerland); model "PRISMA"; variocameras and others. In foreign literature, there are publications on the generalization of the available experimental data on the determination of various natural groups of BAS in objects of plant origin. However, such reviews did not reveal the regularities of the chromatographic behavior of individual BAS in a thin layer, as well as the influence of various factors on the reproducibility of Rf values. The study of the possibility of a theoretical approach to the choice of optimal conditions for chromatography of groups of BAS of different polarity, allowing them to separate, identify and quantify by TLC is a relevant and poorly developed area of chromatography in general.Aim. The aim of this work was to develop a theoretical approach to the choice of optimal conditions for the chromatographic separation of various groups of BAS of plant origin in a thin layer of sorbent.Materials and methods. To study the regularities of chromatographic behavior in a thin layer of representatives of the main classes of BAS present in MPМ (amino acids, flavonoids, tannins, simple sugars, ascorbic acid, fat-soluble vitamins), the value of the main factor affecting the parameters of the efficiency of the chromatographic process, the polarity of the eluent, was studied. As objects of research, we used ready-made chopped raw material of nettle leaves, produced by a domestic manufacturer, that meets the requirements of regulatory documents, as well as sea buckthorn fruits collected on the territory of the Voronezh region, according to the rules for harvesting MPМ of various morphological groups in fresh and dried form.Results and discussion. The regularities of elution and mathematical models describing the chromatographic behavior of plant BAS in a thin layer of sorbent have been established. Based on the totality of the results obtained, from the standpoint of the efficiency of the chromatographic process, the optimal conditions for their TLC analysis were selected and theoretically substantiated. To study the qualitative composition of BAS and to achieve a clear separation of zones on chromatograms, TLC methods were developed and tested on the studied MPМ using simple, frontal or two-dimensional chromatography.Conclusion. It is shown that the determination and separation in a thin layer of the sorbent of hydrophilic and lipophilic BAS of MPМ in the presence of a joint requires different approaches and techniques. The paper proposes an algorithm for the selection of the mobile phase and methods of chromatography of BAS of medicinal products. The revealed mathematical models describing the chromatographic behavior of BAS will make it possible to select the conditions under which it is possible to determine the individual components of multicomponent mixtures without preliminary separation. The developed methods for the determination of BAS can also be used for standardization and quality assessment of other types of MPМ, phytopreparations and pharmaceutical substances of plant origin.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.