pharmjournalРазработка и регистрация лекарственных средствDrug development & registration2305-20662658-5049LLC «CPHA»10.33380/2305-2066-2021-10-2-120-127pharmjournal-947Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPRECLINICAL AND CLINICAL STUDIESОпределение транексамовой кислоты в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированиемDevelopment and Validation of Tranexamic Acid Determination in Human Plasma by HPLC-MS/MS methodhttps://orcid.org/0000-0003-2611-501XАлешинаА. В.AleshinaA. V.

Алешина Александра Вадимовна

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Alexandra V. Aleshina

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

a.aleshina@cpha.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8354-7877КомаровТ. Н.KomarovT. N.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3;

115409, г. Москва, Каширское шоссе, д. 31

Timofey N. Komarov

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246;

31, Kashirskoe highway, Moscow, 115409

https://orcid.org/0000-0001-6621-1060АрчаковаО. А.ArchakovaO. A.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Olga A. Archakova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-4894-7001ЩелгачеваД. С.ShchelgachevaD. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Dana S. Shchelgacheva

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0001-7496-8186БагаеваН. С.BagaevaN. S.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Natalia S. Bagaeva

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-2727-2148ДавыдановаВ. В.DavydanovaV. V.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3

Veronika V. Davydanova

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246

https://orcid.org/0000-0003-2734-5036СавченкоА. Ю.SavchenkoA. Yu.

115409, г. Москва, Каширское шоссе, д. 31

Alla Yu. Savchenko

31, Kashirskoe highway, Moscow, 115409

https://orcid.org/0000-0002-1185-8630ШохинИ. Е.ShohinI. E.

117246, г. Москва, Научный пр., д. 20, стр. 3;

117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Igor E. Shohin

20/3, Nauchny proezd, Moscow, 117246;

6, Mikluho-Maklaya str., Moscow, 117198

ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»)LLC "CPHA"ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»); ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ»LLC "CPHA"; National Research Nuclear University MEPhI (Moscow Engineering Physics Institute)ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ»National Research Nuclear University MEPhI (Moscow Engineering Physics Institute)ООО «Центр Фармацевтической Аналитики» (ООО «ЦФА»); ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» (Российский университет дружбы народов, РУДН)LLC "CPHA"; Peoples Friendship University of Russia (RUDN University)202129052021102120127Copyright © Алешина А.В., Комаров Т.Н., Арчакова О.А., Щелгачева Д.С., Багаева Н.С., Давыданова В.В., Савченко А.Ю., Шохин И.Е., 20212021Алешина А.В., Комаров Т.Н., Арчакова О.А., Щелгачева Д.С., Багаева Н.С., Давыданова В.В., Савченко А.Ю., Шохин И.Е.Aleshina A.V., Komarov T.N., Archakova O.A., Shchelgacheva D.S., Bagaeva N.S., Davydanova V.V., Savchenko A.Y., Shohin I.E.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmjournal.ru/jour/article/view/947

Введение. Транексамовая кислота является одним из наиболее распространенных препаратов, применяемых для остановки кровотечений после травм, хирургических вмешательств и в гинекологии. Наиболее распространенным аналитическим методом определения данного соединения является обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), однако из-за своей химической структуры данное соединение относится к группе так называемых слабоудерживаемых соединений, в связи с чем возникает необходимость разработки методики, позволяющей с наименьшими временными и ресурсными затратами, без использования специализированных колонок провести определение транексамовой кислоты в плазме крови человека.Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения транексамовой кислоты в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для проведения фармакокинетических исследований.Материалы и методы. Определение транексамовой кислоты в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки использовали способ осаждения ацетонитрилом.Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность.Заключение. Разработана и валидирована методика определения транексамовой кислоты в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. Подтвержденный аналитический диапазон методики составил 100,00–15000,00 нг/мл в плазме крови. Аналитический диапазон позволяет применять разработанную методику для проведения исследований фармакокинетики препаратов транексамовой кислоты.

Introduction. Tranexamic acid is one of the most common drugs used to stop bleeding after trauma, in surgery and gynecology. The most common analytical method for the determination of this compound is reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). However, this compound belongs to the group of so-called poorly retained compounds due to its chemical structure. It is necessary to develop an analytical method that will allow the determination of tranexamic acid in human blood plasma with the least time, resource costs and without the use of specialized columns.Aim. The aim of this study is to develop a method for tranexamic acid in human plasma by high performance liquid chromatography with tandem mass-spectrometry (HPLC-MS/MS) for pharmacokinetic studies.Materials and methods. Determination of tranexamic acid in plasma by HPLC-MS/MS. The samples were processed by acetonitrile protein precipitation.Results and discussion. This method was validated by next parameters: selectivity, matrix effect, calibration curve, accuracy, precision, recovery, lower limit of quantification, carry-over effect and stability.Conclusion. The method of the determination of tranexamic acid in human plasma was developed and validated by HPLC-MS/MS. The linearity in plasma sample was achieved in the concentration range of 100.00–15000.00 ng/ml. Method could be applied to tranexamic acid determination in plasma for pharmacokinetics and bioequivalence studies.

транексамовая кислотаплазмаВЭЖХ-МС/МСвалидациябиоэквивалентностьtranexamic acidplasmaHPLC-MS/MSvalidationbioequivalenceReferencesDunn C. J., Goa K. L. Tranexamic acid. Drugs. 1999;57(6):1005–1032.Dunn C. J., Goa K. L. Tranexamic acid. Drugs. 1999;57(6):1005–1032.Ng W. Ch. K., Jerath A., Wasowicz M. Tranexamic acid: a clinical review. Anestezjologia Intensywna Terapia. 2015;47(4):339–350. DOI: 10.5603/AIT.a2015.0011.Ng W. Ch. K., Jerath A., Wasowicz M. Tranexamic acid: a clinical review. Anestezjologia Intensywna Terapia. 2015;47(4):339–350. DOI: 10.5603/AIT.a2015.0011.Klebanoff J. S., Marfori Сh. Q., Ingraham C. F., Wu C. Z., Moawad G. M. Applications of Tranexamic acid in benign gynecology. Current Opinion in Obstetrics & Gynecology. 2019;31(4):235–239. DOI: 10.1097/GCO.0000000000000547.Klebanoff J. S., Marfori Сh. Q., Ingraham C. F., Wu C. Z., Moawad G. M. Applications of Tranexamic acid in benign gynecology. Current Opinion in Obstetrics & Gynecology. 2019;31(4):235–239. DOI: 10.1097/GCO.0000000000000547.Ogawa H., Asakura H. Consideration of tranexamic acid administration to COVID-19 patients. Physiological reviews. 2020; 100(4):1595–1596. DOI: 10.1152/physrev.00023.2020.Ogawa H., Asakura H. Consideration of tranexamic acid administration to COVID-19 patients. Physiological reviews. 2020; 100(4):1595–1596. DOI: 10.1152/physrev.00023.2020.Распоряжение Правительства РФ от 12 октября 2019 г. № 2406-р. «Об утверждении перечня жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов на 2020 год, а также перечней лекарственных препаратов для медицинского применения и минимального ассортимента лекарственных препаратов, необходимых для оказания медицинской помощи». Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/563469457. Ссылка активна на 12.05.2021.Rasporyazhenie Pravitel'stva RF ot 12 oktyabrya 2019 g. № 2406-r. "Ob utverzhdenii perechnya zhiznenno neobkhodimykh i vazhneyshikh lekarstvennykh preparatov na 2020 god, a takzhe perechney lekarstvennykh preparatov dlya meditsinskogo primeneniya i minimal'nogo assortimenta lekarstvennykh preparatov, neobkhodimykh dlya okazaniya meditsinskoy pomoshchi" [Order of the Government of the Russian Federation of 12 October 2019 No. 2406-r. "On approval of the list of vital and essential drugs for 2020, as well as lists of drugs for medical use and the minimum range of drugs required for the provision of medical care"]. Available at: https://docs.cntd.ru/document/563469457. Accessed: 12.05.2021. (In Russ.)Tranexamic acid. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/ DB00302. Accessed: 25.02.2021.Tranexamic acid. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00302. Accessed: 25.02.2021.Карцова Л. А., Бессонова Е. А., Сомова В. Д. Применение ионных жидкостей на основе имидазола в условиях обращенно-фазовой и гидрофильной хроматографии при разделении полярных лекарственных препаратов. В сб.: III Всероссийская конференция «Аналитическая хроматография и капиллярный электрофорез». 21–27 мая 2017. Краснодар: Мегастронг; 2017. С. 15. Доступно по: http://www.spsl.nsc.ru/FullText/konfe/%D0%90%D0%BD%D0%B0%D0%BB%D0%B8%D1%82%D0%B8%D1%87%D0%B5%D1%81%D0%BA%D0%B0%D1%8F%20%D1%85%D1%80%D0%BE%D0%BC%D0%B0%D1%82%D0%BE%D0%B3%D1%80%D0%B0%D1%84%D0%B8%D1%8F2017.pdf. Ссылка активна на 12.05.2021.Kartsova L. A., Bessonova E. A., Somova V. D. Primenenie ionnykh zhidkostey na osnove imidazola v usloviyakh obrashchenno-fazovoy i gidrofil'noy khromatografii pri razdelenii polyarnykh lekarstvennykh preparatov. V sb.: III Vserossiyskaya konferentsiya "Analiticheskaya khromatografiya i kapillyarnyy elektroforez" [The use of ionic liquids based on imidazole under conditions of reversed-phase and hydrophilic chromatography in the separation of polar drugs. In: III All-Russian conference "Analytical chromatography and capillary electrophoresis"]. May 21–27 2017. Krasnodar: Megastrong; 2017. P. 15. Available at: http://www.spsl.nsc.ru/FullText/konfe/%D0%90%D0%BD%D0%B0%D0%BB%D0%B8%D1%82%D0%B8%D1%87%D0%B5%D1%81%D0%BA%D0%B0%D1%8F%20%D1%85%D1%80%D0%BE%D0%BC%D0%B0%D1%82%D0%BE%D0%B3%D1%80%D0%B0%D1%84%D0%B8%D1%8F2017.pdf. Accessed: 12.05.2021. (In Russ.)Chang Q., Yin O. Q. P., Chow M. S. S. Liquid chromatography– tandem mass spectrometry method for the determination of tranexamic acid in human plasma. Journal of Chromatography B. 2004;805(2):275–280. DOI: 10.1016/j.jchromb.2004.03.013.Chang Q., Yin O. Q. P., Chow M. S. S. Liquid chromatography– tandem mass spectrometry method for the determination of tranexamic acid in human plasma. Journal of Chromatography B. 2004;805(2):275–280. DOI: 10.1016/j.jchromb.2004.03.013.Delyle S. G., Abe E., Batisse А., Tremey В., Fischler М., Devillier Р., Alvarez J. C. A validated assay for the quantitative analysis of tranexamic acid in human serum by liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry. Clinica Chimica Acta. 2010;411(5–6):438–443. DOI: 10.1016/j.cca.2010.01.005.Delyle S. G., Abe E., Batisse А., Tremey В., Fischler М., Devillier Р., Alvarez J. C. A validated assay for the quantitative analysis of tranexamic acid in human serum by liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry. Clinica Chimica Acta. 2010;411(5–6):438–443. DOI: 10.1016/j.cca.2010.01.005.Fabresse N., Fall F., Etting I., Devillier Р., Alvarez J.-C., Grassin-Delyle S. LC–MS/MS determination of tranexamic acid in human plas ma after phospholipid clean-up. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2017;141;149–156. DOI: 10.1016/j.jpba.2017.04.024.Fabresse N., Fall F., Etting I., Devillier Р., Alvarez J.-C., Grassin-Delyle S. LC–MS/MS determination of tranexamic acid in human plasma after phospholipid clean-up. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2017;141;149–156. DOI: 10.1016/j.jpba.2017.04.024.Миронов А. Н. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К; 2013. 280 с.Mironov A. N. Rukovodstvo po ekspertize lekarstvennykh sredstv [Guidelines for the examination of medicines]. V. II. Moscow: Grif i K; 2013. 280 p. (In Russ.)Bioanalytical Method Validation Guidance for Industry. Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry. Accessed: 25.02.2021.Bioanalytical Method Validation Guidance for Industry. Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry. Accessed: 25.02.2021.Bioanalytical method validation. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-methodvalidation. Accessed: 25.02.2021.Bioanalytical method validation. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-methodvalidation. Accessed: 25.02.2021.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.