Разработка синтеза генистеина для использования в качестве стандартного образца

Введение. Применение стандартных образцов (СО) обеспечивает метрологическую сопоставимость и сходимость результатов, выполненных в разных лабораториях, разными аналитиками, в разное время. Генистеин является перспективным веществом, обладающим широким спектром фармакологического действия и широко используемым в БАВ. Разработка нормативной документации на СО генистеина позволит обеспечить качество лекарственных средств и БАВ.

Цель. Совершенствования путей синтеза и определение спектральных характеристик генистеина для аттестации СО.

Материалы и методы. Использовали синтетический генистеин, (к. х. н. В. Ю. Ковтуном НПЦ «Фармзащита») (образец № 1) и образец № 2, синтезированный и изучаемый на кафедрах фармацевтической химии и химической технологии лекарственных веществ ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России (ХТЛВ СПХФУ). Инфракрасные спектры образцов генистеина записывали на Фурье-спектрометре инфракрасном ФСМ 1201 (ООО «Инфраспек», Россия) в диске с калия бромидом в области частот от 4000 до 500 см-1. Спектры ЯМР 1Н и 13С записаны на ЯМРспектрометре BrukerAvance III (400 и 100 МГц) (Bruker, Германия) в растворителе ДМСО-d6. Раман-спектры были записаны на аналитической системе комбинационного рассеяния света ОРТЕС-785TRS-2700, при мощности лазерного излучения равной 100 мВт (АО «ОПТЭК», Россия). Продолжительность воздействия лазерного излучения составляло: 5, 10, 20 и 60 сек. Обработка результатов осуществлялась с помощью ПО «BWSpec 4.10_4», США. ГХ-МС проводили на газовом хроматографе Agilent Technologies 7890А с автоинжектором 7693 и массселективным детектором 5975С фирмы «Hewlett Packard».

Результаты и обсуждение. Проведен синтез по методике разработчика с совершенствованием на стадии реакции «снятия алкильной защиты». Спектры промежуточного продукта синтеза генистеина (биочанина А) соответствует литературным данным. Образцы генистеина исследовались методами: ЯМР 13С и 1Н, было определено, структура исследуемого вещества подтверждена; Рамановская и ИКспектроскопии показали, что спектры образцов не отличаются между собой, дополнительные сигналы в них отсутствуют.

Заключение. Получены спектральные характеристики образцов генистеина, методами ЯМР, ИК и рамановской спектроскопии, которые будут использованы в нормативной документации на СО генистеина, и позволять проводить контроль качества лекарственных средств на его основе и выявлять недоброкачественные БАД.

1. Wise S. A. What is novel about certified reference materials? Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2018;410:2045–2049. DOI: 10.1007/s00216-018-0916-y.

2. Абрамова Е. Г., Лобовикова О. А., Шульгина И. В., Комиссаров А. В., Савицкая Л. В., Генералов С. В., Галкина М. В., Гаврилова Ю. К., Кочкин А. В., Никифоров А. К. Разработка стандартного образца предприятия (СОП) специфической активности иммуноглобулина антирабического из сыворотки крови лошади. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017;4(21):160–164.

3. Шведова Е. В., Устинникова О. Б., Рунова О. Б., Волкова Р. А., Бондарев В. П., Смолов М. А., Шукуров Р. Р., Вишневский А. Ю. Разработка порядка аттестации стандартного образца рекомбинантного активированного фактора свертывания крови VII для подтверждения подлинности методом пептидного картирования, включающего масс-спектрометрическое исследование первичной структуры. Гематология и трансфузиология. 2018;63(4):334–342. DOI: 10.25837/HAT.2019.68.74.002.

4. Меркулов В. А., Саканян Е. И., Климов В. И., Шемерянкина Т. Б., Яшкир В. А., Бармин А. В. Современные подходы к разработке стандартных образцов для оценки качества фармацевтических субстанций. Химико-фармацевтический журнал. 2015;49(11):54–56. DOI: 10.30906/0023-1134-2015-49-11-54-56.

5. Громова А. В. Проблемы перевода фармацевтической терминологии. Понимание и рефлексия в коммуникации, культуре и образовании. Сборник статей Всероссийской (с международным участием) научно-практической конференции, посвящённой памяти заслуженного деятеля науки, профессора, доктора филологических наук Георгия Исаевича Богина; 2018 12–23 октября; Тверь, Россия. Тверь: ТвГУ; 2019. С. 100–105.

6. ISO GUIDE 35:2017 Reference materials – Guidance for characterization and assessment of homogeneity and stability – 4th ed. – 01.08.2017. Available at: https://www.iso.org/ru/standard/60281.html. Available at: 02.09.2021.

7. Леонтьев Д. А., Подпружников Ю. В., Воловик Н. В. Роль стандартных образцов в обеспечении качества лекарственных средств: регуляторные и метрологические аспекты. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2016;3(16):180–187.

8. Щепочкина О. Ю., Гегечкори В. И., Прокофьева В. И., Чепило Д. А., Левко А. А., Чадова Н. Н., Шестаков В. Н. Современные подходы к разработке стандартных образцов лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2020;54(7):49–54. DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-7-49-54.

9. Кузьмина Н. Е., Моисеев С. В., Крылов В. И., Яшкир В. А., Меркулов В. А. Разработка методики подтверждения подлинности фармацевтической субстанции «бусерелина ацетат» методом ЯМР спектроскопии без использования фармакопейного стандартного образца. Антибиотики и химиотерапия. 2017;62(9–10):40–46.

10. Зверев Я. Ф. Противоопухолевая активность флавоноидов. Бюллетень сибирской медицины. 2019;18(2):181–194. DOI: 10.20538/1682-0363-2019-2-181-194.

11. Зверев Я. Ф. Антитромбоцитарная активность флавоноидов. Вопросы питания. 2017;86(6):6–20.

12. Thangavel P., Puga-Olguín A., Rodríguez-Landa J. F., Zepeda R. C. Genistein as potential therapeutic candidate for menopausal symptoms and other related diseases. Molecules. 2019;24(21):3892. DOI: 10.3390/molecules24213892.

13. Jaiswal N., Akhtar J., Singh S. P., Badruddeen, Ahsan F. An overview on genistein and its various formulations. Drug Research. 2019;69(06):305–313. DOI: 10.1055/a-0797-3657.

14. Петибская В. С., Лукомец В. М., ред. СОЯ: Химический состав и использование. Майкоп: ОАО Полиграф-ЮГ; 2012. 432 с.

15. Стрелова О. Ю., Волкова К. В., Гребенюк А. Н., Теслов Л. С. Оценка показателей качества перспективной фармацевтической субстанции на основе синтетического генистеина. Бутлеровские сообщения. 2016;48(12):94–101.

16. Брайан Б. А., Оллред М. К. Способы получения экстракта, обогащенного изофлавоновыми агликонами, из растительного материала (варианты), способ извлечения материала с высоким содержанием генистеина или дайдзеина из обогащенного изофлавоновыми агликонами материала. Патент РФ на изобретение № RU 2152434 С1. 10.07.2000. Доступно по: https://patenton.ru/patent/RU2152434C1. Ссылка активна на 02.11.2021.

17. Чикунов И. Е. Отчет о научно-исследовательской работе по теме Генистеин. Химки: ФМБА НПЦ «ФАРМЗАЩИТА»; 2012. 22 с.

18. Игнатьева Е. В., Ярцева И. В., Шпрах З. С., Будько А. П., Эктова Л. В., Козин Д. А., Решетняк В. Ю., Нестерова О. В., Панкратова Е. А. Стандартизация фармацевтической субстанции препарата ЛХС-1208. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2021;10(3):88–94. DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94.

19. Mrug G. P., Bondarenko S. P., Khilya V. P., Frasinyuk M. S. Synthesis and aminomethylation of 7-hydroxy-5-methoxyisoflavones. Chemistry of Natural Compounds. 2013;49(2):235–241. DOI: 10.1007/s10600-013-0570-8.

20. Jeffrey D. St. D., Gordon J. S., Carroll V. M., Priefer R. Novel synthesis of the isoflavone genistein. Synthesis. 2010;10:1590–1592. DOI: 10.1055/s-0029-1219757.