Лабораторная диагностика немедикаментозного применения тропикамида

Введение. Описаны многочисленные случаи отравления как при совместном применении с тропикамидом другими наркотическими средствами, так и самостоятельно. Отмечается быстрый рост толерантности к тропикамиду, в основном за счет увеличения кратности введения препарата. С 2015 году препараты, содержащие тропикамид были внесены в перечень лекарственных средств, подлежащих предметно-количественному учету, однако на фармацевтическом рынке России появились комбинированные препараты, представляющие собой сочетание м-холиноблокатора тропикамида с альфа-адреномиметик фенилэфрином, которые не подпадают под действие этого приказа и, поэтому отпускаются из аптеки без рецепта. С этой целью выявления сроков давности и периодичности употребления перспективным является разработка подходом к обнаружению тропикамида в волосах освидетельствуемых лиц.

Цель. Целью исследования явилась разработка методики изолирования и определения тропикамида в волосах.

Материалы и методы. Исследование проводилось с использованием субстанции тропикамида. Использовали ферменты: папаин, химотрипсин, химопсин. Моделирование накопления тропикамила в волосах (шерсти) проводили на крысах-самцах белого и коричневого природного окраса. Окрашивание шерсти проводили профессиональным красителем Estel Professional De Luxe. Использовали оборудование: аналитические весы Sartorius СР224S; pH-метр FiveEasy; вибрационная шаровая мельница Retsch MM-200. Экстракты из образцов шерсти исследовали методом газовый хроматограф с масс-селективным детектором Agilent Technologies (США) 7890 A/5977 MSD, управление осуществлялось с помощью программы MassHunter GC/MS.

Результаты и обсуждение. В результате гидролиза различными протеазами (химопсин, химотрипсин, папаин) тропикамид был выделен из образцов шерсти в сопоставимых количествах. Проведенное исследование показало, что из пигментированной шерсти выделяется несколько большее количество целевого аналита, даже несмотря на то, что меланин придают волосу химическую устойчивость. Количество тропикамида, извлеченного из шерсти после проведения окрашивания, возросло в среднем на 30 %, на хроматограммах не наблюдались пики продуктов химической деградации тропикамида. Воздействие искусственного красителя на волосы не приводит к разрушению токсиканта, накопленного в волосах и не оказывает негативного влияния на результаты пробоподготовки методикой ферментативного гидролиза. Значение сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости результатов количественного определения тропикамила удовлетворяет критериям приемлемости для биоаналитических методик, что позволяет рекомендовать предлагаемую методику для внедрения в практику.

Заключение. В ходе исследования разработана методика лабораторной диагностики немедикаментозного использования тропикамида, воспроизводимость которой удовлетворяет критериям приемлемости для биоаналитических методик, что позволяет рекомендовать ее для работы в практике лабораторий.

1. Регистр лекарственных средств России. Справочник по лекарственным препаратам и их производителям. Доступно по: http://www.rlsnet.ru. Ссылка активна на 05.09.2021.

2. Банникова Г. А., Мелентьев А. Б., Лаврентьева А. В. Определение тропикамида в крови методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором. Проблемы экспертизы в медицине. 2011;1–2:16–18.

3. Бушуев Е. С., Горбачева Т. В., Бычков В. А. Тропикамид как объект химико-токсикологического анализа. СПб.: СПб ГБУЗ «БСМЭ»; 2013. 32 с.

4. Рейхарт Д. В., Чистяков В. В. Анализ лекарственных средств при фармакокинетических исследованиях. Казанский медицинский журнал. 2010;4:532–536.

5. Рохлина М. Л., Богинская Д. Д., Усманова Н. Н., Мохначев С. О. Злоупотребление производными лекарственных препаратов. Журнал неврологии и психиатрии. 2013;7:55–59.

6. Калёкин Р. А., Салтыкова О. В., Родионова Г. М., Гегечкори В. И., Орлова А. М. Изучение прегабалина и лоразепама при совместном присутствии для целей химико-токсикологического исследования. Судебно-медицинская экспертиза. 2020;63(1):36–41. DOI: 10.17116/sudmed20206301136.

7. Калёкин Р. А., Орлова А. М., Савчук С. А., Барсегян С. С. Изучение фенспирида для целей и задач химико-токсикологического исследования. Судебно-медицинская экспертиза. 2019;62(4):37–41. DOI: 10.17116/sudmed20196204137.

8. Лаврентьева A. B., Банникова Г. А., Мелентьев А. Б. Определение тропикамида в крови методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором. Проблемы экспертизы в медицине. 2011;12:16–18.

9. Слустовская Ю. В., Стрелова О. Ю. Волосы как объект химико-токсикологического анализа. Токсикологический вестник. 2015;5(134):13–19.

10. Панова Е. П., Владимирова О. В., Куриленко М. И., Дряглина Л. П. Судебно-химическое определение тропикамида. Судебно-медицинский журнал. Доступно по: http://journal.forens-lit.ru/node/666. Ссылка активна на 05.09.2021.

11. Мансуров Р. Г., Артемьева И. А., Попкова В. В., Хабиева Н. А. Изолирование, идентификация, количественное определение тропикамида. Судебно-медицинский журнал. Доступно по: http://journal.forens-lit.ru/node/340. Ссылка активна на 05.09.2021.

12. Федосеева Л. М., Даутова Д. Д., Кнауб Н. Н., Воронкова Л. Г., Кодрян В. А. Химико-токсикологическое исследование тропикамида. Судебно-медицинский журнал. Доступно на: http://journal.forens-lit.ru/node/491. Ссылка активна на 05.09.2021.

13. Шорманов В. К., Правдюк М. Ф., Чекед М. В., Баранникова В. В. Распределение тропикамида в организме теплокровных животных при внутрижелудочном введении. Судебно-медицинская экспертиза. 2016;2(59):27–34. DOI: 10.17116/sudmed201659227-34.

14. Moffat A. C., Osselton M. D., Widdop B., Watts J. Clarke’s analysis of drug and poisons. London: The Pharmaceutical press; 2011. 2609 p.

15. Приказ Минздрава России от 18.12.2015 № 933н (ред. от 25.03.2019) «О порядке проведения медицинского освидетельствования на состояние опьянения (алкогольного, наркотического или иного токсического)» (Зарегистрировано в Минюсте России 11.03.2016 № 41390). Доступно по: http://www.consultant.ru/document/cons_doc_LAW_195274. Ссылка активна на 05.09.2021.

16. Приказ Минздравсоцразвития РФ от 27.01.2006 N 40 «Об организации проведения химико-токсикологических исследований при аналитической диагностике наличия в организме человека алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ». Доступно на: http://www.consultant.ru/document/cons_doc_LAW_58773/. Ссылка активна на 05.09.2021.

17. ГОСТ 53434-2009. Принципы лабораторной практики GLP. М: Стандартинформ; 2010:12 с.

18. Приказ Минздрава ЗО РФ от 26.05.2003 г. № 220 «Об утверждении отраслевого стандарта «Правила проведения внутрилабораторного стандарта качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов». Доступно на: http://zakonbase.ru/content/part/371728. Ссылка активна на 05.09.2021.

19. Об утверждении СП 2.2.1.3218-14 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)»: постановление главного государственного санитарного врача РФ от 29.08.2014 № 51. Российская газета (специальный выпуск). 2015. 24 с.

20. Guide for the care and use of laboratory animals. Washington, D.C: The National Academies press; 2010. 218 p.

21. Слустовская Ю. В., Стрелова О. Ю., Крысько М. В., Куклин В. Н. Исследование волос с целью диагностики употребления психоактивных веществ. Вестник Российской военно-медицинской академии. 2019;1:120-126.

22. Крысько М. В., Слустовская Ю. В., Стрелова О. Ю., Куклин В. Н. Обнаружение фенобарбитала и дифенгидрамина в волосах после косметического воздействия. Биомедицинский журнал Medline.ru Материалы научно-практической конференции «Актуальные вопросы токсикологии и фармакологии». 2019;170–174.

23. Слустовская Ю. В., Крысько М. В., Стрелова О. Ю. Разработка методики ферментативного гидролиза для изолирования токсических веществ из образцов волос. Судебно-медицинская экспертиза. 2017;2(60):36–40. DOI: 10.17116/sudmed201760236-40.

24. Крысько М. В., Слустовская Ю. В., Стрелова О. Ю., Куклин В. Н. Разработка и валидация методики ферментативного гидролиза для изолирования токсических веществ из неокрашенных волос. Судебно-медицинская экспертиза. 2019;1:24–29. DOI: 10.17116/sudmed20196201124.

25. Старовойтова М. К., Миначенкова А. С., Крысько М. В., Слустовская Ю. В., Стрелова О. Ю., Куклин В. Н. Сравнительная характеристика методик ферментативного гидролиза для изолирования токсичных веществ из цельной крови и волос. Судебно-медицинская экспертиза. 2020;3(63):23–29. DOI: 10.17116/sudmed20206303123.

26. Уварова Н. E., Ерёменко Н. Н., Раменская Г. В., Горячев Д. В., Смиронов В. В. Современные регуляторные требования FDA к валидации биоаналитических методик в сравнении с требованиями ЕАЭС. Химико-фармацевтический журнал. 2019;8(53):45–52. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-8-45-52.

27. Барсегян С. С., Саломатин Е. М., Плетнева Т. В., Максимова Т. В., Долинкин А. О. Методические рекомендации по валидации аналитических методик, используемых в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе биологического материала. М.: ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России; 2014. 74 с.

28. Комаров Т. Н., Шохин И. Е., Мискив О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Медведев Ю. В., Багаева Н. С. Разработка и валидация методики определения атазанавира и ритонавира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(1):99–108. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-1-99-108.

29. Комаров Т. Н., Шохин И. Е., Мискив О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Медведев Ю. В., Багаева Н. С. Разработка и валидация методики количественного определения валганцикловира и его метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФ. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(2):133–139. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-2-133-139.

30. Комаров Т. Н., Шохин И. Е., Токарева М. А., Арчакова О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Багаева Н. С., Давыданова В. В. Определение валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2021;10(1):120-128. DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-1-120-128.

31. Комаров Т. Н. Шохин И. Е., Токарева М. А., Арчакова О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Багаева Н. С., Давыданова В. В., Садчикова Н. П. Разработка и валидация методики определения помалидомида в плазме крови человека методом ВЭЖХМС/МС. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;4(9):146–154. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-4-146-154.

32. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Доступно по: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php. Ссылка активна на 28.10.2021.

33. Бриттон Г. Биохимия природных полимеров. М.: Мир; 1986. 422 с.

34. Pötsch L., Skopp G. Stability of opiates in hair fibers after exposure to cosmetic treatment. Forensic Science International. 1996;81: 95–102.

35. Larsson B., Tjalve H. Studies on the mechanism of drug binding to melanin. Biochemical Pharmacology. 1978;28:1181–1187.