Разработка и изучение ушных капель с бактериофагами для лечения инфекционных отитов, осложненных P. aeruginosa

Введение. Инфекционные отиты наружного и среднего уха способны вызывать потерю слуха, что существенно снижает качество жизни пациентов. Основными возбудителями острого бактериального отита являются Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus. Статья посвящена разработке и изучению новой лекарственной формы для лечения инфекционных отитов, содержащей бактериофаги, лизирующие бактериальные штаммы Pseudomonas aeruginosa. Препараты бактериофагов могут быть альтернативой препаратам антибиотиков местного действия, использующихся в оториноларингологической практике по всему миру. В качестве перспективной лекарственной формы для инстилляции в ушной проход рассматривались ушные капли.

Цель. Целью работы является разработка лекарственной формы бактериофагов Pseudomonas aeruginosa для местного лечения инфекционных отитов.

Материалы и методы. Действующими веществами разрабатываемого препарата являются бактериофаги, лизирующие бактериальные штаммы Pseudomonas aeruginosa: РА5 и РА10, полученные методом выращивания на плотной питательной среде в матрасах с последующей стерилизующей фильтрацией через мембранный фильтр (0,22 мкм) и освобождением от эндотоксина на хроматографической колонке. Для получения экспериментальных составов использовались эксципиенты, не вызывающие падения титра бактериофагов – растворитель вода очищенная, модификаторы вязкости глицерин (ООО ТД «ХИММЕД», Россия) и смесь макрогола 6 и глицерил каприлокапрата марки Softigen® 767 (Cremer, Германия), антиоксидант этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), консерванты нипагин и нипазол. Полученные образцы стандартизовали по фармакопейным показателям, рекомендуемым для лекарственной формы капли: плотность, рН, вязкость. Для всех экспериментальных составов изучали стабильность титра бактериофагов по методу Грациа в течение 12 месяцев, также исследовали местораздражающее и системное действие на пяти кроликах самцах породы шиншилла.

Результаты и обсуждение. В результате проведенных исследований получено четыре экспериментальных состава ушных капель с коктейлем бактериофагов РА5 и РА10. Оптимальным технологическими характеристиками обладал состав, содержащий глицерин в качестве модификатора вязкости в концентрации 10,0 %. Для этого образца установлены стабильность титра бактериофагов РА5 и РА10, отсутствие местнораздражающего и системного действия.

Заключение. По итогам проведенных исследований лекарственная форма может быть рекомендована к проведению доклинических исследований, а после проведения дополнительных испытаний на других бактериофагах – для применения в персонализированной фаготерапии.

1. Nanno F. A., Peek W. Ototopical drops containing a novel antibacterial synthetic peptide: Safety and efficacy in adults with chronic suppurative otitis media. PLoS One. 2020;15(4):e0231573. DOI: 10.1371/journal.pone.0231573.

2. Schilder A. G. M., Chonmaitree T., Cripps A. W., Rosenfeld R. M., Casselbrant M. L., Haggard M. P., Venekamp R. P. Otitis media. Nat Rev Dis Primers. 2016;2(1):16063. DOI: 10.1038/nrdp.2016.63.

3. Brennan‐Jones C. G., Chong L. Y., Head K., Tu N., Burton M. J., Schilder A. G. M., Bhutta M. F. Topical antibiotics with steroids for chronic suppurative otitis media. Cochrane Database Syst Rev. 2018;2018(6):CD013054. DOI: 10.1002/14651858.CD013054.

4. Чеботарь И. В., Бочарова Ю. А., Маянский Н. А. Механизмы резистентности Pseudomonas aeruginosa к Антибиотикам и их регуляция. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2017;19(4):308–319.

5. Ranakusuma R. W., McCullough A. R., Safitri E. D., Pitoyo Y., Widyaningsih W., Del Mar C. B., Beller E. M. Oral prednisolone for acute otitis media in children: a pilot, pragmatic, randomised, open-label, controlled study (OPAL study) Pilot Feasibility Stud. 2020;6:121. DOI: 10.1186/s40814-020-00671-5.

6. Бахрушина Е. О., Анурова М. Н., Алешкин А. В., Демина Н. Б., Краснюк И. И., Пятигорская Н. В., Береговых В. В. Некоторые аспекты применения и создания лекарственных препаратов бактериофагов. Вестник РАМН. 2021;76(4):351–360. DOI: 10.15690/vramn1380.

7. Алешкин А. В., Воложанцев Н. В., Веревкин В. В., Красильникова В. М., Мякинина В. П., Попова А. В., Светоч Э. А. Композиция антибактериальная для профилактики или лечения госпитальных инфекций (варианты), штаммы бактериофагов, используемые для получения такой композиции. Патент РФ RU 2628312. 2015. Доступно по: https://rusneb.ru/catalog/000224_000128_0002628312_20170815_C2_RU/ Ссылка активна на 22.01.2022.

8. Анурова М. Н., Бахрушина Е. О., Демина Н. Б., Пантелеева Е. С. Обзор современных стабилизаторов микробиологической устойчивости. Химико-фармацевтический журнал. 2019;53(6):54–61. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-6-54-61.

9. Панюшин С. К., Кузнецова Г. В., Мантиков М. А. Антибактериальное средство. Патент РФ RU 2480239. 2013. Доступно по: https://rusneb.ru/catalog/000224_000128_0002480239_20130427_C2_RU/ Ссылка активна на 22.01.2022.