Разработка и валидация методики количественного определения остаточных органических растворителей в препаратах аллергенов методом ГЖХ

Введение. В последние десятилетия мировая фармакопейная практика уделяет особое внимание чистоте лекарственных средств. Определен перечень возможных примесей, присутствие которых в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах допустим в установленных пределах, гарантирующих отсутствие токсического действия на организм человека при их приеме. Существуют примеси родственные, технологические и др. К числу технологических примесей относят, в том числе остаточные количества органических растворителей, используемых в технологии получения как фармацевтических субстанций, так и лекарственных препаратов. В рамках гармонизации требований национальной фармакопеи, фармакопеи ЕАЭС и ведущих зарубежных фармакопей в отечественную фармакопейную практику введен такой обязательный показатель качества, как содержание остаточных органических растворителей, в случае использования последних в технологическом процессе. В действующей ОФС.1.1.0008.15 «Остаточные органические растворители» указаны общие принципы определения этого показателя качества и нормативные требования к содержанию этих растворителей в зависимости от класса токсичности. При производстве препаратов аллергенов в ряде случаев, в частности при работе с пыльцевыми аллергенами, в технологическом процессе используются органические растворители третьего класса токсичности: диэтиловый эфир и ацетон, предельное содержание которых составляет до 0,5 % (5000 ppm). При этом в производственном процессе препаратов аллергенов для обезжиривания и очистки могут использоваться как диэтиловый эфир или ацетон, так и оба растворителя одновременно, поэтому для их определения целесообразна разработка и использование унифицированной методики, ориентированной на применение при оценке качества конкретного лекарственного препарата аллергена.

Цель. Целью исследования являлась разработка и валидация методики количественного определения остаточных органических растворителей в препаратах аллергенов.

Материалы и методы. Исследования проведены методом газо-жидкостной хроматографии с пламенно-ионизационным детектором с инжектированием исследуемых образцов с помощью автосэмплера на капиллярной кварцевой колонке Zebron ZB-624 (G43, 6 % цианопропилфенил / 94 % диметилполисилоксан).

Результаты и обсуждение. Подобраны условия хроматографического разделения ацетона и диэтилового эфира на капиллярной кварцевой колонке. Определены параметры пригодности хроматографической системы. Проведена валидация разработанной методики по следующим характеристикам: специфичность, линейность, предел количественного определения, правильность и прецизионность на уровне повторяемости и внутрилабораторной прецизионности. Определено содержание ацетона и диэтилового эфира в 26 препаратах аллергенов. Результаты количественного определения диэтилового эфира и ацетона в препаратах аллергенов, в технологическом процессе которых используются ООР, находятся в дипазоне 0,0053–0,0524 % для диэтилового эфира и 0,0029–0,0994 % для ацетона. Таким образом, содержание диэтилового эфира и ацетона во всех исследованных препаратах аллергенов было ниже установленной нормы (менее 0,5 %).

Заключение. Разработана аналитическая методика определения количественного содержания диэтилового эфира и ацетона в препаратах аллергенов с помощью метода ГЖХ, методика валидирована по характеристикам, отвечающим требованиям ОФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик». Проведенный в соответствии с разработанной методикой анализ препаратов аллергенов свидетельствует о том, что во всех препаратах содержание диэтилового эфира и ацетона составляет не более 0,5 %, что отвечает требованиям ОФС.1.1.0008.15 «Остаточные органические растворители». Следовательно, использование данной методики позволяет существенно повысить качество лекарственных препаратов аллергенов, в технологии получения которых используются органические растворители, так как контроль содержания их остаточных количеств гарантирует безопасность применения этих препаратов и их соответствие требованиям международных стандартов.

1. Олефир Ю. В., Саканян Е. И., Шишова Л. И., Сенченко С. П. Фармакопейные требования к качеству лекарственных препаратов. Химико-фармацевтический журнал. 2018;(52)11:48–54. DOI: 10.30906/0023-1134-2018-52-11-48-54.

2. Таубэ А. А., Гилек М. Т., Саканян Е. И. Методические подходы к повышению качества лекарственного растительного сырья морфологической группы «пыльца». Химико-фармацевтический журнал. 2021;(55)12:56–60. DOI: 10.30906/0023-1134-2021-55-12-56-60.

3. Невская Л. В., Лавренчик Е. И., Жданова М. Ю., Фадейкина О. В., Капитанова В. К. Международный опыт стандартизации препаратов аллергенов. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2017;17(4):222–229.

4. Олефир Ю. В., Саканян Е. И., Шемерянкина Т. Б., Сенченко С. П., Зайцев С. А., Бармин А. В. Стандартизация фармацевтических субстанций по разделу «чистота». Химико-фармацевтический журнал. 2018;(52)8:56–60. DOI: 10.30906/0023-1134-2018-52-8-56-60.

5. Терёшкина О. И., Гуськова Т. А., Раменская Г. В., Самылина И. А. Фармакопейные подходы к нормированию остаточных органических растворителей в лекарственных средствах. Фармация. 2017;(66)1:9–13.

6. Дуденкова М. Е., Грушевская Л. Н., Сергеева М. С. Разработка и валидация методики идентификации и количественного определения остаточных органических растворителей в субстанции дипептидного миметика фактора роста нервов ГК-2. Химико-фармацевтический журнал. 2020;(54)2:49–53. DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-2-49-53.

7. Петухов А. Е., Петрыкина Е. А., Терёшкина О. И., Раменская Г. В., Антипова О. М., Турашев А. Д., Завьялова Е. Г., Головин А. В., Павлова Г. В., Копылов А. М. Стандартизация субстанции тромбаптаниба по показателю «остаточные органические растворители». Химико-фармацевтический журнал. 2018;(52)4:53–58. DOI: 10.30906/0023-1134-2018-52-4-53-58.

8. Ластовка А. В., Яковлева Е. Ю., Коллегов В. Ф., Фадеева В. П., Салахутдинов Н. Ф. Определение остаточных органических растворителей методом газовой хроматографии в субстанции (2r,4r,4аr,7r,8ar)-4,7-диметил-2-(тиофен-2-ил)октагидро-2h-хромен-4-ол, обладающей анальгетической активностью. Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 2018;84(9):13–20.

9. Компанцева Е. В., Луценко Д. Н., Ларский М. В. Определение остаточных органических растворителей в новом кардиопротекторном соединении методом газовой хроматографии. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2021;(24)10:52–58.

10. Бутина Е. В., Зайцев С. А., Басевич А. В. Разработка и валидация методики количественного определения остаточных органических растворителей в инновационной активной фармацевтической субстанции методом ГЖХ ПИД. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2016;(4):124–128.

11. Гольберт К. А., Вигдергауз М. С. Введение в газовую хроматографию. М.: Химия; 1990. 344 с.