Разработка и валидация определения элтромбопага в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС

Введение. «Элтромбопаг» – агонист рецепторов тромбопоэтина (TPO-RAs), одобренный для лечения иммунной тромбоцитопенической пурпуры (ИТП). В соответствии с изученной литературой, было обнаружено, что существует очень мало аналитических методов для определения элтромбопага в биологических образцах. Для изучения фармакокинетики новых составов элтромбопага необходим чувствительный и специфичный метод, позволяющий точно определять концентрации элтромбопага в плазме крови человека. Обычно методы ВЭЖХ должны обеспечивать время, точность и чувствительность. Поэтому необходимо разработать быстрые или сверхбыстрые методы, такие как LC-MS/MS, без какой-либо потери эффективности и чувствительности разделения.

Цель. Наша цель заключалась в разработке и валидации метода, нацеленное на количественное определение элтромбопага в человеческой плазме крови при том, чтобы использовались методы высокоэффективной жидкостной хроматографии с одноквадрупольным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС) для выполнения аналитической части фармакокинетических исследований.

Материалы и методы. Количество элтромбопага в плазме человека определяли с помощью ВЭЖХ-МС. Способ осаждения белков был проведен в качестве пробоподготовки.

Результаты и обсуждение. Разработанную методику валидировали по линейности, переносу пробы, стабильности, селективности, точности, эффекту матрицы, прецизионности, пределу количественного определения препарата.

Заключение. Метод определения элтромбопага в плазме крови человека был разработан и валидирован методом ВЭЖХ-МС. При исследовании аналитического диапазона препарат элтромбопаг в плазме составил 10–6750 нг/мл. Данный аналитический диапазон разработанной методики может быть применен для проведения аналитической части фармакокинетических исследований препаратов, содержащих в составе элтромбопаг.

1. Ahmed M. A., Yassin M. A. Low-Dose Eltrombopag in a Patient with Chronic Idiopathic Thrombocytopenic Purpura Post Sleeve Gastrectomy. Case Rep. Oncol. 2020;(13):655–658. DOI: 10.1159/000507755.

2. AL-Dhuraibi A. M., Pokrovskiy M. V. Evaluation of Eltrombopag Efficacy in Patients with Hepatitis C-induced Thrombocytopenia: Systematic Reviews of Meta-Analysis. NVEO-NATURAL VOLATILES Essent. OILS Journal NVEO. 2021;5453–5471.

3. Marano M., Serafinelli J., Cairoli S., Martinelli D., Pisani M., Palumbo G., Cefalo M. G., Cecchetti C., Di Nardo M., Falvella F. S., Goffredo B. M. Eltrombopag-Induced Acute Liver Failure in a Pediatric Patient: A Pharmacokinetic and Pharmacogenetic Analysis. Therapeutic Drug Monitoring. 2018;40(4):386–388. DOI: 10.1097/FTD.0000000000000522.

4. Yanagimachi N., Obara N., Sakata-Yanagimoto M., Chiba S., Doki K., Homma M. A simple HPLC assay for determining eltrombopag concentration in human serum. Biomedical Chromatography, 2021;35(5):e5049. DOI: 10.1002/bmc.5049.

5. Bauman J. W., Vincent C. T., Peng B., Wire M. B., Williams D. D., Park J. W. Effect of hepatic or renal impairment on eltrombopag pharmacokinetics. The Journal of Clinical Pharmacology. 2011;51(5):739–750. DOI: 10.1177/0091270010372106.

6. Cheng T. H. T., Tsui T. K. C., Kwok J. S. S., Lit L. C. W., Wong E. Y. L., Kam R. K. T., Grote-Koska D., Staaden A., Okada H., Fuke N., Wong R. S. M., Li C.-K., Chan M. H. M. Comprehensive characterization and resolution of discrepant spectrophotometric bilirubin results in patients on eltrombopag therapy. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM). 2020;58(10):1713–1723. DOI: 10.1515/cclm-2019-0684.

7. Jayagopal B., Murugesh S. QBD-driven HPLC method of eltrombopag olamine: Degradation pathway proposal, structure elucidation, and in silico toxicity prediction. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2021;203:114231. DOI: 10.1016/j.jpba.2021.114231.

8. Maddela R., Gajula R., Pilli N. R., Siddiraju S., Maddela S., Makula A., Liquid chromatography-tandem mass spectrometric assay for eltrombopag in 50 μL of human plasma: A pharmacokinetic study. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2014;98:68–73. DOI: 10.1016/j.jpba.2014.04.028.

9. Mohan T. S. S. J., Mukkanti K., Jogia H. A. Stability indicating UHPLC method, development and validation for estimation of eltrombopag and related impurities in tablet dosage form. Oriental journal ofchemistry. 2018;34(2):1098–10104. DOI: 10.13005/ojc/340262.

10. Gosai S., Jadav K., Stability indicating analytical method development and validation of eltrombopag olamine in tablet dosage form by RP-UPLC. Journal of the Turkish Chemical Society Section A: Chemistry. 2020;7(3):845–850. DOI: 10.18596/jotcsa.724484.

11. Mayank S., Geeta V., Chaudhari P. S., Suleman S. K. Department. European of Biomedical AND Pharmaceutical sciences. development and validation of stability indicating rp-hplc method for estimation of eltrombopag olamine in. Eur J Biomed Eur J Biomed Pharm Sci. 2018;5(11):454–460.

12. Wire M. B., Bruce J., Gauvin J., Pendry C. J., McGuire S., Qian Y., Brainsky A. A randomized, open-label, 5-period, balanced crossover study to evaluate the relative bioavailability of eltrombopag powder for oral suspension (PfOS) and tablet formulations and the effect of a high-calcium meal on eltrombopag pharmacokinetics when admin. Clinical therapeutics. 2012;34(3):699–709. DOI: 10.1016/j.clinthera.2012.01.011.

13. Mironov A. N. Guidelines for the examination of medicines. T. II. Moscow: Grif i K; 2013. 280 p. (In Russ.)