Разработка и валидация методики определения помалидомида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС

Введение. B-клеточная неоплазия плазмы клеток является причиной плазмоклеточной миеломы – второго по распространенности злокачественного заболевания системы крови. Помалидомид применяют в качестве терапии плазмоклеточной миеломы в случаях тяжелого течения заболевания и отсутствия эффективности прочих терапий. Помалидомид является структурным аналогом талидомида, он одобрен в России и США в качестве иммуномодулирующего препарата. В настоящее время данные по определению помалидомида в биологических жидкостях методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для исследований фармакокинетики практически отсутствуют, а имеющиеся отличаются по условиям детектирования. В данном исследовании приведена разработка и валидация методики определения помалидомида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки был выбран способ осаждения метанолом.

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения помалидомида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС для проведения фармакокинетических исследований.

Материалы и методы. Определение помалидомида в плазме крови проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки был использован способ осаждения белков метанолом.

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая (линейность), точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, предел обнаружения, перенос пробы, стабильность.

Заключение. Разработана и валидирована методика количественного определения помалидомида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. Подтвержденный аналитический диапазон методики составил 1,00–500,00 нг/мл в плазме крови. Полученный аналитический диапазон позволяет применять разработанную методику для проведения аналитической части исследований фармакокинетики препаратов помалидомида.

1. Neşetoglu N., Kaplan C., Aslan S. S., Ünal D. Ö. A Simple and Rapid LC-MS/MS Method for Therapeutic Drug Monitoring of Lenalidomide. Pakistan Journal of Analytical & Environmental Chemistry. 2020;21(1):19–26. DOI: 10.21743/pjaec/2020.06.03.

2. Aydoğmuş Z., Yılmaz E. M., Yildiz G. A simple and rapid spectrofluorometric determination of pomalidomide in spiked plasma and urine. Application to degradation studies. Luminescence. 2019;35(4):1–12. DOI: 10.1002/bio.3748.

3. Hoffmann M., Kasserra C., Reyes J., Schafer P., Kosek I., Capone L., Parton A., Kim-Kang H., Surapaneni S., Kumar G. Absorption, metabolism and excretion of [14C]pomalidomide in humans following oral administration. Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 2013;71(2):489–501. DOI: 10.1007/s00280-012-2040-6.

4. Shahbazi S., Peer C. J., Polizzotto M. N., Uldrick T. S., Roth J., Wyvill K. M., Aleman K., Zeldis J. B., Yarchoan R., Figg W. D. A sensitive and robust HPLC assay with fluorescence detection for the quantification of pomalidomide in human plasma for pharmacokinetic analyses. Journal of Pharmaceuticaland Biomedical Analysis. 2014;92:63–68. DOI: 10.1016/j.jpba.2014.01.001.

5. Jiang Y., Wang J., Rozewski D. M., Kolli S., Wu C., Chen C., Yang X., Hofmeister C. C., Byud J. C., Johnson A. J. Sensitive liquid chromatography/mass spectrometry methods for quantification of pomalidomide in mouse plasma and brain tissue. Journal of Pharmaceuticaland Biomedical Analysis. 2014;88:26–268. DOI: 10.1016/j.jpba.2013.08.036.

6. Iqbal M., Ezzeldin E., Al-Rashood K. A., Shakeel F. A validated UPLC–MS/MS assay using negative ionization mode for highthroughput determination of pomalidomide in rat plasma. Journal of Chromatography B. 2015;983-984:76–82. DOI: 10.1016/j.jchromb.2014.12.036.

7. Vasanth D. A., Rajkamal B. A UPLC-MS/MS method development and validation for the estimation of pomalidomide from human plasma. International Journal of Applied Pharmaceutics. 2017;9(1):37–43. DOI: 10.22159/ijap.2017v9i1.15653.

8. Миронов А. Н. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К, 2013. 280 с.

9. Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.

10. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.