Совместное определение кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС

Введение. Наибольшей эффективностью и безопасностью в лечении артериальной гипертензии обладают комбинированные лекарственные препараты. Комбинация кандесартана и гидрохлоротиазида (антагонист рецепторов АТ₁ и тиазидный диуретик соответственно) обеспечивает высокую эффективность антигипертензивной комбинированной терапии и находит широкое применение в медицинской практике. Разработка методики совместного определения кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека является необходимой процедурой для выполнения аналитической части фармакокинетических исследований и исследований биоэквивалентности многокомпонентных лекарственных средств.

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для дальнейшего исследования биоэквивалентности.

Материалы и методы. Определение кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки был использован способ осаждения белков ацетонитрилом. Внутренний стандарт: смешанный раствор валсартана и индапамида. Подвижная фаза: 0,1 % раствор муравьиной кислоты в воде (элюент А), 0,1 % муравьиной кислоты в ацетонитриле (элюент В). Колонка: Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl, 50 × 4,6 мм, 5 мкм. Аналитические диапазоны методики: 2,00–300,00 нг/мл для кандесартана, 2,00–200,00 нг/мл для гидрохлоротиазида в плазме крови. Источник ионизации: электроспрей. Условия детектирования: 441,10 → 192,00 m/z, 441,10 → 263,15 m/z (кандесартан), 295,85 →  269,00 m/z (гидрохлоротиазид), 436,00 → 207,05 m/z (валсартан), 363,85 → 132,10 m/z, 363,85 → 189,00 m/z (индапамид).

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность (стабильность исходных и рабочих стандартных растворов аналитов и внутренних стандартов; краткосрочная стабильность; стабильность при трехкратной заморозке-разморозке аналитов; долгосрочная стабильность аналитов в матрице). Разработанная и валидированная методика соответствует требованиям правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза.

Заключение. Подтвержденный аналитический диапазон методики составил 2,00–300,00 нг/мл для кандесартана и 2,00–200,00 нг/мл для гидрохлоротиазида в плазме крови. Данная методика была использована в рамках проведения исследования биоэквивалентности комбинированных препаратов кандесартана и гидрохлоротиазида.

1. ВОЗ публикует статистику о ведущих причинах смертности и инвалидности во всем мире за период 2000–2019 гг. Доступно по: https://www.who.int/ru/news/item/09-12-2020-who-reveals-leading-causes-of-death-and-disability-worldwide-2000-2019. Ссылка активна на 18.10.2021.

2. Jordan J., Kurschat C., Reuter H. Arterial hypertension–diagnosis and treatment. Deutsches Ärzteblatt International. 2018;115:557– 568. DOI: 10.3238/arztebl.2018.0557.

3. Marushchak A., Rogovyy Y., Doroshko V., Shvets V., Savchuk T. Morphological changes in tissues of organs in rats with arterial hypertension (SHR) with treatment of hypotensive medicines (with ramipril and candesartan) in combination with corvitin. ScienceRise: Pharmaceutical Science. 2020;1(23):39–44. DOI: 10.15587/2519-4852.2020.197300.

4. Vangen-Lonne A. M., Wilsgaard T., Johnsen S. H., Lochen M. L., Njolstad I., Mathiesen E.B. Declining incidence of ischemic stroke: what is the impact of changing risk factors? The Tromso Study 1995 to 2012. Stroke. 2017;48:544–550. DOI: 10.1161/STROKEAHA.116.014377.

5. Gierthmuehlen M., Plachta D. T., Zentner J. Implant-mediated therapy of arterial hypertension. Current hypertension reports. 2020;22(2):1–9. DOI: 10.1007/s11906-020-1019-7.

6. Саютина Е. В. Фиксированные комбинации в современных алгоритмах лечения артериальной гипертензии. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2018;17(6):86–94. DOI: 10.15829/1728-8800-2018-6-86-94.

7. Mugellini A., Nieswandt V. Candesartan plus hydrochlorothiazide: an overview of its use and efficacy. Expert opinion on pharmacotherapy. 2012;13(18):2699–709. DOI: 10.1517/14656566.2012.745511.

8. Melian E. B., Jarvis B. Candesartan cilexetil plus hydrochlo-rothiazide combination. Drugs. 2002;62(5):787–816. DOI: 10.2165/00003495-200262050-00006.

9. Bönner G., Fuchs W. Fixed combination of candesartan with hydrochlorothiazide in patients with severe primary hypertension. Current medical research and opinion. 2004;20(5):597–602. DOI: 10.1185/030079904125003395.

10. Hosaka M., Metoki H., Satoh M., Ohkubo T., Asayama K., Kikuya M., Inoue R., Obara T., Hirose T., Imai Y. Randomized trial comparing the velocities of the antihypertensive effects on home blood pressure of candesartan and candesartan with hydrochlorothiazide. Hypertension Research. 2015;38(10):701–707. DOI: 10.1038/hr.2015.64

11. Mancia G., Omboni S. Candesartan plus hydrochlorothiazide fixed combination vs previous monotherapy plus diuretic in poorly controlled essential hypertensive patients. Blood Pressure. 2004;13(2):11–17. DOI: 10.1080/08038020410035574.

12. Shina S. K. Monotherapy versus combination therapy for the initial treatment of hypertension. Journal of Clinical and Preventive Cardiology. 2020;9(2):78–83. DOI: 10.4103/JCPC.JCPC_27_20.

13. Koenig W. Comparison of the efficacy and tolerability of combination tablets containing candesartan cilexetil and hydrochlorothiazide or losartan and hydrochlorothiazide in patients with moderate to severe hypertension. Clinical Drug Investigation. 2000;19(4):239–246. DOI: 10.2165/00044011-200019040-00001.

14. Zhao X., Wang X. Candesartan targeting of angiotensin II type 1 receptor demonstrates benefits for hypertension in pregnancy via the NF-κB signaling pathway. Molecular medicine reports. 2018;18(1):705–714. DOI: 10.3892/mmr.2018.9070.

15. McClellan K. J., Goa K. L. Candesartan Cilexetil. Drugs 1998;56:847–869. DOI: 10.2165/00003495-199856050-00013.

16. Hripcsak G., Suchard M. A., Shea S., Chen R., You S. C., Pratt N., Madigan D., Krumholz H. M., Ryan P. B., Schuemie M. J. Comparison of cardiovascular and safety outcomes of chlorthalidone vs hydrochlorothiazide to treat hypertension. JAMA internal medicine. 2020;180(4):542–551. DOI: 10.1001/jamainternmed.2019.7454.

17. Dineva S., Uzunova K., Pavlova V., Filipova E., Kalinov K., Vekov T. Comparative efficacy and safety of chlorthalidone and hydrochlorothiazide—meta-analysis. Journal of human hypertension. 2019;33:766–774. DOI: 10.1038/s41371-019-0255-2.

18. Rosolová H. Combined therapy of arterial hypertension. Vnitrni lekarstvi. 2013;59(5):366–369.

19. Ruzicka M., Leenen F. H. Monotherapy versus combination therapy as first line treatment of uncomplicated arterial hypertension. Drugs. 2001;61(7):943–954. DOI: 10.2165/00003495-200161070-00004.

20. Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 года № 85 «Об утверждении Правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза». Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/456026107. Ссылка активна на 18.10.2021.

21. Bonthu M. G., Atmakuri L. R., Jangala V. R. Simultaneous determination of candesartan and hydrochlorothiazide in human plasma by LC-MS/MS. Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. 2018;54(1). DOI: 10.1590/s2175-97902018000117381.

22. Singh B., Lokhandae R. S., Dwivedi A., Sharma S., Dubey N. Improved simultaneous quantitation of candesartan and hydrochlorthiazide in human plasma by UPLC–MS/MS and its application in bioequivalence studies. Journal of pharmaceutical analysis. 2014;4(2):144–152. DOI: 10.1016/j.jpha.2013.05.003.

23. Erk N. Simultaneous analysis of candesartan cilexetil and hydrochlorothiazide in human plasma and dosage forms using HPLC with a photodiode array detector. Journal of liquid chromatography & related technologies. 2003;26(15):2581–2591. DOI: 10.1081/JLC-120023802.

24. Bharathi D. V., Hotha K. K., Chatki P. K., Satyanarayana V., Venkateswarlu V. LC–MS/MS method for simultaneous estimation of candesartan and hydrochlorothiazide in human plasma and its use in clinical pharmacokinetics. Bioanalysis. 2012;4(10):1195–1204. DOI: 10.4155/bio.12.83.

25. Hamid S., Beg A. E., Muhammad I. N., Hassan S., Hassan A., Akram A., Alladin N. Development and validation of HPLC method for the determination of Candesartan in human plasma. Pak. J. Pharm. Sci. 2018;31(6):2323–2327.

26. Nawaz H. A., Masood M. I., Abbas M., Usman M., Khan A. M., Rasheed H., Riffat S. Evaluation of gender difference in pharmacokinetics of Candesartan cilexetil in the fasted state by RP-HPLC: A single dose comparative study. Pakistan journal of pharmaceutical sciences. 2019;32(3).

27. Forjan V., Maričič L. C., Prosen H., Vončina D. B. Determination of Candesartan in Human Plasma using Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry. Acta Chimica Slovenica. 2016;63(1):38– 46. DOI: 10.17344/acsi.2015.1836.

28. Zendelovska D., Stafilov T., Miloševski P. Development of solid-phase extraction method and its application for determination of hydrochlorothiazide in human plasma using HPLC. Biomedical Chromatography. 2004;18(2):71–76. DOI: 10.1002/bmc.293.

29. Liu F., Zhang J., Xu Y., Gao S., Guo Q. Determination of hydrochlorothiazide in human plasma by liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis. 2007;44(5):1187–1191. DOI: 10.1016/j.jpba.2007.04.020.

30. Fang W., Xie W., Hsieh J. K., Matuszewski B. K. Development and application of HPLC methods with tandem mass spectrometric detection for the determination of hydrochlorothiazide in human plasma and urine using 96‐well liquid‐liquid extraction. Journal of liquid chromatography & related technologies. 2005;28(17):2681–2703. DOI: 10.1080/10826070500224666.

31. Candesartan. Drugbank. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00796. Accessed: 18.10.2021.

32. Valsartan. Drugbank. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00177. Accessed: 18.10.2021.

33. Hydrochloride. Drugbank. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00999. Accessed: 18.10.2021.

34. Indapamide. Drugbank. Available at: https://go.drugbank.com/ drugs/DB00808. Accessed: 18.10.2021.

35. Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry. Accessed: 18.10.2021.

36. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation. Accessed: 18.10.2021.