В статье рассмотрено применение двух мощных техник ЯМР ME-HSQC и HMBC для определения строения молекул на настольном ЯМР-спектрометре X-Pulse на примере молекулы гемфиброзила. Полученные результаты дают основания утверждать, что применение настольного спектрометра X-Pulse позволяет получить надежные результаты за короткое время.

Статья предоставлена компанией ООО «АВРОРА»

Настоящая работа посвящена проблемам определения критических компонентов и вспомогательных веществ биофармацевтических препаратов, таких как O-связанные гликаны, высвобождаемые из гликопротеинов путем восстановительного в-элиминирования; сиаловых кислот, а также адъювантов вакцин. Основной проблемой ВЭЖХ анализа таких соединений является отсутствие детектирующей системы, не зависящей от наличия или отсутствия хромофорных и флуорофорных группировок в молекуле и дающей практически универсальный отклик вне зависимости от химической структуры определяемых веществ. В статье дается характеристика детектора заряженного аэрозоля (CAD), применение которого дает возможность решить большинство проблем, связанных с детектированием бесхромафорных веществ. Статья демонстрирует несколько примеров, где CAD может применяться для обнаружения и количественного определения веществ, разделенных с помощью обращенно-фазовой хроматографии и хроматографии гидрофильных взаимодействий.

Статья предоставлена компанией ООО «АВРОРА»

ООО «ТД «ХИММЕД» предлагает услуги по проектированию лабораторий различного профиля и их комплексному оснащению лабораторным и аналитическим оборудованием, расходными материалами и мебелью. По желанию заказчика возможна разработка предпроектной и проектной документации согласно Постановлению Правительства РФ от 16.02.2008 № 87.

Статья предоставлена компанией ООО «ТД «ХИММЕД»

Подведены итоги восьмого комплекса отраслевых мероприятий в сфере биотехнологии, биофармацевтики и вирусологии OpenBio, который прошел в наукограде Кольцово Новосибирской области 5-8 октября. В работе научной конференции и делового форума приняли участие около 6 тыс. человек.

Введение. «Этравирин» является одним из востребованных антиретровирусных препаратов, однако его физико-химические свойства недостаточно описаны в научных публикациях. Подробная информация о свойствах субстанции необходима как для организации синтеза, так и для обоснования лекарственной формы и технологии ее получения, а также для выявления узких мест и критических параметров, влияющих на качество готового продукта.

Цель. Изучение физико-химических свойств этравирина для моделирования дизайна исследований по созданию инновационной лекарственной формы.

Материалы и методы. Этравирин (MSN Life Sciences Pvt. Ltd., Hetero Labs Ltd.). Температуру плавления определяли капиллярным методом. Образцы этравирина изучали с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК), рентгеновской порошковой дифрактометрии, ИК- и ЯМР-спектроскопии. Размер частиц определяли с помощью лазерной дифракция света. Форму и размер кристаллов определяли с применением просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ). Концентрацию этравирина в водных средах определяли c использованием метода ВЭЖХ при помощи флуориметрического детектора. Концентрацию этравирина в органических растворителях определяли спектрофотометрически.

Результаты и обсуждение. При помощи рентгеновской порошковой дифрактометрии и спектрометрии в ИК-области установлено, что исследованные субстанции представляют собой одну и ту же полиморфную модификацию. Температура плавления этравирина находится в диапазоне от 259 до 263 °С. Плавление сопровождается разложением. Субстанция практически нерастворима в водных средах при значениях рН в диапазоне от 1,2 до 6,8, растворима в некоторых органических растворителях, легко растворима в диметилсульфоксиде, тетрагидрофуране, N,N-диметилформамиде и N,N-диметилацетамиде. Коэффициент распределения в системе растворителей «октанол-1/ фосфатный буферный раствор рН 6,8» составил 5,22. Экспериментально показано, что субстанция этравирина - липофильная. Было установлено, что этравирин является высококристаллическим веществом и представляет собой кристаллы, имеющие форму вытянутых игольчатых призм.

Заключение. Этравирин - липофильная, практически нерастворимая в водных растворах, растворимая в ряде органических растворителей субстанция. Изученные субстанции оказались одной полиморфной модификацией. Так как плавление субстанции сопровождается разложением, следует избегать процессов технологической обработки при высоких температурах.

Введение. Цикорий обыкновенный (Cichorium intybus L.) широко используется в традиционной медицине различных стран при заболеваниях печени, а также является объектом фармакологических исследований гепатопротекторной активности. В связи с этим во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений разработан способ получения сухого экстракта из травы дикорастущего цикория (ЭТДЦ).

Цель. Цель исследования - определение качественного состава фенольных соединений, выявление веществ, преобладающих в ЭТДЦ, и проведение фармакологического скрининга исследуемого экстракта.

Материалы и методы. Химический состав ЭТДЦ изучали с помощью метода ВЭЖХ-МС/МС, количественное определение основных компонентов проводили методом ВЭЖХ-УФ с использованием индивидуальных соединений, выделенных нами ранее и идентифицированных методом ЯМР-спектроскопии. Проведение фармакологического скрининга гепатопротективной активности ЭТДЦ проводили на 50 крысах-самцах. Острый токсический гепатит у животных вызывали однократным подкожным введением 50 % масляного раствора тетрахлорметана (ТХМ) в дозе 0,4 мл на 100 г массы тела. За час до введения ТХМ животные получали ЭТДЦ в дозах 100 или 500 мг/кг. Через 48 часов после введения ТХМ определяли активность сывороточных ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), а также содержание общего билирубина для предварительного установления фармакологической активности. Патоморфологические исследования печени крыс проводили с использованием гистологических методик. Гистологическое строение печени оценивали, используя срезы печени, окрашенные гематоксилином и эозином.

Результаты и обсуждение. Компонентный состав ЭТДЦ представлен оксикумаринами, гидроксикоричными кислотами и флавоноидами. Доминирующими фенольными соединениями являются эскулетин, цикориин, цикориевая, хлорогеновая и кафтаровая кислоты. В условиях острого экспериментального токсического гепатита было установлено, что предварительное введение ЭТДЦ снижает вызванное ТХМ токсическое действие на клетки печени. У животных, получавших ЭТДЦ в дозах и 100 мг/кг, и 500 мг/кг, наблюдалось снижение активности АЛТ на 35 и 45 %, АСТ - на 15 и 28 %, щелочной фосфатазы - на 15 и 21 %; содержание общего билирубина - на 20 и 29 % соответственно по сравнению с аналогичными показателями у группы животных, не получавших экстракт. Гистологическое исследование показало, что введение ЭТДЦ животным в дозах 100 и 500 мг/кг уменьшает дистрофические изменения гепатоцитов, этот эффект более выражен при дозе 500 мг/кг экстракта.

Заключение. Основными компонентами ЭТДЦ являются оксикумарины (эскулетин, цикориин) и гидроксикоричные кислоты (цикориевая, хлорогеновая и кафтаровая). По результатам скрининговых исследований установлено, что ЭТДЦ в дозах 100 мг/кг и 500 мг/кг является перспективным объектом для дальнейшего фармакологического исследования.

Введение. Наночастицы серебра являются перспективными агентами для подавления резистентных штаммов микроорганизмов и ускорения заживления гнойных ран. Окислительный стресс нарушает процессы нормального ранозаживления, что приводит к образованию хронических незаживающих ран. Поэтому определение способности новых ранозаживляющих агентов подавлять продукцию активных форм кислорода является актуальной задачей.

Цель. Исследовать влияние серебросодержащих бионанокомпозиций на основе гуминовых веществ на базальную и стимулированную трет-бутилгидропероксидом продукцию активных форм кислорода в культуре клеток нормальных фибробластов 3T3-L1 in vitro.

Материалы и методы. Исследование проведено на 7 образцах исходных гуминовых веществ и соответствующих им биоматериалах с наночастицами серебра, синтезированных в Лаборатории природных гуминовых систем химического факультета Московского государственного университета имени М. В. Ломоносова. Оценка внутриклеточной продукции активных форм кислорода проводилась с использованием флуоресцентного зонда 2,7-дихлородигидрофлуоресцеиндиацетата. Клетки культивировали с образцами в течение 24 ч, для стимуляции продукции активных форм кислорода использовали трет-бутилгидропероксид. Детекцию осуществляли флуориметрически с помощью микропланшетного ридера.

Результаты и обсуждение. Наиболее выраженную антиоксидантную активность продемонстрировали три образца биоматериалов с наночастицами серебра, ультрадиспергированными в матрицах гуминовых веществ (CHS-AgNPs, CHP-AgNPs и CHE-AgNPs), что позволяет рассматривать их как наиболее перспективные в качестве фармацевтических агентов для лечения гнойно-воспалительных процессов. Наиболее вероятным механизмом высокой антиоксидантной активности исследуемых биоматериалов в отношении интрацеллюлярных активных форм кислорода является собственная активность гуминовых веществ по связыванию активных форм кислорода, в то время как наночастицы серебра в составе биоматериалов катализируют восстановительные процессы их взаимодействия с активными формами кислорода.

Заключение. Для исследуемых образцов биоматериалов с наночастицами серебра, ультрадиспергированными в матрицах гуминовых веществ, характерна выраженная антиоксидантная активность, что вместе с антибактериальными свойствами позволяет рассматривать их как потенциальные агенты для ускорения заживления гнойных ран.

Введение. Интраназальная доставка in situ гелеобразующих систем является сложным, но перспективным направлением. Из-за высокой стоимости разработки нового химического объекта или генно-инженерной модификации биологических молекул фармацевтические компании сосредоточиваются на разработке технологий новых систем доставки для существующих активных фармацевтических ингредиентов с целью улучшения их эффективности и биодоступности. In situ системы для интраназальной доставки за счет повышенной вязкости и мукоадгезии к слизистой носа позволяют преодолевать мукоцилиарный клиренс и гарантировать полное всасывание и пролонгированное высвобождение активных фармацевтических ингредиентов.

Текст. В статье рассмотрены виды и основные преимущества интраназальных in situ систем доставки, показанные в доклинических исследованиях, а также подходы к технологии получения и стандартизации этих систем. Обобщены данные научных исследований в этой области за последние 15 лет, выделены наиболее перспективные полимеры для создания термообратимых и рН-чувствительных композиций, а также проанализированы современные методы оценки золь-гель перехода in situ.

Заключение. Применение in situ систем для интраназального введения позволяет обеспечивать высокую таргетность доставки синтетических и биологических молекул в мозг. В настоящее время имеются многочисленные фармакокинетические и фармакодинамические исследования на животных, подтверждающие эффективность таких систем, а также их безопасность. Наиболее востребованными для конструирования систем доставки in situ остаются термореверсивные коммерчески доступные и направленно синтезируемые полимеры (полоксамер 407, PLGA, NIPAAm и др.), а также хитозан. Для оценки параметров in situ гелеобразования широко используются in vitro и ex vivo методы со слизистой и искусственной назальной жидкостью, однако для увеличения воспроизводимости методик и улучшения корреляции in vitro/in vivo рекомендуется проводить моделирование носовой полости. Совершенствование технологии и методов скриннинга интраназальных реверсивных систем поможет приблизиться к проведению клинических исследований и выходу этих систем доставки на мировой фармацевтический рынок.

Введение. Минеральная сырьевая база России располагает эффективными сорбционными веществами, которые соответствуют фармацевтическим требованиям. Перспективным минеральным сырьем являются цеолиты, сочетающие в себе свойства адсорбента и «молекулярного сита» за счет пористой структуры. Помимо энтеросорбционного направления, природные цеолиты являются источником макро- и микроэлементов, что обуславливает их применение в качестве биологически активных пищевых добавок.

Цель. Исследование физико-химических характеристик цеолитов Холинского месторождения.

Материалы и методы. В качестве объектов исследования использовали цеолитное минеральное сырье Холинского месторождения. Оптическую микроскопию осуществляли на прямом микроскопе Leica DM (Microsystems, Германия). Энергодисперсионный анализ проводили при помощи электронного сканирующего микроскопа JSM-5300 (JEOL, Ltd., Япония). Исследование сорбционных характеристик проводили на приборе ASAP 2400 (Micromeritics, США). Построение виртуальной трехмерной молекулярной модели цеолита проводили при помощи программы Java Applet Jmol.

Результаты и обсуждение. Исследованы физико-химические свойства цеолитов. Установлено, что морфологически частицы цеолитовой фазы имеют размер 5-30 мкм, они равномерно распределены по всей площади участка и представляют первый структурный уровень. Частицы цеолитовой фазы размером 5-6 мкм формируют второй структурный уровень за счет кристаллов клиноптилолита, микротрещин и микрожеод. На основании энергодисперсионного спектрального анализа выявлено повышенное содержание элементов K и Na, что указывает на щелочной состав катионного обменного комплекса. Исследуемые образцы цеолита имеют микропоры (объем 0,0031 см³/г), мезопоры (объем 0,0675 см³/г), удельная поверхность составила 29,1840 м²/г. Разработана виртуальная трехмерная молекулярная модель цеолита Холинского месторождения. Согласно молекулярной модели сорбционные характеристики цеолита Холинского месторождения составили: удельная поверхность - 1096,31 м²/г (1916,34 м²/см³), средний диаметр сферической молекулы для адсорбции в порах равен 5,97 Å.

Заключение. Анализ сорбционных характеристик цеолита позволил выявить следующие его особенности: поры занимают половину объема всего цеолита, которые доступны для сорбции воды и низкомолекулярных веществ. Каждая пора по трем взаимно перпендикулярным направлениям сообщается с соседними через «окна». Образуется система внутрикристаллических пор и полостей, в которых может происходить адсорбция молекул соответствующего размера.

Введение. Штаммы E. coli являются основными микроорганизмами, использующимися для получения ряда важных биофармацевтических продуктов. На Земле не существует естественных источников микроволнового излучения, так как оно поглощается верхними слоями атмосферы. Важность исследования биологического действия СВЧ-излучения ни у кого не вызывает сомнений. С каждым годом растет число публикаций, посвященных данной проблеме, и появляются новые идеи использования микроволн в технологии получения лекарств.

Цель. Выявить основные эффекты СВЧ-облучения и разработать технологию микроволновой интенсификации роста культуры E. coli. Материалы и методы. В настоящем исследовании представлены результаты атомно-силовой микроскопии, рефрактометрии, ЯМР-релаксометрии, турбидиметрии и люминометрии, демонстрирующие возможность микроволновой интенсификации процесса культивирования.

Результаты и обсуждение. Обнаружено, что СВЧ-облучение приводит к изменениям подвижности протонов и адсорбции молекул воды на биополимерах и клетках. Это является основными звеньями механизма «нетеплового» микроволнового воздействия. Однократное СВЧ-облучение в зависимости от ряда параметров может снижать или повышать прирост биомассы. Исследования биолюминесценции штамма E. coli с lux-опероном показали, что оптимальные условия обработки не оказывают негативного влияния на продукцию люциферазы и метаболическую активность клеток.

Заключение. Процедура интенсификации с использованием СВЧ-излучения может считаться перспективным методом и может дать новые идеи для различных приложений в биотехнологии.

Введение. Применение противоопухолевого препарата паклитаксела ограничено из-за его высокой системной токсичности и липофильности, существенно лимитирующей создание парентеральных форм на основе субстанции паклитаксела. Предложена новая полимерная композиция паклитаксела, обеспечивающая направленный транспорт препарата в опухолевые клетки и повышающая профиль его безопасности.

Цель. Разработка состава и технологии получения наноразмерной формы паклитаксела в виде конъюгата частиц на основе сополимера молочной и гликолевой кислот с третьим доменом альфа-фетопротеина.

Материалы и методы. Объектом данного исследования являются наночастицы, содержащие паклитаксел, на основе сополимера молочной и гликолевой кислот, поверхность которых модифицирована векторной молекулой - рекомбинантным третьим доменом альфа-фетопротеина. Наночастицы получали методами одинарного эмульгирования и преципитацией. Последующую конъюгацию с белковой молекулой проводили карбодиимидным методом. Анализ полученных наночастиц проводили с помощью динамического и электрофоретического светорассеяния, высокоэффективной жидкостной хроматографии, метода диализной мембраны.

Результаты и обсуждение. Разработан метод получения наночастиц на основе сополимера молочной и гликолевой кислот с паклитакселом, оптимизирована конъюгация полученных наночастиц с белковой векторной молекулой при варьировании широкого диапазона условий. Полученные наночастицы обладали средним диаметром 280 ± 12 нм. Эффективность конъюгации составила 95 %. Высвобождение паклитаксела из полимерной матрицы в среде 0,01 M фосфатно-солевого буфера (pH 7,4) составило 65 % за 220 ч. Заключение. Предложен метод получения и приведено обоснование состава оригинальной наноразмерной формы паклитаксела на основе конъюгата частиц на основе сополимера молочной и гликолевой кислот с третьим доменом альфа-фетопротеина. Показана возможность пролонгированного высвобождения паклитаксела из полимерной матрицы.

Введение. Фитоэкдистероиды - группа природных соединений, родственных по структуре и физиологическому действию экдизону -гормону линьки насекомых. Установлено, что фитоэкдистероиды обладают противоспалительным действием, что дает основание полагать наличие у них регенерирующих свойств. Представляет интерес разработка мягкой лекарственной формы, содержащей фитоэкдистероиды.

Цель. Совершенствование мазевых композиций с фитоэкдистероидами путем оптимизации состава вспомогательных веществ основы.

Материалы и методы. В качестве активной субстанции использовали серпистен, содержащей сумму фитоэкдистероидов, основным из которых является 20-гидроксиэкдизон и получаемый из листьев Serratula coronata L. Сырье серпухи венценосной листья зарегистрировано Федеральной службой Роспотребнадзора (г. Москва) для получения БАД (Гр № 77.99.23.3.У.1922.3.08), субстанция серпистен (Гр № 77.99.23.3.У.1923.3.08. ТУ 9369-002-15092611-2008). В работе использовали вспомогательные вещества, разрешенные к медицинскому применению: моноглицериды дистиллированные, эмульгатор Т-2, твин-80, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, поливиниловый спирт, гидроксид алюминия, аэросил, вазелин, масло вазелиновое, масло подсолнечное. Оптимизацию состава вспомогательных веществ мази проводили по плану греко-латинского квадрата 4 х 4 с повторными наблюдениями. В качестве технологических параметров оценивали концентрацию водородных ионов водных извлечений мазей; кислотное число; высвобождение серпистена из мази в агаровый гель, термостабильность структуры. Структурно-механические свойства мазевой композиции оптимального состава определяли на ротационном вискозиметре RHEOTEST RV 2.1 (RHEOTEST Medingen GmbH, Германия). В качестве препарата сравнения использовали мазь «Бепантен» (GP Grenzach Produktsions GmbH, Германия).

Результаты и обсуждение. В ходе оптимизации состава дифильной мази с серпистеном установлено, что соотношение гидрофобной и гидрофильной фаз должно быть 1 : 1, в мазевую основу целесообразно вводить эмульгатор Т-2, аэросил и смесь вазелина и вазелинового масла в пропорции 1 : 1. В результате проведенных исследований по оптимизации мазевых композиций предложен следующий состав мази серпистена: серпистен - 0,02; эмульгатор Т-2 - 3,0; аэросил - 3,0; вазелин - 23,0; масло вазелиновое - 23,0; спирт этиловый 40 % - 1 мл; вода очищенная до 100,0. Сравнительный анализ эффективной вязкости показал, что предлагаемый состав по этому показателю максимально приближен к вязкости мази «Бепантен».

Заключение. Выполнен комплекс технологических исследований по оптимизации состава мази серпистена 0,02 % на дифильной основе. Разработанный состав и технология позволили получить композицию, обладающую термостабильностью, приблизить водородный показатель мази к рН кожи человека и добиться параметров, входящих в реологический оптимум для дерматологичесих мазей (0,34-108 Па • с).

Введение. В настоящем обзоре рассмотрено современное состояние технологий ультразвукового выделения биологически активных компонентов из лекарственного растительного сырья и растительного сырья, перспективного для использования в медицинской и косметологической практике. Основной акцент сделан на «зеленые» технологии, интенсифицирующие процессы выделения таких компонентов, как флавоноиды.

Текст. Современные технологии подразумевают использование комбинированных методов, включающих помимо ультразвука существенное измельчение сырья перед процессом экстракции, применение сверхкритических растворителей (сжиженных газов) под избыточным давлением. Также было рассмотрено влияние мощности ультразвука и температуры на выход извлекаемых компонентов.

Заключение. 1. Для увеличения выхода биологически активных соединений из растительного сырья среди различных физических методов интенсификации экстракции, доминирует применение ультразвука. 2. Ультразвуковую экстракцию можно разделить на несколько основных типов: экстракция в ультразвуковой ванне, применение погружных ультразвуковых излучателей, а также совмещение ультразвуковой экстракции с дополнительными видами воздействия. 3. В литературных источниках наиболее полно представлены примеры использования ультразвуковой экстракции для выделения фенольных соединений, причем отмечено, что параметры необходимо подбирать индивидуально для каждого отдельного растительного объекта. 4. Мощность ультразвука и характер экстрагента могут влиять на протекания окислительных процессов в экстракте, причем такие явления характерны не только для слишком высоких мощностей, но и для низких. 5. Ультразвук может значительно повысить выход биологически активных соединений даже при водной экстракции свежего сырья. 6. Спектр выбора экстрагентов для проведения ультразвуковой экстракции растительного сырья достаточно велик. Могут применяться как органические растворители (этанол, метанол, этилацетат, ацетон), так и вода, а также смеси различных экстрагентов.

Введение. Интраназальная доставка лекарственных средств напрямую из носа в мозг является одним из многообещающих направлений для лечения заболеваний головного мозга, включающих нейродегенеративные расстройства, инсульт, опухоли головного мозга и т. д.

Текст. Доставка лекарства через нос имеет ряд преимуществ, среди которых быстрое наступление фармакологического эффекта, возможность обхода гематоэнцефалического барьера, снижение вероятности возникновения побочных эффектов, а также быстрый и неинвазивный способ введения. Однако существенными недостатками данного пути является сравнительно быстрое вымывание с поверхности слизистой оболочки, плохое проникновение лекарства через слизистую носа, мукоцилиарный клиренс и действие протеолитических ферментов. В настоящее время для преодоления вышеуказанных ограничений используются различные направления, среди которых следует отметить разработку систем доставки из носа в мозг, представляющих собой мукоадгезивные, мукус-проникающие и гелеобразующие системы, способствующие удерживанию или проникновению лекарств через слизистую оболочку. При этом значительную роль при конструировании такого рода систем занимают высокомолекулярные соединения. В частности, мукоадгезивные системы могут быть получены из катионных и анионных полимеров. Недавние исследования также показали проявление мукоадгезивных свойств у интерполиэлектролитных комплексов. Увеличение мукоадгезивных свойств полимеров при конструировании систем доставки лекарств может быть также достигнуто путем присоединения к ним различных функциональных групп, таких как тиолы, малеимиды, акрилаты, метакрилаты, катехолы и т. д. Мукус-проникающие системы могут быть получены путем ПЭГилирования наночастиц, а также функционализацией с помощью некоторых поли-(2-оксазолинов), поливинилового спирта и др., что было показано на других слизистых оболочках организма. Наконец, увеличение проникновения возможно достичь путем использования муколитических средств в комбинации с неионогенными поверхностно-активными веществами. Другим подходом для увеличения эффективности доставки лекарств из носа в мозг является использование гелеобразующих систем. В частности, актуальным является гелеобразование in situ. Данный вид гелей на первом этапе представляет собой раствор, в дальнейшем в ответ на химическое и физическое воздействие происходит фазовый переход, сопровождающийся образованием геля. В зависимости от внешней стимуляции фазового перехода различают термо-, рН-, ионообратимые и другие системы, показавшие свою эффективность для доставки в мозг путем интраназального введения.

Заключение. Эффективная интраназальная доставка лекарственных средств и терапевтических агентов в мозг может быть достигнута путем использования мукоадгезивных, мукус-проникающих и гелеобразующих систем и/или их комбинаций.

Введение. Грамицидин С традиционно выпускается в виде таблеток буккальных. В последнее время активно ведутся разработки лекарственной формы грамицидина С в виде спрея. Разработанные составы содержат вспомогательные вещества, которые способствуют солюбилизации малорастворимого антибиотика, однако истинная структура жидких лекарственных форм грамицидина С остается неопределенной.

Цель. Определить коллоидную структуру и биофармацевтические свойств новой антибактериальной композиции грамицидина С.

Материалы и методы. Образец композиции получали в результате самоорганизации с использованием субстанции грамицидина С дигидрохлорида и вспомогательных веществ: пропиленгликоль, полисорбат-80, этиловый спирт, вода очищенная. Для определения качественного состава фаз использовалась рамановская спектроскопия. Параметры частиц в композиции устанавливали с использованием метода динамического рассеяния света. Для сравнительной оценки параметров высвобождения использовали диализ, детектируя концентрацию грамицидина С методом ВЭЖХ. Исследование антимикробного действия проводили в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи РФ XIV издания.

Результаты и обсуждение. Проведены структурные исследования композиции грамицидина С: определены размер (5–50 нм), ζ-потенциал частиц (–1,1: +7,9 мВ). Проведена классификация композиции на основании данных о параметрах и особенностях формирования системы, что позволило отнести ее к классу коллоидных растворов. Показано, что исследуемая композиция обладает кинетической устойчивостью. Продемонстрирован характер высвобождения действующего вещества в сравнении с исходной субстанцией и повышенная растворимость антибиотика в воде. Подтверждено усиление антимикробных свойств пептида в составе коллоидного раствора, что связано с синергетическим действием поверхностно-активных веществ и грамицидина С.

Заключение. Установлена коллоидная структура композиции грамицидина С с содержанием 8 мг/мл. Установлено, что включение грамицидина С в состав коллоидного раствора приводит к значительному повышению эффективности антибиотика, что открывает перспективы к уменьшению дозировки действующего вещества и снижению уровня побочных эффектов при разработке лекарственного препарата.

Введение. Сырье растений рода Crataegus L. (Боярышник) включено во многие Фармакопеи мира. Государственная фармакопея Российской Федерации предусматривает использование плодов и цветков боярышника. Вместе с тем, литературные данные подтверждают возможность использования в медицинских целях листьев боярышника, поскольку «листья» и «цветки с листьями» имеют фармакопейный статус во всем мире. Они рассматриваются как перспективные виды сырья боярышника для российского фармацевтического производства. Однако большинство видов остаются плохо изученными в отношении количественных микроскопических характеристик (размеры устьичного аппарата (УА) и трихом эпидермиса листовых пластинок), которые могут иметь большое значение для установления подлинности сырья.

Цель. Изучить анатомическое строение эпидермиса листовых пластинок Crataegus spp. и провести сравнительное исследование количественных диагностических признаков листовых пластинок растений боярышника из секции Sanguineae и секции Crataegus, произрастающих в разных регионах Российской Федерации.

Материалы и методы. Образцы листьев боярышника (C. sanguinea, C. maximowiczii, C. dahurica, C. rhipidophylla, C. monogyna и C. pallasii) были заготовлены в естественных местообитаниях в Западной Сибири (Кемерово) и в дендрариях ботанических садов г. Москвы и г. Ставрополя. Измерения анатомических структур проводились с помощью светового микроскопа с окулярным микрометром.

Результаты и обсуждение. Проведено сравнительное исследование морфолого-анатомического строения листовых пластинок (ЛП) на уровне видов и секции боярышника. Приведены размеры (длина и ширина) для УА, сидячих многоклеточных железок и простых одноклеточных трихом. Описана форма железок и установлено различие на уровне секции. Отмечены особенности опушения.

Заключение. Результаты количественного анатомического исследования позволили выявить характерные отличительные признаки по размерам УА и форме желёзок в зависимости от вида боярышника и на уровне секций. Таким образом, это может облегчить установление подлинности и контроль качества целого или измельченного лекарственного сырья Crataegus.

Введение. Цветки липы сердцевидной применяются преимущественно в виде водных извлечений, а фармакологический эффект обусловлен водорастворимыми соединениями, основу которых составляют полисахариды. Изучение особенностей накопления данной группы соединений является актуальным.

Цель. Изучение особенностей накопления суммы восстанавливающих сахаров в цветках липы сердцевидной, заготовленных в агро- и урбоценозах Воронежской области.

Материалы и методы. В Воронежском регионе была выбрана 51 точка заготовки цветков липы сердцевидной. Объектом исследования стали цветки липы сердцевидной – широко распространенных на территории России – вида листопадных деревьев. Для изучения содержания суммы восстанавливающих сахаров в пересчете на глюкозу – основной группы биологически активных веществ в цветках липы сердцевидной – использовали методику ФС.2.5.0024.15 «Липы цветки». Для подробного изучения влияния основных поллютантов (тяжелых металлов и мышьяка) на накопление восстанавливающих сахаров в цветках липы сердцевидной анализировали коэффициенты корреляции.

Результаты и обсуждение. Все проанализированное лекарственное растительное сырье признано доброкачественным по содержанию восстанавливающих сахаров. Образцы, собранные на контрольных (заповедных) территориях, содержат восстанавливающие сахара в количестве от 13,31 до 16,89 %, что в 6–8 раз больше нижнего числового показателя, установленного нормативной документацией. В лекарственном растительном сырье, собранном в агроценозах региона, концентрация восстанавливающих сахаров варьирует от 6,12 до 16,68 %, что в 3–8 раз больше приведенного в фармакопейной статье числового показателя. Для цветков липы сердцевидной, заготовленных в урбоценозах региона, показано более низкое содержание восстанавливающих сахаров, чем для образцов заповедных зон (2,35–13,49 % ). Рассчитанные значения коэффициентов корреляции показали заметное отрицательное влияние кадмия, хрома, кобальта, меди, цинка, а также умеренное отрицательное влияние свинца и ртути на накопление восстанавливающих сахаров в цветках липы сердцевидной.

Заключение. Наиболее низкое содержание восстанавливающих сахаров выявлено в образцах, заготовленных на улицах крупных городов области, вдоль автомобильных трасс и железной дороги. Это позволяет сделать вывод об отрицательном влиянии антропогенной нагрузки на накопление восстанавливающих сахаров в цветках липы сердцевидной. Вероятно, прочные комплексы сахаридов с тяжелыми металлами затрудняют реакцию с комплексообразователем, используемым в методике количественного определения восстанавливающих сахаров. Это выражается некоторым ложным снижением показателей содержания биологически активных веществ.

Введение. Производство, процесс стандартизации и контроль качества различных БАД, содержащих в составе хелатированный цинк, требуют применения валидированных количественных методик оценки. В настоящей работе предложена методика рентгенофлуоресцентной спектроскопии (РФС) для определения содержания цинка в составе координационных соединений на примере синтезированного хелатного комплекса с метионином.

Цель. Синтезировать хелатный комплекс состава Zn(Met)₂, разработать и валидировать методику его количественного анализа с применением метода РФС.

Материалы и методы. Синтезированный хелатный комплекс цинка был исследован методом ИК-спектроскопии. Для разработки методики количественной оценки содержания цинка в синтезированном комплексе был использован метод РФС. В качестве калибровочных стандартов были использованы сухие смеси моногидрата сульфата цинка и L-метионина в молярном соотношении Zn к Met – 1 : 1, 1 : 2, 1 : 4, 1 : 8 и 1 : 16 и водные растворы смеси сульфата цинка и L-метионина в молярном соотношении Zn к Met 1 : 2 с концентрацией (по цинку) от 0,5 до 100 ммоль/л. В качестве арбитражного метода количественного определения содержания цинка в исследуемых образцах было использовано комплексонометрическое титрование.

Результаты и обсуждение. ИК-спектр хелатного комплекса подтвердил наличие донорно-акцепторной связи между Zn²⁺ и атомом азота аминогруппы метионина. Результаты комплексонометрии показали, что полученные в ходе синтеза хелатные соединения имеют состав, соответствующий стехиометрической формуле Zn(Met)₂. Анализ стандартных образцов сухих смесей цинка сульфата моногидрата и метионина методом РФС продемонстрировал наличие матричного эффекта и невозможность использования данной калибровочной модели для точной оценки содержания цинка в хелатном соединении. По данным спектров РФС водных растворов, содержащих цинка сульфат и метионин в соотношении 1 : 2 при концентрации цинка 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 10; 25; 50 и 100 ммоль/л, построен калибровочный график – зависимость интенсивности сигнала флуоресценции для Kα линии цинка от концентрации цинка в растворе (r = 0,9996). Методика оценена по следующим валидационным параметрам: специфичность, линейность, правильность, прецизионность, аналитическая область. Специфичность валидируемой методики доказана в присутствии меди, железа и серебра.

Заключение. Разработанная методика позволяет с достаточной прецизионностью и правильностью определять методом РФС содержание Zn²⁺ в его водных растворах неорганической и органической природы в диапазоне концентраций от 3 до 100 ммоль/л без влияния матрицы.

Введение. Клинические штаммы микроорганизмов, в том числе и условно-патогенные дрожжеподобные грибы (ДПГ) рода Candida, обладают устойчивостью к используемым в настоящее время противогрибковым препаратам. В связи с этим поиск альтернативных путей потенцирования активности антимикробных средств по отношению к инфекционному агенту является важным и актуальным направлением исследований. Изучение сочетаний существующих антимикотических препаратов и лекарственного экстракта растительного происхождения – фарнезола – одно из перспективных подходов в борьбе с резистентными штаммами ДПГ рода Candida. В наших предыдущих исследованиях было показано, что фарнезол проявляет относительную активность против биопленок ДПГ Candida albicans. В данной работе мы использовали 6 клинических изолятов и один музейный штамм ДПГ C. albicans для исследования влияниия фарнезола на противогрибковую активность антимикотических препаратов.

Цель. Оценить модулирующее действие фарнезола на противогрибковую активность некоторых антимикотических препаратов.

Материалы и методы. Для определения чувствительности 7 штаммов ДПГ C. albicans к антимикотическим препаратам «Нистатин» (NYS 50 µg), «Кетоконазол» (KET 10 µg), «Клотримазол» (CTR 10 µg), «Амфотерицин В» (AMB 10 µg), «Вориконазол» (VRC 10 µg) использовали диско-диффузионный метод. На диск с антимикотикотическим препаратом наносили раствор фарнезола в концентрациях 100, 50 и 25 мкМ в объеме 25 мкл. В качестве контроля использовали стерильный физиологический раствор (ФР) (pH 7,0; V = 25 мкл).

Результаты и обсуждение. В 34,3 % случаев от общего числа экспериментов можно говорить о модулирующем действии растворов фарнезола на противогрибковую активность антимикотических препаратов при комбинации фарнезол + антимикотический препарат. Во всех этих случаях чувствительность ДПГ C. albicans к антимикотическому препарату увеличивается.

Заключение. Результаты данного исследования содержат полезную информацию для понимания механизма действия QS-молекул, обладающих противогрибковой активностью, а также они являются обоснованием для практического применения некоторых QS-молекул в терапии инфекционных заболеваний, вызванных ДПГ рода Candida. Проведенное исследование демонстрирует, что фарнезол может быть рекомендован в качестве активного вещества, улучшающего чувствительность ДПГ рода Candida к антимикотическим препаратам, особенно в случае с полирезистентными штаммами ДПГ рода Candida.

Введение. Вирусные гепатиты (ВГ) по своей социально-экономической значимости занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии человека, поэтому разработка принципиально новых методов профилактики, диагностики и лечения, а также создание новых противовирусных лекарственных средств остаются актуальными. В ВИЛАР создан противовирусный лекарственный растительный препарат «Флакозид», который представлен в лекарственной форме – таблетки 0,1 г для приема внутрь.

Цель. Проанализировать экспериментальную и клиническую эффективность и безопасность терапии флакозидом при вирусных гепатитах.

Материалы и методы. Экспериментальное изучение влияния флакозида на вирусный гепатит А (ВГА). В работе использовали культуру клеток AGMK (линия BS-C-1) и адаптированный к ней штамм вируса гепатита А HM 175. Исследования проведены в двух сериях экспериментов с использованием различных концентраций препарата, который вносили в культуры одновременно с заражением ВГА. Экспериментальное изучение влияния флакозида на вирусный гепатит С (ВГС). В настоящих опытах использовали вируссодержащую культуральную жидкость, собранную из инфицированных культур фибробластов куриного эмбриона, содержащую 7,0 lg ТЦД₅₀/мл инфекционного ВГС (генотип 1b). Цитотоксическую, вирулицидную и противовирусную активности флакозида изучали с использованием перевиваемых культур клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ), полученных из коллекции клеточных линий ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского» Минздрава России. В опытах использовали однодневный монослой клеток, выращенный в 96-луночных пластиковых культуральных панелях. Определяли ИД₅₀ – концентрацию препарата «Флакозид», ингибирующую развитие вируса в монослое на 50 % и ЦД₅₀ – минимальную его концентрацию, вызывающую цитотоксическую деструкцию 50 % клеток монослоя, а также ХТИ – химиотерапевтический индекс, вычисляемый как отношение ЦД₅₀ к ИД₅₀. В качестве препарата сравнения использовали известное отечественное противовирусное средство – «Рибавирин». Клинические исследования флакозида при вирусном гепатите А. Результаты клинических исследований противовирусного препарата «Флакозид» (таблетки 0,1 г) проанализированы у 258 пациентов с вирусным гепатитом А. «Флакозид» назначали пациентам со среднетяжелым течением заболевания по 0,1 г 3 раза в сутки в течение 20 дней на фоне базисной терапии: диета, щелочное питье, Энтеродез®. Терапевтический эффект оценивали по клиническим (слабость, снижение аппетита, тошнота, рвота) и биохимическим показателям (уровень прямого билирубина, активность трансаминаз), а также по степени выраженности гепатолиенального синдрома. Клинические исследования флакозида при вирусном гепатите В. Результаты клинических исследований противовирусного препарата «Флакозид» (таблетки 0,1 г) проанализированы у 410 пациентов с острым вирусным гепатитом В, который расценивали как среднетяжелый. «Флакозид» назначали на фоне базисной терапии: диета и дезинтоксикационная терапия: 5 % раствор глюкозы, 5 % раствор аскорбиновой кислоты, «Гемодез», в суточной дозе 0,3–0,8 г до 38 дней. Группа сравнения получала такую же базисную терапию без флакозида. Оценивали динамику клинических симптомов (общая слабость, головная боль, нарушение сна, головокружения, тошнота, рвота, нарушение аппетита, зуд кожи, боли в правом подреберье, желтуха и др.), данные лабораторных методов обследования, определяли маркеры гепатита В – HBeAg и австралийский антиген (HBsAg) каждые 10 дней и показатели клеточного иммунитета до назначения и через 21 день лечения; определяли абсолютное число лимфоцитов, общее количество Т-лимфоцитов, а также количество теофиллинрезистентных и теофиллинчувствительных клеток.

Результаты и обсуждение. Результаты экспериментальных исследований выявили противовирусное действие флакозида в отношении вируса гепатита А, подтвержденное при проведении клинических исследований у взрослых пациентов. Лечение флакозидом пациентов с вирусным гепатитом А на фоне базисной терапии в суточной дозе 0,3 г в течение 20 дней приводило к достоверному снижению симптомов интоксикации, сокращению желтушного периода, нормализации размеров печени и селезенки. Лечение флакозидом в составе комплексной терапии пациентов с острым вирусным гепатитом В (ОГВ) средней тяжести в суточных дозах 0,3–0,8 г в течение 38 дней показало его высокую эффективность, способствуя более быстрому исчезновению клинических симптомов заболевания (улучшение общего состояния пациентов, уменьшение выраженности и исчезновение клинических симптомов интоксикации, сокращение желтушного периода), нормализации биохимических показателей (снижение уровня билирубина и активности трансаминаз), а также элиминации из крови HВsAg, стимуляции клеточного иммунитета. «Флакозид» хорошо переносился, не вызывал аллергических реакций. На основании результатов клинических исследований «Флакозид» разрешен для медицинского использования в качестве противовирусного средства (регистрационный номер 90/248/7). Установлена высокая противовирусная активность флакозида в отношении вируса гепатита С в культурах клеток. По степени выраженности лечебного эффекта «Флакозид» не уступал рибавирину, а по ХТИ заметно его превосходил.

Заключение. Лечение флакозидом пациентов с вирусными гепатитами А и В показало его высокую эффективность, способствовало более быстрому исчезновению клинических симптомов заболевания, нормализации биохимических показателей, элиминации из крови HВsAg, хорошую переносимость. «Флакозид» рекомендован в клинической практике в комплексном лечении гепатитов А и В. В опытах in vitro установлена высокая противовирусная активность флакозида в отношении вируса гепатита С, что обосновывает возможность проведения клинических исследований препарата у пациентов с вирусным гепатитом С.

Введение. Наибольшей эффективностью и безопасностью в лечении артериальной гипертензии обладают комбинированные лекарственные препараты. Комбинация кандесартана и гидрохлоротиазида (антагонист рецепторов АТ₁ и тиазидный диуретик соответственно) обеспечивает высокую эффективность антигипертензивной комбинированной терапии и находит широкое применение в медицинской практике. Разработка методики совместного определения кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека является необходимой процедурой для выполнения аналитической части фармакокинетических исследований и исследований биоэквивалентности многокомпонентных лекарственных средств.

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для дальнейшего исследования биоэквивалентности.

Материалы и методы. Определение кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки был использован способ осаждения белков ацетонитрилом. Внутренний стандарт: смешанный раствор валсартана и индапамида. Подвижная фаза: 0,1 % раствор муравьиной кислоты в воде (элюент А), 0,1 % муравьиной кислоты в ацетонитриле (элюент В). Колонка: Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl, 50 × 4,6 мм, 5 мкм. Аналитические диапазоны методики: 2,00–300,00 нг/мл для кандесартана, 2,00–200,00 нг/мл для гидрохлоротиазида в плазме крови. Источник ионизации: электроспрей. Условия детектирования: 441,10 → 192,00 m/z, 441,10 → 263,15 m/z (кандесартан), 295,85 →  269,00 m/z (гидрохлоротиазид), 436,00 → 207,05 m/z (валсартан), 363,85 → 132,10 m/z, 363,85 → 189,00 m/z (индапамид).

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность (стабильность исходных и рабочих стандартных растворов аналитов и внутренних стандартов; краткосрочная стабильность; стабильность при трехкратной заморозке-разморозке аналитов; долгосрочная стабильность аналитов в матрице). Разработанная и валидированная методика соответствует требованиям правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза.

Заключение. Подтвержденный аналитический диапазон методики составил 2,00–300,00 нг/мл для кандесартана и 2,00–200,00 нг/мл для гидрохлоротиазида в плазме крови. Данная методика была использована в рамках проведения исследования биоэквивалентности комбинированных препаратов кандесартана и гидрохлоротиазида.

Введение. Статья посвящена аспектам совершенствования методических подходов к созданию фармацевтической системы качества (ФСК) на предприятиях по выпуску лекарственных средств (ЛС) с учетом возможности применения инструментов и средств цифровизации. Актуальность проведенного исследования связана с непреходящим значением комплексного обеспечения высокого качества при разработке, производстве и выпуске в обращение лекарственных средств. Внедрение ФСК требует многочисленных трансформаций управленческих и производственных процессов, содействие которым могут оказать инструменты и элементы цифровизации.

Цель. Рассмотреть потенциал и конкретные сферы применения цифровых технологий для совершенствования методологии и практики разработки и внедрения ФСК.

Материалы и методы. Состояние дел в предметной сфере оценивалось на основании результатов экономико-статистического анализа и прогнозирования внедрения ФСК на российских фармацевтических предприятиях, имеющих положительный и сопоставимо длительный опыт в данной сфере: в компаниях ООО «ОЗОН» и АО «АКРИХИН». Оценка проводилась путем расчета интегрального показателя эффективности функционирования ФСК, представляющего собой набор взвешенных ключевых показателей эффективности (KPI) по качеству.

Результаты и обсуждение. Констатируется значимость внедрения ФСК для целей развития фармпредприятий и наличие многочисленных затруднений при внедрении ФСК, что обусловливает необходимость совершенствования методических подходов в предметной сфере. Доказано, что даже на тех предприятиях, где ФСК с той или иной степенью успешности была внедрена, более быстрому, системному и качественному внедрению ФСК поспособствовало бы применение инструментов цифровизации. В числе ключевых сфер применения цифровых инструментов авторами предлагаются мониторинг показателей качества (с применением нейросетевых карт), применение блокчейн платформ, смарт-контрактов для регистрации выпуска ЛС надлежащего качества, регламентации и контроля за порядком внедрения ФСК.

Заключение. Цифровые инструменты способствуют комплексному совершенствованию во многих сферах социально-экономической деятельности. Их активное применение на фармпредприятиях призвано способствовать обеспечению надлежащего внедрения и бесперебойного функционирования фармацевтических систем качества, через постоянный мониторинг качества выпускаемой продукции и регистрацию выпускаемых партий в высокоточных системах хранения информации.

Введение. В статье рассмотрена задача оценки сходства профилей растворения двух серий лекарственного препарата небиволола. Применение общепринятого фактора сходимости для оценки эквивалентности не приемлемо в ряде случаев, например, для препаратов с высокой вариабельностью значений высвобождения действующего вещества из лекарственной формы. Вместе с тем в настоящее время отсутствуют общепризнанные подходы к сравнению профилей кинетики растворения лекарственных препаратов за исключением метода оценки сопоставимости профилей на основе математического расчета фактора сходимости f₂, который имеет определенные критерии, ограничивающие его применение.

Цель. Продемонстрировать альтернативные методы оценки сходства между профилями растворения двух лекарственных препаратов на практическом примере.

Материалы и методы. В качестве материалов в работе использованы результаты теста сравнительной кинетики растворения двух серий препарата небиволола в дозировке 5 мг. Были использованы четыре модель-независимые методики оценки эквивалентности растворения лекарственных препаратов. Статистическая обработка данных выполнена с помощью программного обеспечения Microsoft Excel.

Результаты и обсуждение. В работе представлен практический пример использования четырех альтернативных модель-независимых методов оценки эквивалентности профиля высвобождения. Пример используется для иллюстрации предлагаемых пределов эквивалентности и статистической методологии. Также предложены различные походы к определению границ эквивалентности для оценки сходства профилей растворения действующего вещества.

Заключение. Согласно результатам теста сравнительной кинетики растворения двух серий препарата небиволола, показано, что применение фактора сходимости f₂ в качестве критерия оценки профилей растворения привело к ложно положительному результату. В таких случаях следует рассмотреть возможность применения альтернативных методов оценки эквивалентности профилей растворения, описанных в статье, или иных методов, представленных в научной литературе, с обоснованием их приемлемости в каждом конкретном случае.

Разработка и регистрация лекарственных средств. 2021;10(2):87-99. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2021-10-2-87-99. Статья опубликована: 25.05.2021.