Preview

Разработка и регистрация лекарственных средств

Расширенный поиск

Идентификация и количественное определение арбутина в траве ортилии однобокой (Orthilia secunda)

https://doi.org/10.33380/2305-2066-2021-10-4(1)-122-128

Полный текст:

Аннотация

Введение. Ортилия однобокая Orthilia secunda (L.) House (матка боровая) – многолетнее травянистое растение, произрастающее на территории Европы, Сибири, Малой и Средней Азии. Трава ортилии однобокой активно применяется в народной медицине в качестве диуретического, ранозаживляющего и противовоспалительного средства. Из литературных источников известно, что данное лекарственное растительное сырье (ЛРС) содержит флавоноиды, дубильные вещества, органические кислоты, витамины, а также простые фенолы и их производные (арбутин и гидрохинон). Наличие арбутина обуславливает высокие антиоксидантные и противовоспалительные свойства растения. Но применение ортилии однобокой в официнальной медицине ограничено ввиду отсутствия полной информации о химическом составе и критериев стандартизации данного вида ЛРС.

Цель. Идентификация и количественное определение арбутина хроматографическими методами в траве ортилии однобокой Orthilia secunda (L.) House, заготовленной в различных фитоценотических зонах.

Материалы и методы. Исследуемое ЛРС – трава ортилии однобокой – была заготовлена в различных эколого-фитоценотических зонах: в июле 2018 года заготовку производили в северной части Казахстана (р-н Кокшетау), в июле-августе 2019 года – в Пермском крае и в Тюменской области. Предварительную идентификацию арбутина и сопутствующих фенольных соединений – галловой кислоты и гидрохинона – осуществляли методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) на приборе CAMAG с УФ-кабинетом (пластины Merck HPTLC silica gel 60 F154, 20 × 10), полуавтоматический аппликатор Linomat 5 (нанесение проб). Пробы наносили в количестве 5 мкл извлечения и 20 мкл раствора стандартного образца (СО). Элюирование пластин осуществляли в автоматической камере CAMAG Automatic Developing Chamber (ADC2). Установка параметров и обработка результатов осуществлялась в программе VisionCATS. Количественное определение арбутина проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), которую осуществляли на приборе Prominence LC-20 (Shimadzu, Япония) по валидированной методике, приведенной в Европейской Фармакопее 10.0. Детектор диодноматричный SPD-M20A, колонка Intersil C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм) (Phenomenex, США). Обработку результатов проводили с помощью программы LabSolution. Идентификацию и количественное определение арбутина проводили в сравнении с стандартным раствором, который содержал стандартный образец арбутина (С = 0,025 мг/мл) и СО гидрохинона (С = 0,0125 мг/мл).

Результаты и обсуждение. ВЭТСХ-анализ позволил обнаружить арбутин и галловую кислоту – основной продукт гидролитического расщепления/предшественник биосинтеза танинов гидролизуемой группы – в траве ортилии однобокой из разных мест произрастания. ВЭЖХ-анализ демонстрирует различный хроматографический профиль травы ортилии, заготовленной в различных фитоценотических зонах. Однако во всех изучаемых объектах было подтверждено отсутствие гидрохинона и присутствие веществ, которые предположительно можно отнести к его производным, что подтверждается визуальным подобием спектров этих соединений и близостью экстремумов. Установлено, что арбутин не относится к маркерным (мажоритарным) соединениям ортилии. Его содержание невелико и достигает максимума (около 0,021 %) в траве ортилии однобокой, произрастающей на территории Казахстана, в то время как в траве ортилии, заготовленной на территории Пермского края арбутин идентифицирован не был. Из полученных данных следует, что наибольшее накопление арбутина происходит на территориях с более теплым и сухим климатом (северная часть Казахстана).

Заключение. ВЭТСХ анализ травы ортилии однобокой позволил идентифицировать арбутин и галловую кислоту (основной предшественник танинов гидролизуемой группы). Результаты ВЭЖХ-анализа травы ортилии, заготовленной в различных фитоценотических зонах, позволяют говорить о количественных различиях в содержании арбутина в зависимости от региона произрастания. Из данных эксперимента следует, что ортилия, произрастающая в северной части Казахстана накапливает максимальное (0,021 %) количество арбутина, в сравнении с образцами, заготовленными в РФ. При этом ортилия заготовленная в Пермском крае арбутин не накапливает. Не подтверждено (методами ВЭТСХ и ВЭЖХ) наличие гидрохинона, следовательно, говорить о гидролитическом расщеплении арбутина в процессе биосинтеза или сушки не обоснованно. Однако во всех изучаемых объектах присутствуют пики веществ со схожими гидрохинону спектральными характеристиками, что дает возможность предположить присутствие его дериватов. Следовательно, позиционировать арбутин в качестве маркерного соединения ортилии, заготовленной на территории РФ, и проводить стандартизацию сырья по данному соединению не целесообразно.

Об авторах

А. В. Лёзина
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Лёзина Алёна Владимировна

197376, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, лит. А



И. И. Тернинко
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

197376, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, лит. А



М. В. Крысько
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

197376, г. Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14, лит. А



Список литературы

1. Beatty G. E., Provan J. Comparative phylogeography of two related plant species with overlapping ranges in Europe, and the potential effects of climate change on their intraspecific genetic diversity. BMC Evolutionary Biology. 2011;11(1):29. DOI: 10.1186/1471-2148-11-29.

2. Устенова Г. О. Правила сбора, заготовки и хранения лекарственного растения ортилии однобокой (Orthilia secunda). Вестник КазНМУ. 2018;1:345–347.

3. Ботоева Е. А., Убеева И. П., Николаев С. М. Оценка фармакотерапевтической эффективности сухого экстракта ортилии однобокой. Acta Biomedica Scientifica. 2009;2:40–41.

4. Ботоева Е. А. О химико-фармакологической характеристике фитосредств, использованных для экспериментальной фармакотерапии повреждений матки. Вестник БГУ. Медицина и фармация. 2011;12:147–153.

5. Ломбоева С. С., Танхаева Л. М., Олейников Д. Н. Методика количественного определения суммарного содержания флавоноидов в надземной части ортилии однобокой (Orthilia secunda (L.) House). Химия растительного сырья. 2008;2:65–68.

6. Фадеева Н. И. Сравнительная оценка эффективности разных фитопрепаратов, содержащих ортилию однобокую (Orthília secúnda), в лечении хронического эндометрита. Бюллетень медицинской науки. 2017;7:43–46.

7. Kang S. H., Jeon Y. D., Cha J. Y. Antioxidant and skin-whitening effects of aerial part of Euphorbia supina Raf. Extract. BMC Complement Altern Med. 2018;18(1):256. DOI: 10.1186/s12906-018-2323-5.

8. Скибина А. А., Боков Д. О., Гравель И. В., Ермакова В. А., Самылина И. А. ВЭЖХ-анализ фенольного комплекса грудного сбора № 4 и сухого экстракта на его основе. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2019;8(2):98–102. DOI: 10.33380/2305-2066-2019-8-2-98-102.

9. Tada M., Kohno M., Niwano, Y. Alleviation effect of arbutin on oxidative stress generated through tyrosinase reaction with L-tyrosine and L-DOPA. BMC Biochemistry. 2014;15:23. DOI: 10.1186/1471-2091-15-23.

10. Mir H., Komi E. A. D., Pouramir M. The hepatoprotective effects of Pyrus biossieriana buhse leaf extract on tert-butyl hydroperoxide toxicity in HepG2 cell line. BMC Research Notes. 2021;14:298. DOI: 10.1186/s13104-021-05713-6.

11. Pandey B. P., Pradhan S. P., Adhikari K. Bergenia pacumbis from Nepal, an astonishing enzymes inhibitor. BMC Complementary Medicinal and Therapy. 2020;20:198. DOI: 10.1186/s12906-020-02989-2.

12. Liang K., Xu K., Bessarab D. Arbutin encapsulated micelles improved transdermal delivery and suppression of cellular melanin production. BMC Research Notes. 2016;9:254. DOI: 10.1186/s13104-016-2047-x.

13. Hong S. Y., Lansky E., Kang S. S. A review of pears (Pyrus spp.), ancient functional food for modern times. BMC Complementary Medicine and Therapy. 2021;21:219. DOI: 10.1186/s12906-021-03392-1.

14. Trill J., Simpson C., Webley F. Uva-ursi extract and ibuprofen as alternative treatments of adult female urinary tract infection (ATAFUTI): study protocol for a randomised controlled trial. Trials. 2017;18:421. DOI: 10.1186/s13063-017-2145-7.

15. Тринеева О. В., Сливкин А. И., Сафонова Е. Ф. Определение антиоксидантной активности извлечений из листьев крапивы двудомной различными методами. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(3):59–66. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-3-59-66.

16. Wang S., Fu C., Bilal M. Enhanced biosynthesis of arbutin by engineering shikimate pathway in Pseudomonas chlororaphis P3. Microbial Cell Factories. 2018;17:174. DOI: 10.1186/s12934-018-1022-8.

17. The European Pharmacopoeia (Ph. Eur.) 10th Edition. Available at: https://pheur.edqm.eu/home. Accessed: 18.08.2021.

18. Polouliakh N., Ludwig V., Meguro A., Kawagoe T., Heeb O., Mizuki N. Alpha-arbutin promotes wound healing by lowering ROS and upregulating insulin/igf-1 pathway in human dermal fibroblast. Frontiers of Physiology. 2020;4;11:586843. DOI: 10.3389/fphys.2020.586843.


Дополнительные файлы

1. Графический абстракт
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Посмотреть (59KB)    
Метаданные

Рецензия

Для цитирования:


Лёзина А.В., Тернинко И.И., Крысько М.В. Идентификация и количественное определение арбутина в траве ортилии однобокой (Orthilia secunda). Разработка и регистрация лекарственных средств. 2021;10(4):122-128. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2021-10-4(1)-122-128

For citation:


Lezina A.V., Terninko I.I., Krysko M.V. Identification and quantitative determination of arbutin in the herb of Orthilia secunda. Drug development & registration. 2021;10(4):122-128. (In Russ.) https://doi.org/10.33380/2305-2066-2021-10-4(1)-122-128

Просмотров: 504


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2305-2066 (Print)
ISSN 2658-5049 (Online)