Рекомендации по валидации методик автоматического подсчета жизнеспособных клеток (обзор)

Введение. Качество продуктов на основе жизнеспособных клеток (таких, как биомедицинские клеточные продукты и высокотехнологические лекарственные препараты) должно поддерживаться на протяжении всего цикла производства, чтобы гарантировать их эффективность и безопасность при использовании пациентами. Минимально необходимое количество жизнеспособных клеток является одним из критериев контроля качества при выпуске конечного продукта. Исследование посвящено анализу процесса валидации методик автоматического подсчета жизнеспособных клеток.

Текст. В рамках данного исследования были рассмотрены актуальные данные об особенностях валидации автоматических счетчиков клеток относительно ручного подсчета. Были определены основные проблемы при валидации. На основе научных и регуляторных источников были выделены ключевые параметры процесса валидации, методы их оценки, измерения и представления результатов. Был описан алгоритм валидации автоматического счетчика клеток, включающий шаги по подбору стандартных образцов, выбору количества экспериментальных точек, разработке дизайна эксперимента, математической оценке полученных результатов и определению критериев приемлемости.

Заключение. На основании изученных данных в работе представлены результаты в виде рекомендаций по валидации методик автоматического подсчета жизнеспособных клеток.

1. Fagète S., Steimer C., Girod P. A. Comparing two automated high throughput viable-cell counting systems for cell culture applications. Journal of biotechnology. 2019;305:23–26. DOI: 10.1016/j.jbiotec.2019.08.014.

2. Butler M., Spearman M. Cell counting and viability measurements. Animal Cell Biotechnology. 2007:205–222. DOI: 10.1007/978-1-59745-399-8_8.

3. Louis K. S., Siegel A. C. Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods. Methods in Molecular Biology. 2011;740:7–12. DOI: 10.1007/978-1-61779-108-6_2.

4. Cadena-Herrera D. Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated. Biotechnology Reports (Amsterdam). 2015;7:9–16. DOI: 10.1016/j.btre.2015.04.004.

5. Yurgel’ N. V., Mladentseva A. L., Bourdain A. V., editors. Guidance on the validation of methods for the analysis of medicinal products. Moscow: Association of Russian Pharmaceutical Manufacturers; 2007. 48 p. (In Russ.)

6. Bottová I., Lee L. Validation study of the Vi-CELL XR for dendritic cell counting. BioProcessing Journal. 2014;13(3):32–37. DOI: 10.12665/J133.BottovaLee.

7. Huang L. C. Validation of cell density and viability assays using Cedex automated cell counter. Biologicals. 2010;38(3):393–400. DOI: 10.1016/j.biologicals.2010.01.009.

8. Hsiung F. Comparison of Count Reproducibility, Accuracy, and Time to Results between a Hemocytometer and the TC20 Automated Cell Counter. Bulletin 6003 Rev. B. 2013:1–4.

9. Solov’eva A. M., Aleksandrova S. A. Evaluation of readings of an automated cell counter. Tsitologiya. 2020;62(7):522–532. (In Russ.) DOI: 10.31857/S0041377120070056.

10. Glantz A. S. Biomedical statistics. М.: Praktika; 1998. 459 p. (In Russ.)