Разработка и аттестация стандартного образца надропарина кальция

Введение. Известно широкое применение препаратов гепарина для лечения и профилактики венозных тромбоэмболических осложнений. Одним из препаратов низкомолекулярного гепарина, успешно применяемых в клинической практике, является надропарин кальция. Современный подход к оценке качества лекарственных препаратов предполагает использование эталонов, в сравнении с которыми осуществляется контроль качества лекарственного средства – стандартных образцов (СО). Важнейшим специфичным параметром при оценке подлинности низкомолекулярных гепаринов является характеристика фракционного состава.

Цель. Целью работы являлась разработка, аттестация и определение стабильности в течение срока годности вторичного стандартного образца для определения подлинности надропарина кальция в рамках совершенствования системы контроля качества предприятия с перспективой создания отечественного фармакопейного стандартного образца.

Материалы и методы. Объектом разработки и аттестации являлся стандартный образец предприятия – низкомолекулярный гепарин, полученный на базе ОПУ ЦВТ ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России. Аттестуемый стандартный образец получали очисткой надропарина кальция методом твердофазной экстракции. Полноту очистки подтверждали сравнением хроматограмм очищенных образцов с хроматограммами международного стандартного образца. Характеристики молекулярно-массового распределения определяли хроматографически. Стабильность аттестуемого СОП (стандартный образец предприятия) изучали при двух условиях хранения – при температуре ниже 8 °C в сухом состоянии в течение 16 месяцев и в растворе при температуре –40 °C в течение 6 месяцев – путем оценки трендов молекулярно-массового распределения.

Результаты и обсуждение. Для каждой серии аттестуемого стандартного образца в двух параллельных определениях рассчитаны молекулярная масса и молекулярно-массовые характеристики, представлена репрезентативная хроматограмма. Значения относительного стандартного отклонения молекулярной массы образцов и содержания контролируемых фракций не превышало 2,5 %. Детальный анализ молекулярно-массового распределения показал «классическую» зависимость RSD (относительное стандартное отклонение) от величины среднего со значительным увеличением до 30 % при малых значениях доли фракции (менее 0,5 %). Установлено, что в течение 16 месяцев при температуре хранения ниже 8 °C молекулярная масса и молекулярно-массовые характеристики стандартных образцов низкомолекулярного гепарина значимо не изменяются. Однако в растворе СОП при температуре хранения –40 °C в течение 6 месяцев деградировали более чем на 10 %.

Заключение. По результатам исследования разработан протокол получения стандартного образца предприятия низкомолекулярного гепарина для стандартизации субстанции надропарина кальция по показателю «молекулярно-массовое распределение». Установленный срок хранения образца – не менее 16 месяцев при температуре ниже 8 °C. Показана стабильность растворов стандартного образца при температуре хранения –40 °C в течение 3 месяцев.

1. Chen N., Zhou M., Dong X., Qu J., Gong F., Han Y., Qiu Y., Wang J., Liu Y., Wei Y., Xia J., Yu T., Zhang X., Zhang L. Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan, China: a descriptive study. Lancet. 2020;395(10223):507–513. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)30211-7.

2. Нарделли П., Ландони Д. COVID-19-ассоциированный тромбовоспалительный статус: гипотеза MicroCLOTS и ее перспективы. Общая реаниматология. 2020;16(3):14–15. DOI: 10.15360/1813-9779-2020-3-0-2.

3. Fox S. E., Akmatbekov A., Harbert J. L., Li G., Brown J. Q., Vander Heide R. S. Pulmonary and cardiac pathology in African American patients with COVID-19: an autopsy series from New Orleans. The Lancet Respiratory Medicine. 2020;8(7):681–686. DOI: 10.1016/S2213-2600(20)30243-5.

4. Lazrak H. H., René É., Elftouh N., Leblanc M., Lafrance J.-P. Safety of low-molecular-weight heparin compared to unfractionated heparin in hemodialysis: a systematic review and meta-analysis. BMC Nephrology. 2017;18:187. DOI: 10.1186/s12882-017-0596-4.

5. Браилова Н. В., Дудинская Е. Н., Кузнецова В. А., Ткачева О. Н. Остеопороз и антитромботическая терапия. Российский кардиологический журнал. 2021;26(5):176–182. DOI: 10.15829/1560-4071-2021-4173.

6. Богачев В. Ю., Болдин Б. В., Родионов С. В. Низкомолекулярные гепарины во флебологической практике: в фокусе парнапарин. Лечебное дело. 2019;2:80–89. DOI: 10.24411/2071-5315-2019-12116.

7. Чупрова А. В., Лоскутова С. А., Шмаков А. Н. Контролируемая антикоагулянтная терапия в педиатрии. Педиатрия. 2004;2:52–57.

8. Huhle G., Geberth M., Hoffmann U., Heene D. L., Harenberg J. Management of heparin-associated thrombocytopenia in pregnancy with subcutaneous r-hirudin. Gynecologic and Obstetric Investigation. 2000;49(1):67–69. DOI: 10.1159/000010216.

9. Кумыкова З. Х. Применение Фраксипарина во время планирования и ведения беременности при привычном невынашивании. Акушерство и гинекология: Новости. Мнения. Обучения. 2015;4(10):77–80.

10. Cosmi B. Management of idiopathic venous thromboembolism. Expert Review of Cardiovascular Therapy. 2016;14(12):1371–1384. DOI: 10.1080/14779072.2016.1248406.

11. Грачева И. Л., Казакова И. А. Клинические аспекты применения надропарина кальция в терапии хронического пиелонефрита. Вестник современной клинической медицины. 2010;3(1):48–49.

12. Шмаков А. Н., Бударова К. В., Елизарьева Н. Л., Кохно В. Н. Место низкомолекулярных гепаринов в интенсивной терапии печеночной недостаточности. Сибирский научный медицинский журнал. 2020;40(1):110-114.

13. Щепочкина О. Ю., Гегечкори В. И., Прокофьева В. И., Чепило Д. А., Левко А. А., Чадова Н. Н., Шестаков В. Н. Современные подходы к разработке стандартных образцов лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2020;54(7):49–54. DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-7-49-54.