Влияние in vitro на параметры фибринолиза водных экстрактов грибов, произрастающих на древесных растениях

Введение. В составе экстрактов грибов присутствуют соединения, представляющие интерес как источник новых активных фармацевтических субстанций, обладающих антитромботическим действием.

Цель. Цель работы – определение потенциальной антитромботической активности in vitro водных экстрактов грибов, произрастающих на древесных растениях: шиитаке (Lentinula edodes); чешуйчатки обыкновенной (Pholiota squarrosa); опят различных видов – зимних (Flammulina velutipes (Curtis) Signer), летних (Kuehneromyces mutabilis), луковичноногих (Armillaria cepistipes), северных (Armillaria borealis), серопластинчатых (Hypholoma capnoides); лентинеллуса уховидного (Lentinellus cochleatus), вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus).

Материалы и методы. Изучение плазминоген-активаторных свойств тестируемых экстрактов, оценку их влияния на активность фермента системы фибринолиза альфа-2-антиплазмина, фибринолитическую активность плазмы крови, а также на концентрацию фибриногена проводили с использованием наборов реагентов НПО «РЕНАМ» и ООО Фирма «Технология-Стандарт» (Россия).

Результаты и обсуждение. Водный экстракт L. edodes и его фракции (водная, солевая и щелочерастворимая), выделенные с использованием сорбента диэтиламиноэтилцеллюлозы, демонстрируют выраженную антитромботическую активность, оказывая влияние в разной степени на все изученные параметры фибринолиза. Водные экстракты шляпок и ножек P. squarrosa, K. mutabilis и F. velutipes и фракции из этих экстрактов также проявляют антитромботическую (фибринолитическую) активность in vitro, оказывая статистически значимое влияние на различные параметры фибринолиза. Для водного экстракта L. cochleatus отмечено менее выраженное действие на параметры фибринолиза по сравнению с вышеперечисленными образцами. Экстракты плодовых тел A. cepistipes, A. borealis, H. capnoides, P. ostreatus не оказывают влияния на параметры фибринолиза и концентрацию фибриногена.

Заключение. Полученные данные позволяют рекомендовать экстракты из грибов L. edodes, P. squarrosa, K. mutabilis и F. velutipes для дальнейшего изучения с целью разработки функциональных пищевых добавок для коррекции сердечно-сосудистых заболеваний или для создания антитромботических лекарственных средств.

1. Жалялов А. С., Баландина А. Н., Купраш А. Д., Шривастава А., Шибеко А. М. Современные представления о системе фибринолиза и методах диагностики ее нарушений. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2017;16(1):69–82. DOI: 10.24287/1726-1708-2017-16-1-69-82.

2. Cesarman-Maus G., Hajjar K. A. Molecular mechanisms of fibrinolysis. British Journal of Haematology. 2005;129(3):307–321. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2005.05444.x.

3. Carpenter S. L., Mathew P. Alpha2-antiplasmin and its deficiency: fibrinolysis out of balance. Haemophilia. 2008;14(6):1250–1254.

4. Литвинов Р. И. Молекулярные механизмы и клиническое значение фибринолиза. Казанский медицинский журнал. 2013;94(5):711–718.

5. Денисова Н. П. Тромболитические свойства ферментов базидиальных грибов. Проблемы медицинской микологии. 2009;11(4):3–9.

6. Park S.-E., Li M.-H., Kim J.-S., Sapkota K., Kim J.-E., Choi B.-S., Yoon Y.-H, Lee J.-C., Lee H.-H., Kim C.-S., Kim S.-J. Purification and characterization of a fibrinolytic protease from a culture supernatant of Flammulina velutipes mycelia. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 2007;71(9):2214–2222. DOI: 10.1271/bbb.70193.

7. Kim J.-H., Lee E.-J., Seok S.-J. Fibrinolytic and α-Glucosidase Inhibitory Activities of Wild Mushroom Methanol Extracts. The Korean Journal of Mycology. 2007;35(2):128–132. DOI: 10.4489/KJM.2007.35.2.128.

8. Lee S.-Y., Kim J.-S., Kim J.-E., Sapkota K., Shen M.-H., Kim S., Chun H.-S., Yoo J.-C., Choi H.-S., Kim M.-K., Kim S.-J. Purification and characterization of fibrinolytic enzyme from cultured mycelia of Armillaria mellea. Protein Expression and Purification. 2005;43(1):10–7. DOI: 10.1016/j.pep.2005.05.004.

9. Choi J.-H., Kim S. Fibrinolytic and Thrombolytic Effects of an Enzyme Purified from the Fruiting Bodies of Boletus pseudocalopus (Agaricomycetes) from Korea. International Journal of Medicinal Mushrooms. 2021;23(4):47–57. DOI: 10.1615/IntJMedMushrooms.2021037957.

10. Islam M. R., Uddin Pk M. M. In vitro Doses and Incubations Dependent Thrombolytic Potential Study of Edible Mushrooms Pleurotus ostreatus, Ganoderma lucidum and Lentinula edodes Available in Bangladesh. Journal of Pharmaceutical Research International. 2015;7(1): 44–51. DOI: 10.9734/BJPR/2015/18227.

11. Denisova N. P. History of the Study of Thrombolytic and Fibrinolytic Enzymes of Higher Basidiomycetes Mushrooms at the V.L. Komarov Botanical Institute in Saint Petersburg, Russia. International Journal of Medicinal Mushrooms. 2010;12(3):317–325. DOI: 10.1615/IntJMedMushr.v12.i3.110.

12. Шаркова Т. С., Кураков А. В., Осмоловский А. А., Матвеева Э. О., Крейер В. Г., Баранова Н. А., Егоров Н. С. Скрининг продуцентов протеиназ с фибринолитической и коллагенолитической активностями среди микромицетов. Микробиология. 2015;84(3):316–322. DOI: 10.7868/S0026365615030180.

13. Попова Е. А., Осмоловский А. А., Крейер В. Г., Котова И. Б., Егоров Н. С. Продукция штаммом Aspergillus ustus протеиназ, высокоактивных в отношении фибриллярных белков. Микология и фитопатология. 2019;53(4):229–235.

14. Осмоловский А. А., Орехова А. В., Конти Э., Крейер В. Г., Баранова Н. А., Егоров Н. С. Получение и стабильность комплексного препарата протеиназ Aspergillus ochraceus L-1 с фибринолитической и антикоагулянтной активностью. Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. 2020;75(3):158–163.

15. Шамцян М. М., Петрищев Н. Н., Денисова Н. П., Чефу С. Г., Васина Е. Ю, Тозик Е. В., Колесников Б. А. Ферментный препарат тромболитического и фибринолитического действия из базидиального гриба рода Coprinus. Патент RU2435848C1. 2010. Доступно по: https://patenton.ru/patent/RU2435848C1. Ссылка активна на 01.12.2023.

16. Ву А. Х. Б., ред. Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам. М.: Лабора; 2013. 1380 с.

17. Баркаган З. С., Момот А. П. Диагностика и контролируемая терапия нарушения гемостаза. М.: Ньюдиамед; 2008. 292 с.

18. Gong P., Wang S., Liu M., Chen F., Yang W., Chang X., Liu N., Zhao Y., Jing Wang, Chen X., Extraction methods, chemical characterizations and biological activities of mushroom polysaccharides: A mini-review. Carbohydrate Research. 2020;494. DOI: 10.1016/j.carres.2020.1080.

19. Villares A., Mateo-Vivaracho L., Guillamón E. Structural Features and Healthy Properties of Polysaccharides Occurring in Mushrooms. Agriculture. 2012;2(4):452–471. DOI: 10.3390/agriculture2040452.

20. Кузнецова Т. А. Антикоагулянтная и антитромботическая активность сульфатированных полисахаридов морских водорослей. Тромбоз, гемостаз и реология. 2020;(2):53–59. DOI: 10.25555/THR.2020.2.0918.

21. Yoon S.-J., Yu M.-A., Pyun Y.-R., Hwang J.-K., Djong-Chi Ch.-D., Juneja L. R.,Paulo A. S., Mourão P. A. S. The nontoxic mushroom Auricularia auricula contains a polysaccharide with anticoagulant activity mediated by antithrombin. Thrombosis Research. 2003;112(3):151–158. DOI: 10.1016/j.thromres.2003.10.022.

22. Huang X., Nie S. The structure of mushroom polysaccharides and their beneficial role in health. Food Funct. 2015;6(10):3205–3217. DOI: 10.1039/c5fo00678c.

23. Lin H., Xu L., Yu S., Hong W., Huang M., Xu P. Therapeutics targeting the fibrinolytic system. Experimental & Molecular Medicine. 2020;52:367–379. DOI: 10.1038/s12276-020-0397-x.

24. Collen D., de Maeyer L. Molecular biology of human plasminogen. I. Physiochemical properties and microheterogeneity. Thrombosis et Diathesis Haemorrhagica. 1975;34(2):396–402.

25. Brandt J. T. Plasminogen and tissue-type plasminogen activator deficiency as risk factors for thromboembolic disease. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 2002;126(11):1376–1381 DOI: 10.5858/2002-126-1376-PATTPA.

26. Mandle R. J., Kaplan A. P. Hageman-factor-dependent fibrinolysis: generation of fibrinolytic activity by the interaction of human activated factor XI and plasminogen. Blood. 1979;54(4):850–862.

27. Mast A. E., Enghild J. J., Pizzo S. V., Salvesen G. Analysis of the plasma elimination kinetics and conformational stabilities of native, proteinase-complexed and reactive site cleaved serpins: comparison of .alpha.1-proteinase inhibitor, .alpha.1-antichymotrypsin, antithrombin III, .alpha.2-antiplasmin, angiotensinogen, and ovalbumin. Biochemistry. 1991;30(6):1723–1730. DOI: 10.1021/bi00220a039.

28. Cannon C. P., McCabe C. H., Gibson C. M., Ghali M., Sequeira R. F., McKendall G. R., Breed J., Modi N. B., Fox N. L., Tracy R. P., Love T. W., Braunwald E. TNK-tissue plasminogen activator in acute myocardial infarction. Results of the Thrombolysis in Myocardial Infarction (TIMI) 10A dose-ranging trial. Circulation. 1997;95(2):351–356. DOI: 10.1161/01.cir.95.2.351.

29. Collen D. On the regulation and control of fibrinolysis. Edward Kowalski Memorial Lecture. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 1980;43(2):77–89.