Изучение экскреции нового производного 4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксамида

Введение. Новый селективный ингибитор PAR-2-рецепторов, 3-(2-бутил-5-хлоро-1Н-имидазол-4-ил)-N-[4-метокси-3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-карбоксамид (R004), находится на стадии доклинического исследования. Изучение экскреции R004 и его метаболитов ранее не проводилось.

Цель. Изучение экскреции R004 и его метаболитов с мочой и калом после однократного перорального и внутрибрюшинного введения субстанции.

Материалы и методы. Исследование проводилось на 2 группах крыс линии Wistar по 6 особей. Первой группе субстанция R004 вводилась перорально в дозировке 10 мг/кг, второй группе – внутрибрюшинно в дозировке 10 мг/кг. Забор биоматериала проводился с помощью метаболических клеток. Пробы мочи отбирались до введения препарата и в промежутки 0–4, 4–8, 8–12, 12–24, 24–48, 48–72, 72–96, 96–120 ч после введения. Пробы фекалий отбирались до введения препарата и в промежутки 0–12, 12–24, 24–48, 48–72, 72–96, 96–120 ч. Анализ образцов проводился с помощью ВЭЖХ-МС/МС.

Результаты и обсуждение. Аналитический диапазон методики определения R004 и 4-метокси-3-(трифторметил)-анилина (М2) в моче составил 5–2000 нг/мл, а 3-(2-бутил-5-хлоро-1Н-имидазол-4-ил)-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-карбоновой кислоты (М1) – 100–40 000 нг/мл. В фекалиях концентрации R004 измеряли в диапазоне 0,5–500,0 мкг/г, M1 – 4–4000 нг/г, М2 – 40–40 000 нг/г. Основная часть лекарственного средства и метаболитов выводится в течение 48 ч после введения. Полная элиминация достигается спустя 96 ч. R004 экскретируется в неизменном виде только с фекалиями: 94,83 ± 0,78 % при пероральном введении и 57,63 ± 0,66 % при внутрибюшинном введении (М + m). Метаболит М1 выводится преимущественно ренальным путём, метаболит М2 – преимущественно через кишечник.

Заключение. Биоаналитические методики определения R004, М1 и M2 в моче и кале были успешно валидированы. Большая часть R004 экскретируется в неизменённом виде энтеральным путем. М1 выводится преимущественно с мочой, М2 – с фекалиями.

1. Korsakov M. K., Fedorov V. N., Smirnov N. A., Shetnev A. A., Leonova O. V., Volkhin N. N., Andreyev A. I. Screening of anti-inflammatory activity of 4.5-dihydroisoxazol-5-carboxamide (PAR-2 inhibitors) based on formaldehyde oedema model among white lab rats. Research Results in Pharmacology. 2023;9(4):105–111. DOI: 10.18413/rrpharmacology.9.10061.

2. Khokhlov A. L., Yaichkov I. I., Alexeev M. A., Korsakov M. K., Shetnev A. A., Ivanovskiy S. A., Volkhin N. N., Petukhov S. S., Vasilyeva E. A. Identification and synthesis of metabolites of the new 4.5-dihydroisoxazol-5-carboxamide derivate. Research Results in Pharmacology. 2024;10(2):83–95. DOI: 10.18413/rrpharmacology.10.482.

3. Yaichkov I. I., Korsakov M. K., Volkhin N. N., Petukhov S. S., Tyushina A. N., Zaykova V. E., Lasaraynz O. E. Pharmacokinetic study of a new 4,5-dihydroisoxazole-5-carboxamide derivative in rats. Drug development & registration. 2024;13(4):238–250. (In Russ.) DOI: 10.33380/2305-2066-2024-13-4-1876.

4. Letertre M. P. M., Munjoma N., Wolfer K., Pechlivanis A., McDonald J. A. K.,. Hardwick R. N, Cherrington N. J., Coen M., Nicholson J. K., Hoyles L., Swann J. R., Wilson I. D. A Two-Way Interaction between Methotrexate and the Gut Microbiota of Male Sprague−Dawley Rats. Journal of Proteome Research. 2020;19(8):3326−3339. DOI: 10.1021/acs.jproteome.0c00230.

5. Šturm S., Škibin A., Pogačnik M., Cerkvenik-Flajs V. Determination of free and total bisphenol A in the urine and feces of orally and subcutaneously dosed sheep by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. Journal of Environmental Science and Health, Part B. 2020;55(7):655–668. DOI: 10.1080/03601234.2020.1759329.

6. Ma C., Li D., Dang R., Gu Y., Li A., Zhao Y., Qi F., Liu J. Metabolism, pharmacokinetics, and bioavailability of yuanhuacine in rat using LC-MS. Biomedical Chromatography. 2023;37(2):e5540. DOI: 10.1002/bmc.5540.

7. Qiu J., Zhu M., Wang Y., Chen B., Bai R., Chen F., Li Y., Zhou Y., Zhang L. Pharmacokinetic and excretion study of eight active constituents in rat by LC-MS/MS after oral administration of the Toddalia asiatica extract. Analytical Biochemistry. 2022;640:114407. DOI: 10.1016/j.ab.2021.114407.

8. Song C. H., Kim K., Kang E., Jeong B., Lee M.-S., Jung J., Kim T. H., Shin S., Shin B. S. Determination of pharmacokinetics and tissue distribution of a novel lutetium-labeled PSMA-targeted ligand, ¹⁷⁷Lu-DOTA-PSMA-GUL, in rats by using LC–MS/MS. Scientific Reports. 2022;12(1):15452. DOI: 10.1038/s41598-022-19700-9.