Валидация методики определения микропримесей ртути в протамине сульфата методом инверсионной вольтамперометрии

Введение. В статье представлены результаты валидации разработанной нами методики – инверсионной вольтамперометрии (ИВА) по определению примеси ртути в лекарственном препарате протамина сульфат. Оценили показатели правильности и прецизионности (сходимость, внутрилабораторная прецизионность), специфичности и определили предел количественного определения (ПКО). Для подтверждения правильности и специфичности результатов методики ИВА было определено содержание ртути в протамине сульфата следующими методами: атомно-адсорбционной спектроскопией (ААС), рентгенфлуоресцентной спектрометрией (РФС) и фармакопейным методом, согласно Европейской фармакопеи.

Цель. Валидация разработанной нами методики (метод инверсионной вольтамперометрии) определения микропримеси ртути в протамине сульфата.

Материалы и методы. Протамина сульфат раствор для инъекций 10 мг/мл (производитель – ОАО «Новосибхимфарм», г. Новосибирск, Россия) был взят в качестве объекта исследования. Методика инверсионной вольтамперометрии была разработана на полуавтоматическом анализаторе ТА-4 (ООО НПП «Томьаналит», г. Томск) с программным обеспечением VALabТх в комплекте. Атомно-адсорбционная спектроскопия была выполнена в институте неорганической химии им. А. В. Николаева (ИНХ СО РАН). Рентген – флуоресцентный анализ выполнен на базе ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный университет». Определение ртути фармакопейным методом проводили совместно с ОАО «Новосибхимфарм».

Результаты и обсуждение. Провели валидацию разработанной методики на правильность и повторяемость. Повторяемость оценивали по 10-ти измерениям, коэффициент вариации составил 7,8. Провели проверку внутрилабораторной прецизионности по 6-ти измерениям, коэффициент вариации составил 7,9 и 7,4 у аналитика № 1 и аналитика № 2 соответственно. Согласно нашей методики содержание ртути в протамине сульфата составляет 0,03 ppm. Сравнили результаты с другими методами определения ртути в органических объектах. При определении ртути методом ААС результат получился ≤0,5 ppm, при РФС – 0,1 ppm. Результаты фармакопейного метода нельзя считать достоверными ввиду отсутствия повторяемости и воспроизводимости.

Заключение. Провели валидацию разработанной нами ранее методики определения примеси ртути в протамине сульфата методом инверсионной вольтамперометрии. Результаты нашей методики сопоставимы с результатами других методов анализа, таких как ААС и РФС. Разработанная нами методика может быть использована для контроля качества этого лекарственного препарата.

1. Беляев В. А., Федота Н. В., Горчаков Э. В. Фармацевтическая химия. Учебно-методическое пособие. АГРУС. 2013: 33.

2. Человек и среда его обитания. Хрестоматия. В. С. Петросян автор главы: ртуть и ее соединения в окружающей среде. Мир. 2003: 282–290.

3. European Pharmacopoeia 8.0. Available at: https://archive.org/stream/EuropeanPharmacopoeia80/European-Pharmacopoeia-8-0#page/n6/mode/2up.

4. Eirin-Lopez J. M., Lewis J. D., Howe I. A., Ausio J. Common phylogenetic origin of protamine-like (PL) proteins and histone H1: Evidence from bivalve PL genes. Mol Biol Evol. 2006; 23: 1304–1317.

5. Van Den Bussche R. A., Hoofer S. R., Hansen E. W. Characterization and phylogenetic utility of the mammalian protamine P1 gene. Mol Phylogenetics Evol. 2002, 22: 333–341.

6. Костенко Е. Е., Штокало М. И. Твердофазная спектрофотометрия – эффективный метод определения тяжелых металлов в пищевых объектах. РЖ 19ГД. Аналитическая химия. Оборудование лабораторий. 2005; 59(13): 1276–1282.

7. Спирова С. Н. Исследование содержания примесных элементов (кадмий, свинец, ртуть) в лекарственных средствах и сырье природного происхождения. Автореферат дис. ... канд. фарм. н.: 15.00.02. 1995: 24.

8. van Sprang H. A. Fundamental parameter methods in XRF spectroscopy. Advances in X-ray Analysis. 2000; 42.

9. Государственная фармакопея российской Федерации. Т. I. МЗСР РФ. 13-е изд. Научный центр экспертизы средств медицинского применения. 2015: 1470.