Определение антиоксидантной активности извлечений из листьев крапивы двудомной различными методами

Введение. В последнее время первичной оценке фармакологического эффекта различных препаратов с использованием тестов in vivo и in vitro в литературе уделяется большое внимание. Постоянно растет интерес к определению антиоксидантной активности (АОА) лекарственных препаратов, в том числе фитопрепаратов, лекарственного растительного сырья и входящих в их состав биологически активных веществ. Известно, что такое официннальное лекарственное растение, как крапива двудомная, по своему фитохимическому составу богата природными антиоксидантами: флавоноиды, каротиноиды, аскорбиновая кислота и др. В отдельных публикациях имеются сведения об антиоксидантной активности листьев крапивы и препаратов на ее основе. Однако, информации о сравнительной характеристике применения различных методов для определения антиоксидантной активности данного вида лекарственного растительного сырья и полученных результатов, в научной литературе не обнаружено.

Цель. Целью настоящей работы являлось сравнительное определение антиоксидантной активности лекарственного растительного сырья крапивы двудомной различными методами.

Материалы и методы. Объектом исследования являлось готовое измельченное сырье листьев крапивы двудомной (Folia Urticae) в фильтр-пакетах, выпускаемое отечественным производителем. АОА водных и водно-спиртовых извлечений определяли титриметрически по методике, разработанной Т. В. Максимовой с соавторами; по способности ингибировать аутоокисление адреналина in vitro. Культура клеток Paramecium caudatum была также использована в качестве биологической модели для определения антиоксидантного действия водных извлечений из изучаемого сырья на живую клетку. Определение качественного и количественного состава фенольных АО проводили методом ВЭЖХ-ДМД-МС.

Результаты и обсуждение. Определена суммарная антиоксидантная активность водных и водно-спиртовых извлечений из листьев крапивы двудомной с использованием различных методик, рекомендуемых в литературе. Исследовано влияние полярности экстрагента на величину антиоксидантной активности и выявлена обратно пропорциональная зависимость. Установлено, что наибольшее содержание антиоксидантов в извлечении наблюдается при использовании 96 % этанола в качестве экстрагента. Оценку антиоксидантного действия исследуемого объекта биологическим методом проводили в соответствии со значениями индекса биологической активности. ВЭЖХ-ДМД-МС анализ водно-метанольного извлечения из листьев крапивы показал присутствие 17 веществ - представителей группы фенольных соединений.

Заключение. При помощи четырех независимых методов показана перспективность использования листьев крапивы двудомной и препаратов на ее основе в качестве источника АО. Полученные данные, несомненно, открывают новые возможности применения давно известного растения и подтверждают целесообразность и перспективность его использования для получения новых лекарственных форм.

1. Копытько Я. Ф., Лапинская Е. С., Сокольская Т. А. Применение, химический состав и стандартизация сырья и препаратов Urtica (обзор). Химико-фармацевтический журнал. 2011;45(10):32-40.

2. Дмитрука С. Е., ред. Лекарственные растения, сырье и фитопрепараты. Томск: СибГМУ. 2004; Ч. 1: 116.

3. Gulsina I. О., Kufrevio’glua I., Oktayb M., Buyukokuroglu M. E. Antioxidant, antimicrobial, antiulcer and analgesic activities of Nettle (Urtica dioica L.). Journal of Ethnopharmacology. 2004;90:205-215.

4. Maaroufi L., Hossain M. S., Wiem Tahri, Landoulsi A. New insights of Nettle (Urtica urens): Antioxidant and antimicrobial activities. J. Med. Plants Res. 2017;11(4):73-86.

5. Knezevic V., Pezo L. L., Loncar B. Lj., Filipovic V. S., Nicetin M. R., Gorjanovic S. Z., Suput D. Antioxidant Capacity of Nettle Leaves During Osmotic Treatment. Periodica Polytechnica Chemical Engineering. 2019;63(3):491 -498.

6. Ghaima K. K., Hashim N. M., Ali S. A. Antibacterial and antioxidant activities of ethyl acetate extract of nettle (Urtica dioica) and dandelion (Taraxacum officinale). Journal of Applied Pharmaceutical Science. 2013;3(05):96-99.

7. Тринеева О. В. Теоретические и методологические подходы к стандартизации и оценке качества лекарственного растительного сырья и масляных экстрактов на его основе. Дис. ... д. фарм. н. 2017. 441 с.

8. Тринеева О. В., Сафонова Е. Ф., Воропаева С. С., Сливкин А. И. Антиоксидантная активность водно-спиртовых извлечений листьев крапивы двудомной. Фармация. 2013;1:11-12.

9. Тринеева О. В., Сливкин А. И. Исследование мембраностабилизирующей, антиоксидантной и антитоксической активности водных извлечений из лекарственного растительного сырья (на примере плодов облепихи крушиновидной и листьев крапивы двудомной) на тест-системе Paramecium caudatum. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2016;1:165-169.

10. Тринеева О. В. Методы определения антиоксидантной активности объектов растительного и синтетического происхождения в фармации (обзор). Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017;4(21):180-197.

11. Кайшев А. Ш., Реккандт С. А., Кайшева Н. Ш., Челомбитько В. А. Антиоксидантная активность биокомпозиций на основе спиртовых отходов. Фармация. 2009;5:7-10.

12. Хайруллина В. Р., Гарифуллина Г. Г., Герчиков А. Я. Антиокислитель-ная активность экстрактов растений сем. Geranlaceae, Rosaceae на примере модельной реакции окисления изопропилового спирта. Химико-фармацевтический журнал. 2005;3:28-30.

13. Хасанов В. В. Рыжова Г. Л., Мальцева Е. В. Методы исследования антиоксидантов. Химия растительного сырья. 2004;3:63-75.

14. Лапин А. А., Борисенков М. Ф., Карманов А. П., Бердник И. В., Кочева Л. С., Мусин Р. З., Магдеев И. М. Антиоксидантные свойства продуктов растительного происхождения. Химия растительного сырья. 2007;2:79-83.

15. Самусенко А. Л. Исследование антиоксидантной активности эфирных масел лимона, розового грейпфрута, кориандра, гвоздики и их смесей методом капиллярной газовой хроматографии. Химия растительного сырья. 2011;3:107-112.

16. Конкина И. Г., Грабовский С. А., Муринов Ю. И., Кабальнова Н. Н. Сравнительная оценка реакционной способности кверцетина и дигидрокверцетина по отношению к пероксильным радикалам. Химия растительного сырья. 2011;3:207-208.

17. Огай М. А., Степанова Э. Ф., Холодов Д. Б., Николаевский В. А. Антиоксидантный и мембраностабилизирующий эффект таурина. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2011;1:186-191.

18. Шадрин И. А. Токсикологический анализ некоторых кормов по реакции выживаемости инфузории Paramecium caudatum. Вестник Красноярского государственного аграрного университета. 2008;2:128-134.

19. Хасанова С. Р., Плеханова Т. И., Гашимова Д. Т., Галиахметова Э. Х., Клыш Е. А. Сравнительное изучение антиоксидантной активности растительных сборов. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2007;1: 163-166.

20. Максимова Т. В., Никулина И. Н., Пахомов В. П. и др. Способ определения антиокислительной активности. Номер патента: 2170930. Дата публикации: 20.07.2001 г. Заявитель(и) и патентообладатель: Московская медицинская академия им. И. М. Сеченова.

21. Рябинина Е. И., Зотова Е. Е., Ветрова Е. Н. и др. Новый подход в оценке антиоксидантной активности растительного сырья при исследовании процесса аутоокисления адреналина. Химия растительного сырья. 2011;3:117-121.

22. Бузлама B. C. Способ отбора веществ - адаптогенов: Авт. свид. СССР № 9901189. 1982.

23. Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издание. М. 2015;2:1004. Available at: http://193.232.7.120/feml/clinical_ref/pharmacopoeia_1/HTML/.

24. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издание. М. 2018;4:7019. Available at: http://femb.ru/femb/pharmacopea. php.

25. Тринеева О. В., Перова И. Б., Сливкин А. И., Эллер К. И. Исследование состава фенольной фракции листьев крапивы двудомной. Биофармацевтический журнал. 2017;9(3):44-48.

26. Мальцева А. А., Чистякова А. С., Юрова Е. Ю. Антиоксидантная активность травы горца перечного, заготовленной в воронежской области. В сборнике: «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых физиологически активных веществ материалы 6-й Международной научно-методической конференции «Фармобразование-2016». ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет». 2016. 382-384 с.

27. Логвинова Е. Е. Исследование групп биологически активных веществ плодов рябины черноплодной различных сортов. Автореф. канд. фарм. н. М., 2017. 22 с.