Preview

Разработка и регистрация лекарственных средств

Расширенный поиск
Том 9, № 3 (2020)
Скачать выпуск PDF

ПОИСК И РАЗРАБОТКА НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

15-20 756
Аннотация

Введение. В последние годы во многих странах отмечается неуклонный рост гастроэнтерологических заболеваний, связанный с неблагоприятной экологической обстановкой и нерациональным питанием. Заболевания органов пищеварения имеет не только хронический, но и сочетанный характер, и в терапии широко используются разнообразные синтетические лекарственные средства Ассортимент официнальных многокомпонентных растительных сборов, рекомендуемых в терапии заболеваний пищеварительной системы, ограничен и особенно их недостаток ощущается при лечении хронического гепатита, язвенной болезни желудка, холецистита.

Цель. Поиск и создание новых многокомпонентных средств для профилактики и комплексного лечения заболеваний пищеварительной системы.

Материалы и методы. Объектами исследования служили разработанные многокомпонентные средства: «Пентафит», «Октафит», «Гексафит». Предложенные составы растительных композиций являются оригинальными, не имеющими аналогов и защищены патентами на изобретение. Для оценки фармакотерапевтического влияния разработанных средств гепатопротективная активность «Пентафита» изучена на экспериментальных моделях тетрахлорметанового и D-галактозаминового гепатитов крыс; гастропротективная активность «Октафита» изучена на моделях острой аспириновой, нейрогенной и хронической бутадионовой язв желудка крыс; желчегонная активность «Гексафита» изучена на моделях экспериментального холецистита и токсических повреждений печени с применением лабораторных животных. Результаты исследований обрабатывали статистически с использованием программы Statistica 10.

Результаты и обсуждение. На основании полученных данных выявлены общие закономерности в молекулярно-биологическом действии изучаемых многокомпонентных средств, заключающиеся в способности их ингибировать свободнорадикальное окисление липидов и стабилизировать биологические мембраны клеток желудка и органов гепатобилиарной системы. Среди изучаемых многокомпонентных средств в экспериментах на животных выгодно отличается «Пентафит» своим многосторонним характером влияния на функциональное состояние и структуру печени. «Октафит» обеспечивает ускоренное заживление и восстановление поврежденных структур функциональных систем желудка крыс. «Гексафит» выделяется поливалентным спектром действия при повреждениях гепатобилиарной системы лабораторных животных.

Заключение. Разработанные многокомпонентные препараты расширят реестр лекарственных средств растительного происхождения отечественного производства для профилактики и лечения заболеваний органов пищеварения.

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ

21-26 728
Аннотация

Введение. В ФГБУ «НМИЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России синтезировано оригинальное N-гликозидное производное индолокарбазола ЛХС-1269 с углеводным остатком ксилозы, характеризующееся высокой противоопухолевой активностью в отношении ряда перевиваемых асцитных и солидных опухолей в экспериментах in vivo. В связи с гидрофобными свойствами субстанции ЛХС-1269 для создания инъекционной лекарственной формы предложен метод ее солюбилизации путем инкапсулирования в фосфолипидные везикулы - липосомы.

Цель. Разработка состава модели липосомальной лекарственной формы для инъекционного введения производного индолокарбазола ЛХС-1269.

Материалы и методы. Субстанция ЛХС-1269 (ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России), яичный фосфатидилхолин (ФХ, Е РС S, Lipoid, Германия), холестерин >99 % (Sigma-Aldrich, Япония), полиэтиленгликоль-2000-дистеароилфосфатидилэтаноламина (ПЭГ-ДСФА, Lipoid, Германия). Для приготовления фосфолипидных везикул применяли метод гидратации липидной пленки с последующей фильтрацией и экструзией. Анализ полученных липосом проводили с использованием метода спектрофотометрии, лазерной спектроскопии рассеяния, метода определения электрофоретической подвижности частиц и вискозиметрии.

Результаты и обсуждение. На основе липидных компонентов и активной субстанции в различных молярных соотношениях составляли композиции и получали экспериментальные модели липосомальной дисперсии. Составы оценивали по эффективности включения ЛХС-1269 в липосомы и физико-химическим показателям - вязкость дисперсии, распределение везикул по размеру и их дзета-потенциал. В результате анализа 7 исследуемых составов были определены оптимальные молярные соотношения компонентовлекарственной формы -ЛХС-1269/ФХ 1:160 и ФХ/холестерин/ПЭГ-ДГФА 1:0,33:0,003. Использование данной композиции позволяет получить относительно стабильные (дзета-потенциал -33 мВ) однородные по размеру липосомы диаметром 190 нм с максимальным уровнем инкапсулирования активной субстанции 98 %.

Заключение. В результате проведенных технологических и химико-фармацевтических исследований разработан состав модели липосомальной лекарственной формы для инъекционного введения производного индолокарбазола ЛХС-1269.

28-35 628
Аннотация

Введение. Насыщаемые полимерные микросферы представляют собой одну из передовых разработок в области химиоэмболизации. В связи со сложным многоэтапным производством на российском рынке представлены в основном зарубежные производители данных изделий, что может свидетельствовать об актуальности изучения данной тематики.

Цель. Целью работы была разработка технологической схемы производства полимерных микросфер и описание критических контрольных точек производства.

Материалы и методы. Исследование полупродукта осуществлялось при помощи микроскопа Levenhuk D320L (Levenhuk Inc., США). Анализ контрольных точек производства проводился методом ХАССП (HACCP (Hazard analysis and critical control points).

Результаты и обсуждения. В результате исследования выявлены и описаны основные технологические стадии производства микросфер, представляющих собой сополимер винилового спирта и акрилата натрия. Для каждой технологической стадии определены контрольные критические точки с указанием контролируемых параметров и методов контроля. Приведены фотографии полупродукта на промежуточных стадиях.

Заключение. Разработана технологическая схема производства микросфер. Проведен анализ критических контрольных точек стадий основного процесса производства. Выявлены необратимые критические точки производства.

36-43 674
Аннотация
Введение. На сегодняшний день доказана возможность получения интерполимерных комплексов (ИПК) на основе полианионных типов полимеров Eudragit®, Carbopol®, пектина, каррагинана и альгинат натрия с поликатионами - Eudragit® EPO, Eudragit® RS/RL или хитозаном, стабилизированных, как известно, ионными типами связей. В то же время показана и возможность получения, а также перспективы использования ИПК на основе двух химически комплементарных сополимеров Eudragit®, в основе которых лежат не только электростатические, но и донорно-акцепторные типы взаимодействия. Доказано, что поликомплексы с участием сополимеров Eudragit® являются перспективными носителями для систем доставки (СД) активных фармацевтических ингредиентов (АФИ) в различные отделы желудочно-кишечного тракта (ЖКТ): ротовая полость (диспергируемые в полости рта и трансбуккальные СД), желудок (гастроретентивные СД), а также толстый кишечник (колон-специфичные СД).

Цель.
Исследование интерполимерных комплексов на основе пары сополимеров Eudragit® EPO и Eudragit® S100, полученных в среде различных органических растворителей [этилового спирта и смеси изопропанол-ацетон (в соотношении 60:40 по объему)] с позиции применения их в пероральных матричных системах доставки АФИ.

Материалы и методы. Синтез ИПК на основе сополимеров Eudragit® осуществляли в среде органических растворителей [этиловый спирт или смесь изопропанол-ацетон (в соотношении 60:40 по объему)]. Структурные особенности полученных поликомплексов оценивали методом ИК-спектроскопии на приборе Nicolet iS5 с приставкой однократного НПВО Smart iTR (Thermo Scientific, США) и дифференциальной сканирующей калориметрии с моделируемой температурой (мДСК) на приборе Discovery™ DSC (TA Instruments, США). Состав определяли с использованием метода элементного органического анализа на приборе Thermo Flash 2000 CHNS/O (Thermo Fisher Scientific, Великобритания). Набухающую способность матриц, полученных на основе синтезированных ИПК, оценивали в буферных средах со значениями рН, имитирующих рН различных отделов ЖКТ: 1,2; 5,8; 6,8 и 7,4. Оценка высвобождения теофиллина (ТФ) и диклофенака натрия (ДН) проводилась в течение 7 часов на приборе ERWEKA DFZ II «Проточная ячейка» (ERWEKA GmbH, Германия) в тех же буферных средах, имитирующих рН различных отделов ЖКТ, что и при изучении набухающей способности поликомплексных матриц.

Результаты и обсуждение. Все полученные ИПК характеризуются избытком Eudragit® S100 в своем составе. Полученные ИПК стабилизированы кооперативной системой ионных и водородных связей. ДСК-термограммы образцов ИПК характеризуются наличием единственной температуры стеклования (Тс), что подтверждает отсутствие в их составе примесей свободных сополимеров. При этом увеличение содержания Eudragit® S100 в составе ИПК приводит и к увеличению значений температур стеклования поликомплексов. Матрицы на основе ИПК-1 распались в течение первых 15 минут эксперимента в среде с рН 1,2, в то время как матрицы на основе остальных образцов ИПК сохраняют свою форму в течение 7 часов и характеризуются рН-независимым набуханием. Высвобождение ТФ из поликомплексных матриц является диффузионно-контролируемым и происходит в соответствии с законом Фика (ИПК-2, ИПК-4 и ИПК-6) или же может быть охарактеризовано как «аномальный транспорт» (ИПК-1, ИПК-3 и ИПК-5) и определяется контролируемо-набухающими способностями поликомплексных матриц. Высвобождение ДН, напротив, происходит по Super Case II транспортному механизму, что соответствует механизму поверхностной эрозии матриц.

Заключение. Полученные интерполимерные комплексы Eudragit® EPO/Eudragit® S100 являются перспективными носителями в матричных пероральных системах контролируемой доставки АФИ, обеспечивая пролонгированное высвобождение веществ I класса БКС (ТФ), зависящее от скорости диффузии АФИ из набухшей матрицы, и замедленное высвобождение веществ II класса БКС (ДН), контролируемое процессами поверхностной эрозии матрицы.
45-50 681
Аннотация

Введение. Развивающимся направлением современной фармацевтической технологии является поиск полимерных носителей для разработки микро- и наноразмерных систем доставки лекарственных средств. Актуальным вопросом при этом остаётся поиск эффективных методов для исследования высвобождения из такого рода систем.

Цель. Провести исследование высвобождения модельного лекарственного средства (ЛС) галоперидола из поликомплексных наночастиц, полученных на основе интерполиэлектролитных комплексов (ИПЭК) различными методами.

Материалы и методы. Получены ИПЭК в виде наночастиц на основе полимеров фармацевтического назначения (Eudragit® EPO и Eudragit® L100-55). Размер получаемых поликомплексных наночастиц измеряли методом динамического светорассеяния с помощью Zetasizer Nano-ZS (Malvern Instruments, Великобритания). Изучение высвобождения галоперидола было проведено в среде имитирующей назальную жидкость с использованием вертикальной диффузионной ячейки Франца (PermeGear, США), а также модифицированным методом USP IV на тестере растворения DFZ II «Проточная ячейка» (ERWEKA GMBH, Германия).

Результаты и их обсуждение. При использовании вертикальной диффузионной ячейки Франца, по прошествии практически 2,5 часов, наблюдается статистически значимое увеличение высвобождение галоперидола из поликомплексных наночастиц в сравнении с контролем (раствор галоперидола). В тоже время высвобождение ЛС с использованием метода «Проточной ячейки» (USP IV) осуществить не удалось, ввиду, по всей видимости, эффекта кристаллизации галоперидола на поверхности диализных мембран в наноадаптерах Float-A-Lyzer® G2. Не увенчались успехом попытки устранить этот эффект и улучшить проницаемость мембраны по отношению к галоперидолу, добавлением поверхностно-активных веществ (твин-80) и усилителей проницаемости (ДМСО).

Заключение. Оба метода, безусловно, являются перспективными для исследования высвобождения ЛС из наноразмерных носителей, однако в случае трудно растворимых ЛС, к которым относится и галоперидол, диффузионный метод с использованием вертикальной ячейки Франца оказался наиболее эффективным.

51-58 655
Аннотация

Введение. Качество, наряду с эффективностью и безопасностью, являются ключевыми характеристиками лекарственного препарата. Поэтому важно в рамках фармацевтической разработки закладывать основы для получения качественного продукта и достижения желаемых характеристик продукта. Одним из инструментов, применяемых для этого, является подход «Quality by design» (QbD) - качество через разработку. В руководстве ICH Q8 «Фармацевтическая разработка» он определяется как системный подход к разработке, который начинается с заранее определенных целей и фокусирует внимание на понимании продукта и процесса, а также управлении процессом, основанном на надежных научных данных и управлении рисками по качеству.

Цель. Цель исследования - разработка состава таблеток на основе фитосубстанции клевера лугового травы с применением инструмента QbD c использованием математической модели, связывающей состав таблеток (CMA) с показателями ее качества (CQA).

Материалы и методы. В основе исследования лежала концепция QbD (quality by design) - качество через разработку. Центральным методом проведения процесса разработки был метод design of experiments (планирования эксперимента) с созданием индивидуального дизайна. Планирование эксперимента проводилось в программном пакете JMP Pro 14 (ver.14.3.0), SAS Institute Inc., США. Для оценки рисков в работе применялся метод анализа рисков FMEA (failure mode and effects analysis) - анализ видов и последствий отказов. В качестве методов анализа смеси для таблетирования и самих таблеток выступали тесты: распадаемость таблеток, прочность таблеток на раздавливание, определение гигроскопичности, определение индексов Карра и Хауснера.

Результаты и обсуждение. Проведена разработка состава таблеток на основе фитосубстанции клевера лугового травы, получаемых методом прямого прессования. Для разработки состава таблеток в соответствии с руководством ICH Q8, на первом этапе был составлен «quality target product profile» (целевой профиль качества готового продукта). Для обеспечения свойств, заданных в целевом профиле качества продукта, был подобран компонентный состав разрабатываемых таблеток исходя из выбранной технологии получения и ключевых характеристик как смеси для таблетирования, так и готовой продукции. Оценка риска для состава препарата определила, что количественные содержания 4 вспомогательных веществ, рассматриваются как критические атрибуты качества материалов (CMA). CMA оказывают влияние на критические атрибуты качества (CQA) лекарственной формы, которые определяют эффективность состава. На основании первичного анализа данных были установлены оптимальные границы содержания для каждого компонента. Определены потенциально критические качественные признаки разрабатываемого лекарственного средства (CQA). Получена и проанализирована математическая модель, связывающая критические параметры качества и состав таблеток.

Заключение. На основании математической модели определен оптимальный состав массы для таблетирования и таблеток, получаемых из нее. Рассчитаны показатели качества таблеток, соответствующих выбранному составу, произведена оценка адекватности полученной модели путем сравнения расчетных и реальных показателей. Показано, что погрешность расчетов не превышает 10 %, а предложенный алгоритм оптимизации и полученная на его основе модель может успешно использоваться для оптимизации состава таблеток.

МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

59-66 682
Аннотация

Введение. В последнее время первичной оценке фармакологического эффекта различных препаратов с использованием тестов in vivo и in vitro в литературе уделяется большое внимание. Постоянно растет интерес к определению антиоксидантной активности (АОА) лекарственных препаратов, в том числе фитопрепаратов, лекарственного растительного сырья и входящих в их состав биологически активных веществ. Известно, что такое официннальное лекарственное растение, как крапива двудомная, по своему фитохимическому составу богата природными антиоксидантами: флавоноиды, каротиноиды, аскорбиновая кислота и др. В отдельных публикациях имеются сведения об антиоксидантной активности листьев крапивы и препаратов на ее основе. Однако, информации о сравнительной характеристике применения различных методов для определения антиоксидантной активности данного вида лекарственного растительного сырья и полученных результатов, в научной литературе не обнаружено.

Цель. Целью настоящей работы являлось сравнительное определение антиоксидантной активности лекарственного растительного сырья крапивы двудомной различными методами.

Материалы и методы. Объектом исследования являлось готовое измельченное сырье листьев крапивы двудомной (Folia Urticae) в фильтр-пакетах, выпускаемое отечественным производителем. АОА водных и водно-спиртовых извлечений определяли титриметрически по методике, разработанной Т. В. Максимовой с соавторами; по способности ингибировать аутоокисление адреналина in vitro. Культура клеток Paramecium caudatum была также использована в качестве биологической модели для определения антиоксидантного действия водных извлечений из изучаемого сырья на живую клетку. Определение качественного и количественного состава фенольных АО проводили методом ВЭЖХ-ДМД-МС.

Результаты и обсуждение. Определена суммарная антиоксидантная активность водных и водно-спиртовых извлечений из листьев крапивы двудомной с использованием различных методик, рекомендуемых в литературе. Исследовано влияние полярности экстрагента на величину антиоксидантной активности и выявлена обратно пропорциональная зависимость. Установлено, что наибольшее содержание антиоксидантов в извлечении наблюдается при использовании 96 % этанола в качестве экстрагента. Оценку антиоксидантного действия исследуемого объекта биологическим методом проводили в соответствии со значениями индекса биологической активности. ВЭЖХ-ДМД-МС анализ водно-метанольного извлечения из листьев крапивы показал присутствие 17 веществ - представителей группы фенольных соединений.

Заключение. При помощи четырех независимых методов показана перспективность использования листьев крапивы двудомной и препаратов на ее основе в качестве источника АО. Полученные данные, несомненно, открывают новые возможности применения давно известного растения и подтверждают целесообразность и перспективность его использования для получения новых лекарственных форм.

67-109 672
Аннотация

Введение. Микотоксины (МТ) - это вторичные метаболиты микроскопических плесневых грибов, обладающие выраженными токсическими свойствами.

Текст. В настоящее время в пищевой и фармацевтической промышленности приобретает особое значение разработка экспресс-методов определения содержания МТ, обладающих мутагенными, тератогенными и канцерогенными свойствами. Создание методов их аналитического контроля продолжает оставаться в центре внимания крупнейших международных организаций (IUPAC, AOAC International и IFJU), специализированных национальных организаций стран ЕС и США, а также академий и министерств многих стран мира. Указом Президента Российской Федерации (РФ) была утверждена Доктрина продовольственной безопасности РФ № 120 от 30.01.2010 г. Министерством сельского хозяйства РФ был издан приказ «О внедрении плана государственного ветеринарного лабораторного мониторинга» № 780 от 30 мая 2003 г. В нашей стране исследования МТ, согласно плану мониторинга и Рекомендации Комиссии ЕС, ограничиваются определением содержания шести тестированных МТ - суммы афлатоксинов (АФЛ), охратоксинов (ОТ), зеараленона (ЗЕА), трихотеценов (ТТ), патулина (П), Т-2 токсина в сельскохозяйственном пищевом сырье, пищевых продуктах и кормах. МТ являются природными загрязнителями не только зерна злаковых, бобовых, семян подсолнечника, а также овощей и фруктов, но и лекарственного растительного сырья (ЛРС), а также фармацевтических субстанций растительного происхождения, в частности, таких как жирные растительные масла, широко применяемые в фармации в качестве самостоятельных лекарственных средств, а также вспомогательных компонентов для производства лекарственных препаратов, БАД, растворителей инъекционных препаратов и др. В РФ содержание МТ в ЛРС пока не нормируется. Предотвратить загрязнение ЛРС МТ практически невозможно, поэтому необходим строгий контроль данных веществ. Однако, данная проблема и необходимость введения подобного исследования в перечень показателей оценки доброкачественности ЛРС требует углубленного изучения и оценки степени его зараженности. Кроме того, стандартные методы определения нормируемых МТ, обычно, не рассчитаны на выявление трансформированных форм, и их содержание остается неучтенным. Поэтому модифицированные лекарственным растением метаболиты МТ, получили название замаскированных (конъюгированных, трансформированных) растением МТ, содержание которых также необходимо оценивать. МТ могут образовываться также при хранении ЛРС под действием развивающихся в них микроскопических грибов. Так как основой для получения лекарственных средств растительного происхождения являются лекарственные растения, которые относятся к сырью, наиболее контаминированному различными микроорганизмами, вирусами, плесневыми грибами, то при этом заражению может подвергаться не только ЛРС, но и почти все субстанции, и лекарственные растительные препараты (ЛРП). Показано, что МТ сохраняются в высушенном ЛРС более 100 лет. Установлено, что многое ЛРС густо обсеменено плесневыми грибами класса Deuteromycetes, что можно обнаружить при проведении микроскопического анализа. Целью настоящей работы являлась систематизация методов определения основных МТ на основе анализа отечественной литературы для возможного дальнейшего их применения в оценке качества ЛРС и ЛРП на его основе.

Заключение. МТ негативно действуют на организм животных и человека и с трудом поддаются деконтаминации. МТ могут присутствовать в ЛРС без видимого роста плесени. МТ не теряет токсичности в течение многих лет. Полностью исключить образование МТ в сырье не представляется возможным, поэтому задача контролирующих ее качество служб - выявить наличие МТ и сравнить обнаруженное количество с нормами предельного содержания. Содержание МТ в ЛРС в настоящее время в РФ не определяется по ГФ РФ XIV изд. Однако, решением Совета Евразийской экономической комиссии от 26.01.2018 г. № 15 утверждены Правила надлежащей практики выращивания, сбора, обработки и хранения исходного сырья растительного происхождения, в которых прописана недопустимость образования плесени в процессе первичной обработки, хранения и транспортировки ЛРС. Следовательно накопление экспериментального материала, а также развитие фармакопейных методов анализа ЛРС, постоянно ужесточающих требования к качеству, вероятно, может привести к включению данного показателя в фармакопейные статьи (ФС). В связи с чем, интересным представилось проведение обзора существующих методов анализа МТ, с возможным последующим их включением в ОФС и ФС. Традиционными методами анализа МТ является физико-химические методы. Наибольшее распространение нашли хроматографические методы: ВЭЖХ, ГЖХ с применением различных детекторов (масс-спектрометрического, флуоресцентного, амперометрического и т. д.). Особое место среди методов разделения занимает ТСХ. Данные методы, безусловно, способны обеспечить достаточную специфичность и необходимую чувствительность определения, однако являются дорогостоящими, рассчитаны преимущественно на специализированные и хорошо оснащенные стационарные лаборатории, а также требуют высокой квалификации персонала. Ни один из них также нельзя отнести к экспресс-методам. Сложность определения МТ в ЛРС связана с продолжительной и трудоемкой пробоподготовкой, а также с использованием дорогостоящих высокочувствительных методов (ВЭЖХ, ЖХ, ГЖХ), которые не могут быть применены непосредственно на месте производства и переработки ЛРС. Наиболее перспективными являются иммунохимические тест-методы определения МТ, основанные на иммунохимической реакции между антителом и антигеном. Показано, что высокая специфичность и возможность выявления МТ в низких концентрациях в сочетании с существующим разнообразным приборным обеспечением позволяют рассматривать иммунохимические методы анализа как наиболее перспективные для широкого практического использования.

111-117 735
Аннотация

Введение. Контроль качества лекарственного препарата нуждается в систематическом совершенствовании в связи с непрерывным повышением требований к качеству лекарственных средств. При оценке качества субстанций и лекарственных препаратов важнейшими показателями являются подлинность, содержание основного вещества и примесей. Это делает актуальным внедрение в производственную практику современных физико-химических методов анализа при определении таких параметров, как подлинность, содержание основного вещества и примесей. Выбор и применимость того или иного метода возможна только при проведении сравнительных исследований применения того или иного метода для решения данной задачи. Метод желательно должен быть рекомендован фармакопеей, давать однозначные результаты, а выполнение анализов должно быть не дорогим и доступным. Выбранные для сравнительного анализа методы хорошо известны, но необходимо отметить, что в последние годы приборостроительные компании значительно улучшили приборную базу, расширили их возможности. Поэтому одна из задач данной статьи продемонстрировать возможности выбранных методов для решения задач контроля качества лекарственных препаратов на примере даларгина.

Цель. Разработать методы определения подлинности действующего вещества в субстанции-порошок «Даларгин» с использованием ЯМР-спектроскопии, ИК-спектрометрии, масс-спектроскопии. Провести сравнительный анализ применимости выбранных методов для решения поставленной задачи.

Материалы и методы. Для определения подлинности в субстанции-порошок «Даларгин» использовали методы масс-спектрометрии, 13С-ЯМР- и 1Н-ЯМР-спектрометрии, ИК-спектрометрии.

Результаты и обсуждение. Разработаны методы определения подлинности исследуемого вещества методами ЯМР-, ИК- и масс-спектрометрии. Проведено сравнительное изучение возможностей выбранных методов при решении поставленной задачи. Были сделаны выводы о применимости метода ЯМР не только при определении подлинности даларгина, но и при решении задачи определения содержания основного вещества и примесей.

Заключение. Разработаны методы подлинности в субстанции-порошок «Даларгин» методами масс-, ИК- и ЯМР-спектрометрии. Установлено, что более информативным методом для установления подлинности является 1Н-ЯМР-спектрометрия.

118-127 653
Аннотация

Введение. Создание нового седативного препарата растительного происхождения, обладающего минимальным количеством побочного действия, является актуальной задачей современной фармакологии и фармацевтической технологии. Лекарственная форма инновационного лекарственного средства должна учитывать его свойства, обеспечивать эффективность препарата и удобство приема.

Цель. Создание твердых желатиновых капсул с растительной композицией - экстрактом сухим - и валидация методик количественного определения суммы флавоноидов для подготовки проекта нормативной документации.

Материалы и методы. Изучены физико-химические и технологические свойства разработанного сухого экстракта, а также экспериментальных образцов капсульных масс: потеря в массе при высушивании, насыпной объем и гранулометрический состав, сыпучесть, угол естественного откоса, уплотняемость, и показатели качества полученных капсул (растворимость, распадаемость и т. д.) согласно методикам, описанным в Государственной фармакопее XIV издания. Разработаны методики количественного определения содержания суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сухом экстракте и капсулах с помощью дифференциальной спектрофотометрии, которые подверглись валидации.

Результаты и обсуждение. При изучении сухого экстракта была установлена его высокая гигроскопичность, ухудшающая технологические свойства и затрудняющая процесс капсулирования. В результате добавления вспомогательных веществ, таких как лактоза безводная и тальк, удалось получить оптимальную для капсулирования массу, которая и послужила основой для создания препарата «Седофлав».

Заключение. На основе сухого экстракта растительной композиции разработаны капсулы «Седофлав», произведена их стандартизация. Разработаны методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин в экспериментальном сухом экстракте и капсулах, произведена их валидация.

129-136 825
Аннотация

Введение. При разработке и валидации методик определения примесей важно тестировать спектральную чистоту пиков (SPP) основных веществ с помощью диодно-матричных детекторов (DAD).

Текст. Подчеркнуто, что задачей тестирования SPP является обнаружение незаметных коэлюирующихся примесей под пиком основного вещества, а не контроль абсолютной чистоты пика. Тестирование SPP снижает риск получения недостаточно специфичной методики. В связи с этим рассмотрены основные критерии и ключевые моменты для оценки спектральной чистоты пиков при использовании компьютерных программ хроматографов Agilent, Shimadzu и Waters.

Заключение. Даны рекомендации, которые следует учитывать для корректной оценки спектральной чистоты пиков при разработке хроматографических методик и валидации их специфичности.

137-141 654
Аннотация

Введение. Семена чернушки посевной - Nigella sativa L. широко известны как источник жирного масла с весьма редким компонентом -тимохиноном. Терапевтический потенциал биологически активных соединений семян растения охватывает положительное влияние на желудочно-кишечный тракт, сердечно-сосудистую и иммунную систему. Кроме того, у тимохинона обнаружены гипогликемическое, антиоксидантное, противоопухолевое, онкопротекторное, иммуномодулирующее действие. Помимо жирного масла и тимохинона в семенах присутствует ряд других значимых соединений, также составляющих собственный фармакологический актив.

Цель. Разработка технологической схемы переработки и анализ липофильных и гидрофильных компонентов семян N. sativa L.

Материалы и методы. В качестве аналитических методов использованы: газожидкостная хроматография с пламенно-ионизационным детектором - для анализа стеринов и тритерпенов; хромато-масс-спектрометрия (газожидкостная хроматография с масс-спектрометрическим детектированиям) - для исследования эфирного масла; хромато-масс-спектрометрия (высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрическим детектированием) - для изучения флавоноидов. Для получения отдельных фракций биологически активных соединений семян N. sativa L. использована дробная экстракция.

Результаты и обсуждения. Была разработана схема выделения липофильных и гидрофильных компонентов, которая заключается в экстракции всего липидного комплекса семян н-гексаном, с последующим удалением экстрагента. Сгущенное гексановое извлечение обрабатывают спиртом этиловым, извлекающим неомыляемые соединения - терпены, хиноны, стерины и не растворяющим триацилглицериды. Шрот семян, оставшийся после гексановой экстракции, обрабатывают спиртом этиловым 70%-ым, в который переходят гидрофильные молекулы, а конкретно флавоноиды.

Заключение. В липофильной фракции омыляемых липидов после переэтерификации идентифицировано 5 соединений, доминирующими являются линолевая и олеиновая кислоты. Характерной особенностью данной фракции является присутствие цис-11,14-эйкозадиеновой кислоты, которая может выступать в роли маркерного элемента жирного масла семян N. sativa L. В неомыляемой фракции обнаружены стерины и тритерпены. Мажорным компонентом данной фракции является β-ситостерин. Помимо указанного стерина присутствуют кампестерин и стигмастери. Тритерпены представлены циклоартенолом и его производными. В эфиромасличном комплексе найдены простые фенолы, хиноны и монотерпены, преобладают n-цимол, тимохинон и α-туйен. В состав гидрофильной фракции семян N. sativa L. входят флавоноиды метоксилированного ряда флавонов и гликозиды кемпферола.

143-149 806
Аннотация

Введение. Плоды Витекса священного являются перспективным источником получения фармацевтической субстанции для создания на её основе отечественного лекарственного средства для коррекции негативных проявлений предменструального синдрома и нарушений менструального цикла.

Цель. Изучить химический состав водно-этанольного экстракта плодов Витекса священного. Установить дофаминергическую активность различных фракций экстракта, разделенных по признаку липофильности для выявления наиболее активной фракции вторичных метаболитов.

Материалы и методы. Исследование качественного состав водно-этанольного извлечения проводили методами ВЭЖХ-УФ и ВЭЖХ-МС/МС. Идентификацию компонентов экстракта проводили путём сопоставления времен удерживания на хроматограммах испытуемого и стандартного образцов. Суммарный экстракт и фракции, полученные обработкой последовательно органическими растворителями различной полярности кубового остатка водно-спиртового извлечения из исследуемого сырья, были проанализированы с применением тирозингидроксилазной биотест-системы in vitro. В качестве препарата сравнения использовали Циклодинон®, капли для приема внутрь, действующим веществом которого является Прутняка обыкновенного плодов экстракт (Vitex agni casti fructuum extract).

Результаты и обсуждение. В исследуемом экстракте подтверждено наличие соединений: протокатеховая кислота, кафтаровая кислота, хлорогеновая кислота, n-гидроксибензойная кислота, агнузид, мизодендрон, 6'-О-п-гидроксибензоилмусаенозидная кислота, лютеолин-7-глюкозид, 3,5-дифеолхинная кислота, витексин, лютеолин, апигенин, кастицин, артеметин, маслиниковая кислота, корозоловая кислота, линоленовая кислота, впервые идентифицированы цикориевая, каафтаровая и изохлорогеновая А кислоты. Полученный в лабораторных условиях жидкий экстракт продемонстрировал сопоставимую активность с коммерческим препаратом, на этом же уровне находились и этилацетатная фракция, и агнузид.

Заключение. Описаны результаты ВЭЖХ-УФ и ВЭЖХ-МС/МС анализа экстракта плодов Витекса священного. Приведены времена удерживания, максимумы поглощения в УФ области, характерные ионы масс-спектры большинства идентифицированных соединений. После фракционирования по принципу липофильности установлено, что ни одна из фракций экстракта не демонстрирует большую активность, чем суммарный экстракт. Это доказывает синергическое действие компонентов на дофаминовую нейромедиаторную систему и показывает целесообразность использования суммарного экстракта плодов Витекса священного. Агнузид в опытах in vitro демонстрирует высокую дофаминергическую активность, что допускает возможность стандартизации экстракта и лекарственного растительного сырья по содержанию агнузида.

150-156 643
Аннотация

Введение. Современные фармакогностические исследования направлены на поиск растительных биологически активных индивидуальных соединений (далее - РБАИС), выделяемых из растительных экстрактов.

Цель. Изучение содержания стероидного сапогенина диосгенина в семенах пажитниках сенного в растительных экстрактах методом ВЭЖХ-УФ.

Материалы и методы. Объектом изучения являлось сырьё - семена пажитника сенного, производимых в качестве лекарственного растительного сырья ООО «Шалфей» (г. Иркутск). Проведены серии экстракции и хроматографического разделения методом ВЭЖХ-УФ.

Результаты и обсуждение. В данной работе была успешно оптимизирована методика экстракции диосгенина (после кислотного гидролиза диосцина 5 % водным раствором кислоты хлористоводородной при нагревании в течение не менее 4 часов на песчаной бане при мощности последней в 150 Вт) из сырья семян пажитника сенного с использованием 50 % водного раствора изопропанола, х.ч. Была предложена упрощённая методика хроматографического разделения диосгенина из экстрактов семян пажитника сенного с использованием изократического режима элюирования 99,9 % ацетонитрилом, х.ч.

Заключение. Среднее содержание диосгенина (после кислотного гидролиза диосцина) в семенах пажитника сенного с учётом влажности сырья составляет (M ± σ) 5,3 ± 0,05 мг/г (95 % ДИ: 5,1-5,4 мг/г; n = 6).

ДОКЛИНИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

158-165 625
Аннотация

Введение. Оценка фармакокинетического профиля действующих веществ является необходимым этапом разработки лекарственного препарата. Исследованный в работе экстракт представляет собой комплекс биологически активных соединений, выделенных из гонад морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis Баренцева моря, содержащий в своем составе пептидные соединения, жирные кислоты, каротиноиды и токоферолы. Выявлена ингибирующая активность экстракта гонад морских ежей в отношении фермента дипептидилпептидазы-4 (ДПП-4). Традиционные подходы к изучению фармакокинетики, основанные на применении хроматографических методов, зачастую не являются эффективными для таких комплексных объектов; альтернативой могут служить методы иммуноферментного анализа.

Цель. Цель исследования - поиск подходов к изучению фармакокинетики экстракта гонад морских ежей на кроликах после его перорального введения в трех дозах.

Материалы и методы. Для характеристики химического состава образцов экстракта гонад морских ежей и определения содержания возможных целевых аналитов в биопробах использованы спектрофотометрические и хроматографические (ВЭЖХ и ТСХ) методы. Изучение фармакокинетики проводили на самцах кроликов после однократного перорального введения экстракта гонад морских ежей. Была установлена корреляция между его концентрацией в плазме крови и биологической активностью, в качестве маркера которой использована активность фермента ДПП-4. Активность фермента определяли хромогенным оптическим методом.

Результаты и обсуждение. Охарактеризованы основные группы биологически активных веществ в составе экстракта гонад морских ежей. Содержание пептидов составило 15-22 %, содержание а-токоферола - 0,05-0,15 %, суммарное содержание токоферолов - 0,23-0,38 %, содержание каротиноидов - 0,005-0,07 %, содержание суммы жирных кислот в пересчете на линоленовую кислоту - 11,03-12,74 %. В связи с низким содержанием биологически активных веществ различных классов и отсутствием доминирующих компонентов оптимальным для изучения фармакокинетики признан подход, базирующийся на корреляции между активностью специфического маркера (активность фермента ДПП-4) и концентрацией экстракта в плазме крови. Разработана методика количественного определения экстракта гонад морских ежей в плазме крови кроликов по активности фермента ДПП-4. Методика валидирована по параметрам: селективность, нижний предел количественного определения, диапазон линейности, точность, прецизионность. Изучена фармакокинетика экстракта гонад морских ежей в плазме крови после перорального введения кроликам в диапазоне доз 5-25 мг/кг. Средняя максимальная концентрация (Cmax) в зависимости от дозы была 37-115 мкг/мл, площадь под фармакокинетической кривой (AUC0-24) - 193-594 ч • мкг/мл, время достижения максимальной концентрации (Tmax) составило 3-3,5 ч, период полувыведения (Т1/2) - 7,9-9,9 ч, среднее время удержания (MRT) - 11-14 ч.

Заключение. С помощью нетрадиционного подхода, основанного на корреляции активности специфического маркера (ДПП-4) и концентрации препарата, охарактеризована фармакокинетика экстракта гонад морских ежей после однократного перорального введения кроликам. Схожие подходы могут быть эффективны для многокомпонентных природных смесей, которые затруднительно или невозможно анализировать на основе традиционных хроматографических (ВЭЖХ-УФ/ФЛ/МС, ГХ-МС и др.) методов.

166-171 615
Аннотация

Введение. Раннее обнаружение опухолевого роста остается одной из важнейших задач диагностической ядерной медицины. Хорошей мишенью для этой цели являются очаги роста сосудистой сети, создаваемые злокачественными новообразованиями. Молекулярные участники этого процесса являются объектом доставки радионуклидов, в том числе галлия-68, для использования в диагностике методом позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ).

Цель. Целью настоящего исследования является изучение в экспериментах на животных возможности использования комплексного соединения галлия-68 с пептидом, содержащим аминокислотную последовательность RGD, для визуализации опухолевых очагов с различной выраженностью неоваскуляризации.

Материалы и методы. В работе использовался радиофармпрепарат, представляющий собой комплексное соединение Ga-68 с пептидом NODAGA-0RGD2 (предполагаемое наименование, используемое далее по тексту, «Васкуляр, 68Ga»). Исследовалась динамика распределения препарата в организме мышей с перевитыми гетеротопическими ксенографтами глиобластомы U-87 MG и аденокарциномы молочной железы Ca-755 после внутривенного введения, а также возможность визуализации опухоли.

Результаты и обсуждение. Динамика распределения радиофармацевтического лекарственного препарата (РФЛП) «Васкуляр, 68Ga» в организме лабораторных животных характерна для поведения пептидов in vivo: быстрый клиренс из крови, интенсивная экскреция с мочой. Накопление препарата в области опухолевого очага глиобластомы у мышей в среднем в 2 раза превышает таковое в опухолевых очагах аденокарциномы. Результаты in vivo ПЭТ визуализации экспериментальных опухолевых очагов хорошо коррелируют с данными радиометрии ex vivo.

Заключение. После внутривенного введения препарат активно накапливается в хорошо васкуляризированных опухолевых очагах, быстро выводится из организма животного через почки без заметного неспецифического накопления в других органах и тканях. Показана возможность визуализации экспериментальных опухолевых очагов методом ПЭТ.

РЕГУЛЯТОРНЫЕ ВОПРОСЫ

173-181 683
Аннотация

Введение. Квалификация оборудования является одним из краеугольных камней обеспечения качества лекарственных средств, которые обеспечивают постоянство метрологических характеристик. Необходимость формирования отечественных руководств к проведению процесса квалификации средств измерений и гармонизация его с европейскими и американскими требованиями, позволит повысить качество лекарственных препаратов, выпускаемых в Российской Федерации, и повысит их конкурентоспособность на мировом фармацевтическом рынке.

Текст. Цель настоящего обзора - анализ отечественной законодательной базы, которая регламентирует постоянство метрологических характеристик средств измерений, применяемых в фармацевтической промышленности. В статье приводятся данные, характеризующие особенности подтверждения соответствие оборудования метрологическим требованиям с точки зрения различных нормативных документов, действующих на территории Российской Федерации.

Заключение. В статье нами продемонстрирована неоднозначность толкований отечественного законодательства и Европейских рекомендаций по качеству в сфере метрологических требований к средствам измерений. Разработка отечественного руководства, гармонизирующего метрологические требования к оборудованию, позволит сфокусироваться на результате и качестве лекарственных средств, а также устранит неоднозначность толкований отечественной законодательной базы.

182-187 806
Аннотация

Введение. Рассмотрены основные этапы процесса передачи аналитических методик на основании отечественных и зарубежных рекомендаций. Каждый из этих этапов позволяют проводить тщательную оценку аналитических методик, проверку ее текущего валидационного статуса и готовность принимающей стороны, а также имеет важное значение в достижении надежной передачи аналитических методик. Приведены примеры оформления аналитических методик подлежащих ревалидации, характеристик испытуемых образцов, стандартных образцов примесей. Описаны методики подлежащие трансферу в зависимости от лекарственной формы.

Текст. Цель - обзор возможных типов ТАМ, включая отмену процедуры передачи, а также обзор основных компонентов протокола передачи на основе отечественных и зарубежных литературных источников.

Заключение. Поскольку данные аналитических методик используются в качестве основы для принятия решений, их достоверность и воспроизводимость чрезвычайно важна. Таким образом, методика должна быть способна предоставлять данные одного и того же качества.

189-202 725
Аннотация

Введение. Настоящая публикация посвящена анализу предложенного Организацией по сотрудничеству фармацевтических инспекций (PIC/S) нового риск-ориентированного регуляторного подхода к классификации нарушений, выявляемых в ходе инспекций фармацевтических производств, который, несомненно, является актуальным.

Текст. В статье дается характеристика новых определений нарушений, которые выявляются в сфере фармацевтического производства, отмечаются отличия предлагаемой градации нарушений от той, которая используется в настоящее время. Предлагаемой новацией в регуляторной деятельности является то, что критическое несоответствие может состоять из нескольких связанных с ним несоответствий, ни одно из которых самостоятельно не может быть критическим, но которые в совокупности могут представлять собой критическое нарушение или системный сбой. Излагается новый подход к классификации нарушений, который основан на оценке риска для пациента. Характеризуются основные этапы риск-ориентированного алгоритма: подробная оценка нарушения для его предварительной классификации; оценка факторов увеличения или снижения риска, независимо от начальной классификации; принятие решения об окончательной классификации с учетом факторов повышения, снижения риска или их отсутствия. Приводятся и характеризуются блок-схемы и иллюстративные примеры, на основе которых проводится предварительное присвоение выявленному нарушению того или иного уровня критичности. Рассматриваются факторы увеличения или снижения риска. В заключение эти факторы экстраполируются на категорию нарушения, т.е. могут как повысить предварительно присвоенную категорию, так и снизить ее, а могут оставить предварительную классификацию неизменной.

Заключение. Проанализирован предложенный Организацией по сотрудничеству фармацевтических инспекций PIC/S новый риск-ориентированный регуляторный подход к классификации нарушений требований правил надлежащей производственной практики, приведена его подробная характеристика. В основе рассматриваемого подхода лежит системное и методическое применение риск-менеджмента, нацеленное на обоснованное присвоение выявленному нарушению определенной категории критичности, что позволяет повысить объективность и прозрачность инспекционных процедур. Дальнейшая апробация регуляторами России и государств-членов ЕАЭС и возможное поэтапное внедрение указанного нового подхода является очень важным как для регуляторов, так и для производителей лекарственных средств, что особенно важно в рамках общего рынка лекарственных средств ЕАЭС.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2305-2066 (Print)
ISSN 2658-5049 (Online)