Разработка методики количественного определения диосгенина из семян пажитника сенного, Trigonella foenum-graecum L.

Введение. Современные фармакогностические исследования направлены на поиск растительных биологически активных индивидуальных соединений (далее - РБАИС), выделяемых из растительных экстрактов.

Цель. Изучение содержания стероидного сапогенина диосгенина в семенах пажитниках сенного в растительных экстрактах методом ВЭЖХ-УФ.

Материалы и методы. Объектом изучения являлось сырьё - семена пажитника сенного, производимых в качестве лекарственного растительного сырья ООО «Шалфей» (г. Иркутск). Проведены серии экстракции и хроматографического разделения методом ВЭЖХ-УФ.

Результаты и обсуждение. В данной работе была успешно оптимизирована методика экстракции диосгенина (после кислотного гидролиза диосцина 5 % водным раствором кислоты хлористоводородной при нагревании в течение не менее 4 часов на песчаной бане при мощности последней в 150 Вт) из сырья семян пажитника сенного с использованием 50 % водного раствора изопропанола, х.ч. Была предложена упрощённая методика хроматографического разделения диосгенина из экстрактов семян пажитника сенного с использованием изократического режима элюирования 99,9 % ацетонитрилом, х.ч.

Заключение. Среднее содержание диосгенина (после кислотного гидролиза диосцина) в семенах пажитника сенного с учётом влажности сырья составляет (M ± σ) 5,3 ± 0,05 мг/г (95 % ДИ: 5,1-5,4 мг/г; n = 6).

1. Michalak O., Krzeczynski P., Cieslak M., Cmoch P., Cybulski M., Krolewska-Golinska K., Kazmierczak-Baranska J., Trzaskowski B., Ostrowska K. Synthesis and anti-tumour, immunomodulating activity of diosgenin and tigogenin conjugates. Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 2020;198:105573. Doi: 10.1016/j.jsbmb.2019.105573.

2. Sun G. C., Jan C. R., Liang W. Z. Exploring the impact of a naturally occurring sapogenin diosgenin on underlying mechanisms of Ca²⁺ movement and cytotoxicity in human prostate cancer cells. Environmental toxicology. 2020;35(3):395-403. Doi: 10.1002/tox.22876.

3. Gan Q., Wang J., Hu J., Lou G., Xiong H., Peng C., Zheng S., Huang Q. The role of diosgenin in diabetes and diabetic complications. Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 2019;198:105575. Doi: 10.1016/j.jsbmb.2019.105575.

4. Kiss R., Pesti-Asboth G., Szarvas M. M., Stundl L., Cziaky Z., Hegedus C., Kovacs D., Badale A., Mathe E., Szilvassy Z., Remenyik J. Diosgenin and its fenugreek based biological matrix affect insulin resistance and anabolic hormones in a rat based insulin resistance model. BioMed research international. 2019;4:7213913. Doi: 10.1155/2019/7213913.

5. Wang W., Zhao E., Jing W., Zhang J. Ultra high-performance liquid chromatography - ion trap mass spectrometry characterization of the steroidal saponins of Dioscorea panthaica Prain et Burkill and its application for accelerating the isolation and structural elucidation of steroidal saponins. Steroids. 2015;95:51-65. Doi: 10.1016/j.steroids.2014.12.023.

6. Wu F. C., Jiang J. G. Effects of diosgenin and its derivatives on atherosclerosis. Food and function. 2019;10(11):7022-7036. Doi: 10.1039/c9fo00749k.

7. Diab Y., Ioannou E., Emam A., Vagias C., Roussis V. Desmettianosides A and B, bisdesmosidic furostanol saponins with molluscicidal activity from Yucca desmettiana. Steroids. 2012;77(6):686-690. Doi: 10.1016/j.steroids.2012.02.014.

8. State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV edition. Volume 2. M.: Ministerstvo Zdravoohraneniya Rossii, 2018.

9. Stekolshchikova E., Stavrianidi A., Porotova A., Rodin I., Shpigun O. Combination of HPLC-MS and QAMS as a new analytical approach for determination of saponins in ginseng containing products. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2017;132:87-92. Doi: 10.1016/j.jpba.2016.09.041.

10. Stavrianidi A. N., Stekolshchikova E. A., Turova P. N., Rodin I. A., Shpigun O. A. Quantitative analysis of a multicomponent system for liquid chromatography-mass spectrometry determination of diosgenin, dioscin and protodioscin in plant extracts of Tribulus terrestris, 2017. Moscow University Chemistry Bulletin. 2017;72:144-153. Doi: 10.3103/S0027131417030063.

11. Choi S. J., Choi J., Jeon H., Bae S. K., Ko J., Kim J., Yoon K. D. Application of high-performance countercurrent chromatography for the isolation of steroidal saponins from Liriope plathyphylla. Journal of separation science. 2015;38(1):18-24. Doi: 10.1002/jssc.201401007.

12. Sarvin B., Stekolshikova E., Rodin I., Stavrianidi A., Shpigun O. Optimization and comparison of different techniques for complete extraction of saponins from T. terrestris. Journal of applied research on medicinal and aromatic plants. 2018;8:75-82. Doi: 10.1016/j.jarmap.2017.12.002.