Антитромботическая активность производного индолинона – стимулятора растворимой гуанилатциклазы

Введение. В статье представлены результаты исследований антитромботической активности разрабатываемого лекарственного средства – стимулятора растворимой гуанилатциклазы (шифр – GRS) на экспериментальных моделях артериального и венозного тромбоза и тромбоэмболии.

Цель. Изучить в эксперименте способность соединения GRS в сравнении с действием клопидогрела и ривароксабана оказывать антитромботическое действие на моделях артериального тромбоза, вызванного у крыс аппликацией на стенку сонной артерии хлорида железа, при тромбоэмболии, вызванной у мышей внутривенным введением раствора тромбина, и венозном тромбозе, вызванном у крыс перевязкой нижней полой вены.

Материалы и методы. Артериальный тромбоз моделировали аппликацией на сонную артерию крыс тампона, смоченного хлоридом железа (FeCl₃), соединение GRS в средней эффективной дозе 10 мг/кг вводили в желудок однократно за 3 ч до аппликации тампона. Регистрировали кровоток по общим сонным артериям и определяли массу тромбов. Тромбоэмболию вызывали внутривенным введением мышам раствора тромбина, соединение GRS в дозе 10 мг/кг или препарат сравнения клопидогрел вводили в желудок в течение 3 дней 1 раз в день. Регистрировали количество погибших животных, время до наступления их гибели и площадь тромбов. Для моделирования венозного тромбоза у крыс перевязывали нижнюю полую вену ниже почечных вен, соединение GRS в дозе 10 мг/кг или препарат сравнения ривароксабан в дозе 5 мг/кг, также оба вещества вместе в тех же дозах вводили в желудок однократно за 1 ч до перевязки вены. Определяли массу влажных и сырых тромбов.

Результаты и обсуждение. На модели артериального тромбоза соединение GRS в дозе 10 мг/кг при введении за 3 ч до аппликации хлорида железа на стенку сонной артерии на 35 % удлиняло время до остановки кровотока в сонной артерии и в 2 раза уменьшало частоту ее полной окклюзии по сравнению с показателями в контрольной группе (р < 0,05). Через 60 мин и 24 ч после моделирования артериального тромбоза полная окклюзия сосуда определялась у 28 и 14 % животных, получавших соединение GRS, и у 75 и 50 % контрольных животных (р < 0,05). На модели тромбоэмболии, вызванной внутривенным введением мышам тромбина, соединение GRS не уменьшало площадь тромбов в сосудах легких, клопидогрел уменьшал ее на 48 %. При введении соединения GRS от тромбоза погибало 80 % мышей, при введении клопидогрела – 30 %, в контроле – 90 %. На фоне экспериментального венозного тромбоза у крыс, вызванного перевязкой нижней полой вены, соединение GRS при однократном введении в желудок уменьшало массу высушенного тромба не слабее ривароксабана. При совместном введении соединения GRS и ривароксабана антитромботическое действие не усиливалось.

Заключение. Соединение GRS при однократном введении в желудок в дозе 10 мг/кг проявляло выраженное антитромботическое действие на моделях артериального и венозного тромбоза у крыс и не препятствовало тромбозу сосудов легких мышей при введении тромбина. Лечебное действие соединения GRS при экспериментальном венозном тромбозе не слабее, чем эффект ривароксабана. Антитромботическая активность соединения GRS обусловлена не только антиагрегантным влиянием, но и уменьшением дисфункции эндотелия артерий и вен.

1. Sabouret P., Savage M. P., Fischman D., Costa F. Complexity of antiplatelet therapy in coronary artery disease patients. American Journal of Cardiovascular Drugs. 2021;21(1):21–34. DOI: 10.1007/s40256-020-00414-0.

2. Bykov V. V., Chernysheva G. A., Smol’yakova V. I., Serebrov V. Yu., Khazanov V. A., Udut V. V. Antiplatelet activity of a new indolinone derivative Eksperimental’naya i klinicheskaya farmakologia. 2017;82(7):10–13. (In Russ.) DOI: 10.30906/0869-2092-2019-82-7-10-13.

3. Maksimenko A. V., Tishchenko E. G. Antioxidant biotherapy for vascular wall protection with superoxide dismutase and catalase derivatives. Tsitologiya. 1999;41(9):821–822. (In Russ.).

4. Sugidachi А., Ohno K., Jakubowski J. A., Ito Y., Tomizawa A., Mizuno M. Induction of Diabetes Abolishes the Antithrombotic Effect of Clopidogrel in Apolipoprotein E–Deficient Mice. TH Open. 2017;01(02):e92–e100. DOI: 10.1055/s-0037-1605361.

5. Rauzi F., Smyth E., Emerson M. Refinement of Mouse Protocols for the Study of Platelet Thromboembolic Responses in vivo. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2017;117(12):2283–2290. DOI: 10.1160/TH17-04-0250.

6. Ewees M. G., Messiha B. A. S., Abo-Saif A. A., Bayoumi A. M. A., Abdel-Bakky M. S. Interference with coagulation cascade as a novel approach to counteract cisplatin-induced acute tubular necrosis; an experimental study in rats. Frontiers in Pharmacology. 2018;9:1155. DOI: 10.3389/fphar.2018.01155.

7. Henke P. K., Varma M. R., Moaveni D. K., Dewyer N. A., Moore A. J., Lynch E. M. Fibrotic injury after experimental deep vein thrombosis is determined by the mechanism of thrombogenesis. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2007;98(5):1045–1055. DOI: 10.1160/TH07-03-0190.

8. Mishra P., Pandey C. M., Singh U., Keshri A., Sabaretnam M. Selection of appropriate statistical methods for data analysis. Annals of Cardiac Anaesthesia. 2019;22(3):297–301. DOI: 10.4103/aca.ACA_248_18.

9. Gupta A. K., Chopra B. S., Vaid B., Sagar A., Raut S., Badmalia M. D., Ashish, Khatri N. Protective effects of gelsolin in acute pulmonary thromboembolism and thrombosis in the carotid artery of mice. PLoS One. 2019:14(4):e0215717. DOI: 10.1371/journal.pone.0215717.

10. Konstantinides S. V. 2019 ESC Guidelines for the diagnosis and management of acute pulmonaryembolism developed in collaboration with the European Respiratory Society (ERS). Russian Journal of Cardiology. 2020;25(8):3848. (In Russ.) DOI: 10.15829/1560-4071-2020-3848.

11. Buys E. S., Zimmer D. P., Chickering J., Graul R., Chien Y. T., Profy A., Hadcock J. R., Masferrer J. L., Milne G. T. Discovery and development of next generation sGC stimulators with diverse multidimensional pharmacology and broad therapeutic potential. Nitric Oxide. 2018;78:72–80. DOI: 10.1016/j.niox.2018.05.009.