Противомикробная активность новых N-замещенных амидов ароилпировиноградных кислот и их серебряных солей

Введение. Важным направлением современной фармации является получение новых отечественных субстанций, обладающих антиинфекционной активностью, в рамках обеспечения технологического суверенитета государства. Оптимизация методов определения противомикробной активности является неотъемлемой частью данных исследований. Полученные ранее серебряные соли пирролопиразолов и пиразолкарбоксамидов обладали высокой противомикробной активностью. В данной работе представлены результаты определения противомикробной активности новых биологически активных соединений, синтезированных реакцией солеобразования с ионами серебра по карбоксильной группе амидов ароилпировиноградных кислот, содержащих в амидном фрагменте антраниловую кислоту.

Цель. Получение ранее неизвестных амидов ароилпировиноградных кислот и их серебряных солей и изучение их противомикробной активности (ПМА).

Материалы и методы. Новые N-замещенные амиды антраниловых кислот и их серебряные соли получены методами органического синтеза. Для исследования их противомикробной активности использовали микрометод двукратных серийных разведений на скрининговых штаммах S. aureus АТСС 6538Р, E. coli АТСС 25922, а также E. faecalis ATCC 29212, S. aureus Wood 46, S. abony № 103/39 для высоко активных соединений. Дополнительно осуществляли способ учета результатов с использованием явления флуоресценции при взаимодействии с резазурином, указывающем на наличие живых микробных клеток.

Результаты и обсуждение. Установлено наличие антибактериальной активности серебряных солей 2а и 2б по отношению к изученным штаммам: минимальная подавляющая концентрация (МПК) соединения 2а 23,4–31,2 мкг/мл, 2б – 3,9–5,8 мкг/мл. При учете результатов исследования ПМА с использованием явления флуоресценции, установлено, что они либо совпадают со значениями МПК, определяемых визуально, либо указывают на меньшую антибактериальную активность. Сопоставление данных результатов и высева содержимого лунок на плотную питательную среду в отношении скрининговых штаммов свидетельствует о том, что подавление флуоресценции в опытных лунках по сравнению с контролем в диапазоне 82–99 % сопровождается отсутствием роста бактерий (бактерицидный эффект), при угнетении флуоресценции менее 60 % наблюдается выраженный рост микроорганизмов. В промежуточном диапазоне наблюдается рост единичных колоний (бактериостатический эффект).

Заключение. Результаты исследования показали, что новые серебряные соли N-замещенных амидовароилпировиноградных кислот обладают высокой противомикробной активностью. Установлено соответствие типа антибактериальной активности степени угнетения флюоресценции.

1. Исмиев А. И., Шоаиб М., Доценко В. В., Ганбаров Х. Г, Исраилова А. А., Магеррамов А. М. Синтез и биологическая активность диэтиловых эфиров 8-(диалкиламино)-3-арил-6-оксо-2,4-дицианобицикло[3.2.1]октан-2,4-дикарбоновой кислоты. Журнал общей химии. 2020;90(8):1207–1215. DOI: 10.31857/S0044460X20080089.

2. Самотруева М. А., Цибизова А. А., Габитова Н. М., Озеров А. А., Тюренков И. Н. Противомикробная активность нового производного хиназолина VMA-13-03. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2020;83(8):24–28. DOI: 10.30906/0869-2092-2020-83-8-24-28.

3. Цибизова А. А. Ясенявская А. Л., Озеров А. А., Тюренков И. Н., Башкина О. А., Самотруева М. А. Скрининговые исследования противомикробной активности пиримидинового производного. Сибирский научный медицинский журнал. 2021;41(6):56–60. DOI: 10.18699/SSMJ20210606.

4. Цибизова А. А. Ясенявская А. Л., Озеров А. А., Тюренков И. Н., Самотруева М. А. Оценка противомикробной активности производного пиримидина в отношении Streptococcus pyogenes. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2023;86(4):34–37. DOI: 10.30906/0869-2092-2023-86-4-34-37.

5. Осипова З. М., Щеглов А. С., Ямпольский И. В. Новая биолюминесцентная система грибов: перспективы использования в медицинских исследованиях. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2018;1:80–83. DOI: 10.24075/vrgmu.2018.004.

6. Сафронюк С. Л., Гавриченко Ю. Ю., Кацев А. М. Применимость рекомбинантных lux-биосенсоров для выявления некоторых механизмов антибактериальной активности направленно синтезированных производных 2-((2-оксо-3-фенил-2H-[1,2,4]триазино[2,3-C]хиназолин-6-ил)тио)уксусной кислоты. Биофармацевтический журнал. 2020;12(5):26–32.

7. Ishimaru M., Noda H., Matsumoto E., Koshi H., Otake H. Comparative study of rapid ATP bioluminescence assay and conventional plate count method for development of rapid disinfecting activity test. Luminescence. 2021;36(3):826–833. DOI: 10.1002/bio.4014.

8. Czieborowski M., Kemperman A. J. B., Rolevink E., Blom J., Visser T., Philipp B. A two-step bioluminescence assay for optimizing antibacterial coating of hollow-fiber membranes with polydopamine in an integrative approach. Journal of Microbiological Methods. 2022;196:106452. DOI: 10.1016/j.mimet.2022.106452.

9. Van Den Driessche F. Rogole P. Brackman G. Coenye T. Optimization of resazurin-based viability staining for quantification of microbial biofilms.Journal of microbiological methods. 2014;98:31–34. DOI: 10.1016/j.mimet.2013.12.011.

10. Azeredo J., Azevedo N. F., Briandet R., Cerca N., Coenye T., Costa A. R., Desvaux M., Bonaventura D., Hebraud M., Jaglic Z., Kacaniova M., Knechel S., Lourenco A., Mergulhão f., Meyer R. C., Nychas G., Simoes M., Tresse O., Sternberg C. Critical review on biofilm methods. Critical reviews in microbiology. 2017;43(3):313–335. DOI: 10.1080/1040841X.2016.1208146.

11. Гейн В. Л., Бобровская О. В., Русских А. А., Новикова В. В., Гейн О. Н., Карпенко Ю. Н., Чащина С. В., Дмитриев М. В., Янкин А. Н. Синтез и биологическая активность 5-арил-N-{4-[(1,3-тиазол-2-ил)cульфамоил]фенил}-1-фенилпиразол-3-карбоксамидов и их солей. Журнал общей химии. 2019;89(4):542–551. DOI: 10.1134/S0044460X19040073.

12. Гейн В. Л., Бобровская О. В., Машкина Е. А., Новикова В. В., Махмудов Р. Р., Янкин А. Н., Данилов С. Е., Хволис Е. А., Белоногова В. Д., Гуляев Д. К. Синтез и противомикробная активность метил 4-арил-2-{4-[(4,6-диметилпиримидин-2-ил)сульфамоил]фениламино}-4-оксобут-2-еноатов и их серебряных солей. Журнал общей химии. 2020;90(5):723–729. DOI: 10.31857/S0044460X20050108.

13. Гейн О. Н., Бобровская О. В., Гейн С. В., Гейн В. Л. Иммунобиологическая и противовоспалительная активность натриевых солей пирроло[3,4-c]пиразол-3-онов и пиразол-3-карбоксамидов в эксперименте. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2022;85(2):21–25. DOI: 10.30906/0869-2092-2022-85-2-21-25.

14. Новикова В. В., Бобровская О. В., Гейн В. Л., Селиверстов Г. В., Люст Е. Н., Махмудов Р. Р. Оценка противогрибковой и антибактериальной активности серебряных солей 5,6-диарил-4-[4-(ацетиламиносульфонил)фенил]-3,5-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-3-онов. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2021;84(9):34–38. DOI: 10.30906/0869-2092-2021-84-9-34-38.