Идентификация и количественное определение стероидного сапогенина диосгенина методом ВЭТСХ в корневищах с корнями Dioscorea caucasica Lipsky и Dioscorea nipponika Makino
https://doi.org/10.33380/2305-2066-2026-15-1-2129
Аннотация
Введение. В оригинальной статье представлены результаты экспериментального исследования, проведенного с использованием метода высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ), растительных образцов – корневищ с корнями Dioscorea caucasica Lipsky, Dioscorea nipponika Makino. Данные виды диоскорей используются в различных областях медицины в качестве фунгицидного, антимикробного, а также антисклеротического средства. Метод ВЭТСХ используется на этапе скрининга растительных образцов для предварительной идентификации и денситометрического количественного определения диосгенина в растительных экстрактах.
Цель. Разработка ВЭТСХ-методики количественной оценки содержания диосгенина после проведения кислотного гидролиза экстрактов в воздушно-сухом сырье – корневищах с корнями Dioscorea caucasica Lipsky, Dioscorea nipponika Makino.
Материалы и методы. Экстракты получали путем предварительного обезжиривания и депигментирования воздушно-сухого сырья корневищ с корнями изучаемых видов диоскорей дихлорметаном х.ч. с последующим двойным экстрагированием. Первое экстрагирование проводили в среде 50%-го водного раствора изопропанола х.ч. при озвучивании ультразвуком с последующим проведением кислотного гидролиза О-гликозидных связей, упариванием. Второе экстрагирование проводили путем перерастворения сухого остатка в метаноле х.ч.; очищали от взвешенных частиц фильтрованием через шприцевые фильтры с диаметром перфораций 20 мкм. ВЭТСХ осуществляли на аппаратном комплексе CAMAG (Швейцария) с использованием пластин HPTLC Aluminium sheets Silica gel 60 F254, 20 × 20 см, которые разрезали до размера 20 × 10 см.
Результаты и обсуждение. После проведения сканирующей денситометрии при 366 и 542 нм было установлено, что хроматографирование метанольных извлечений в системе растворителей толуол х.ч. – хлороформ х.ч. – ацетон х.ч. (2 : 8 : 2 по объему) позволяет удовлетворительно провести разделение и последующее денситометрическое количественное определение диосгенина. Сравнение треков растительных экстрактов корневищ с корнями Dioscorea caucasica Lipsky и Dioscorea nipponika Makino проводили со стандартным образцом диосгенина.
Заключение. Проведенное исследование позволило установить, что содержание стероидного сапогенина диосгенина в воздушно-сухом сырье Dioscorea nipponica Makino (286,4–296,3 мкг/г) незначительно преобладает над его содержанием в сырье Dioscorea caucasica Lipsky (257–277,1 мкг/г). Полученные количественные значения, рассчитанные раздельно по высоте и площади пиков, демонстрируют хорошую сходимость, что подтверждает корректность методики. Разработанный метод высокоэффективной тонкослойной хроматографии с денситометрическим детектированием диосгенина может быть рекомендован для рутинного количественного анализа данного соединения в растительном сырье.
Ключевые слова
При поддержке: Данная работа финансировалась за счет средств бюджета Северного государственного медицинского университета. Никаких дополнительных грантов на проведение или руководство данным конкретным исследованием получено не было.
Об авторах
А. Е. Суханов
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северный государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации [ФГБОУ ВО СГМУ (г. Архангельск) Минздрава России]
Россия
Россия
163000, Архангельская область, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51
В. В. Сепп
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации [ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России (Пироговский Университет)]
Россия
Россия
117513, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1, стр. 6
К. С. Бакулин
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации [ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России (Пироговский Университет)]
Россия
Россия
117513, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1, стр. 6
А. Е. Крашенинников
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации [ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России (Пироговский Университет)]
Россия
Россия
117513, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1, стр. 6
С. В. Убушаев
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации [ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России (Пироговский Университет)]
Россия
Россия
117513, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1, стр. 6
Список литературы
1. Zhang X., Zhang Y., Guo Y., Xue P., Xue Z., Zhang Y., Zhang H., Ito Y., Dou J., Guo Z. Research progress of diosgenin extraction from Dioscorea zingiberensis C. H. Wright: Inspiration of novel method with environmental protection and efficient characteristics. Steroids. 2023;192:109181. DOI: 10.1016/j.steroids.2023.109181.
2. Zhou L., Luo J., Wei Y., Han L., Sun A., Zhang M., Hu D., Yang H., Tang R., Xie P., Zhao L. Dioscorea nipponica Makino: Unraveling multi-target mechanisms and clinical potential in autoimmune disease therapy. Journal of ethnopharmacology. 2025;353:120272. DOI: 10.1016/j.jep.2025.120272.
3. Cai M., Mao Y., Gao W., Wang Z., Mao J., Sha R. Insights into diosgenin against inflammatory bowel disease as functional food based on network pharmacology and molecular docking. Heliyou. 2024;10(18):e37937. DOI: 10.1016/j.heliyon.2024.e37937.
4. Nazir R., Kumar V., Dey A., Pandey D. K. HPTLC quantification of diosgenin in Dioscorea deltoidea: evaluation of extraction efficacy, organ selection, drying method and seasonal variation. South African Journal of Botany. 2021;138:386–393. DOI: 10.1016/j.sajb.2020.12.027.
5. Dangwal L. R., Chauhan A. S. Dioscorea deltoidea Wall. Exgriseb. A highly threatened himalayan medicinal plant: an overview. International Journal of Pharma and Bio Sciences. 2015;6(1):452–460.
6. Zhou Q., Sun H. J., Liu S. M., Jiang X. H., Wang Q. Y., Zhang S., Yu D. H. Anti-inflammation effects of the total saponin fraction from Dioscorea nipponica Makino on rats with gouty arthritis by influencing MAPK signalling pathway. BMC Complement Medicine and Therapies. 2020;20(1):261. DOI: 10.1186/s12906-020-03055-7.
7. Raina A. P., Misra R. C. Evaluation of diosgenin, a bioactive compound from natural source of Dioscorea species: a wild edible tuber plant. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. 2020;9(1):1120–1124.
8. Naseem N., Khaliq T., Jan S., Nabi S., Sultan P., Hassan Q. P., Mir F. A. An overview on pharmacological significance, phytochemical potential, traditional importance and conservation strategies of Dioscorea deltoidea: A high valued endangered medicinal plant. Heliyon. 2024;10(10):e31245. DOI: 10.1016/j.heliyon.2024.e31245.
9. Techen N., Parveen I., Khan I. A. A single molecular marker to distinguish between species of Dioscorea. Genome. 2017;60(3):201–207. DOI: 10.1139/gen-2015-0105.
10. Seeman J. I. Russell earl marker and the beginning of the steroidal pharmaceutical industry. The Chemical Records. 2023:23(4):e202300048. DOI: 10.1002/tcr.202300048.
11. Krüger S., Hüsken L., Fornasari R., Scainelli I., Morlock G. E. Effect-directed fingerprints of 77 botanical extracts via a generic high-performance thin-layer chromatography method combined with assays and mass spectrometry. Journal of Chromatography. A. 2017;1529:93–106. DOI: 10.1016/j.chroma.2017.10.068.
12. Oellig C., Schunck J., Schwack W. Determination of caffeine, theobromine and theophylline in Mate beer and Mate soft drinks by high-performance thin-layer chromatography. Journal of Chromatography A. 2018;1533:208–212. DOI: 10.1016/j.chroma.2017.12.019.
13. Pandey D. K., Kaur P. Optimization of extraction parameters of pentacyclic triterpenoids from Swertia chirata stem using response surface methodology. 3 Biotech. 2018;8(3):152. DOI: 10.1007/s13205-018-1174-6.
14. Kumar A., Pandey A., Gaur N. K., Vishwakarma S. K., Dalua S. S., Tiwari P., Valavan R. Development and validation of HPTLC fingerprint method for 16 homeopathic mother tinctures lacking standards. Biomedical Chromatography. 2025;39(10):E70194. DOI: 10.1002/bmc.70194.
15. Суханов А. Е., Крылов И. А., Сепп В. В., Бакулин К. С. Предварительный качественный анализ растительных образцов методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии на присутствие стероидных сапогенинов некоторых представителей семейств диоскорейные, бобовые, лютиковые, мелантьевые и норичниковые. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2024;3(1):159–174. DOI: 10.33380/2305-2066-2024-13-1-1433.
16. Kharat S. N., Singh R., Mendhulkar V. D. Quantitative analysis for diosgenin content in Elephantopus scaber (Linn.) by HPTLC using successive solvent extraction method. Der Pharmacia Letter. 2015;7(5):236–244.
17. Król-Kogus B., Lamine K. M., Migas P., Boudjeniba M., Krauze-Baranowska M. HPTLC determination of diosgenin in fenugreek seeds. Acta Pharmaceutica. 2018;68:97–107. DOI: 10.2478/acph-2018-0002.
18. Salunkhe R., Gadgoli C., Naik A., Patil N. Pharmacokinetic profile and oral bioavailability of diosgenin, charantin, and hydroxychalcone from a polyherbal formulation. Frontiers in Pharmacology. 2021;12:629272. DOI: 10.3389/fphar.2021.629272.
19. Nagamma T., Konuri A., Bhat K. M. R., Maheshwari R., Udupa P., Nayak Y. Modulation of inflammatory markers by petroleum ether fraction of Trigonella foenum-graecum L. seed extract in ovariectomized rats. Journal of Food Biochemistry. 2021;45:E13690. DOI: 10.1111/jfbc.13690.
20. Bhat M. H., Fayaz M., Kumar A., Dar A. A., Jain A. K. Development of an efficient micropropagation system for Dioscorea bulbifera L. and phytochemical profile of regenerated plants. Journal of Genetic Engineering and Biotechnology. 2022;20(1):107. DOI: 10.1186/s43141-022-00382-9.
Дополнительные файлы
Рецензия
Для цитирования:
Суханов А.Е., Сепп В.В., Бакулин К.С., Крашенинников А.Е., Убушаев С.В. Идентификация и количественное определение стероидного сапогенина диосгенина методом ВЭТСХ в корневищах с корнями Dioscorea caucasica Lipsky и Dioscorea nipponika Makino. Разработка и регистрация лекарственных средств. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2026-15-1-2129
For citation:
Sukhanov A.E., Sepp V.V., Bakulin K.S., Krasheninnikov A.E., Ubushaev S.V. Identification and quantification of the steroidal sapogenin diosgenin by HPTLC in rhizomes with roots of Dioscorea caucasica Lipsky and Dioscorea nipponika Makino. Drug development & registration. (In Russ.) https://doi.org/10.33380/2305-2066-2026-15-1-2129
Просмотров:
50
Послать статью по эл. почте 