Разработка и валидация аналитических методик количественного определения дабигатрана этексилата методами ВЭЖХ-ДМД и УФ-спектрофотометрии при проведении теста сравнительной кинетики растворения капсул дабигатрана в биорелевантной среде FaSSGF

Введение. Венозные тромбоэмболии и фибрилляция предсердий являются значимыми причинами сосудистой смертности. Антикоагулянтная терапия существенно снижает риск ишемического инсульта, а дабигатрана этексилат, относящийся к прямым ингибиторам тромбина, прочно вошел в клиническую практику. На российском рынке представлены воспроизведенные препараты дабигатрана этексилата в форме капсул, одним из наиболее критичных видов контроля качества для данной лекарственной формы является тест сравнительной кинетики растворения (ТСКР). Использование биорелевантных сред для растворения позволяет достоверно прогнозировать поведение капсул in vivo. Для проведения ТСКР капсул дабигатрана этексилата исходя из фармакокинетических свойств наиболее подходящей средой является Fasted State Simulated Gastric Fluid (FaSSGF).

Цель. Разработка и валидация аналитических методик количественного определения дабигатрана этексилата методами высокоэффективной жидкостной хроматографии с диодно-матричным детектированием (ВЭЖХ-ДМД) и спектрофотометрии в ультрафиолетовой области (УФ-спектрофотометрия) при проведении ТСКР капсул, содержащих дабигатрана этексилат, в биорелевантной среде растворения FaSSGF.

Материалы и методы. Анализировали модельные растворы, содержащие пеллеты дабигатрана этексилата и вспомогательные вещества лекарственного препарата. Для хроматографического разделения использовали ВЭЖХ-ДМД Agilent 1260 Infinity II Series (США). Детектирование проводилось при длине волны 316 нм. Использовали колонку ZORBAX SB-C18, 150 × 4,6 мм, 5 мкм, предколонку ZORBAX SB-C18, 12,5 × 4,6 мм, 5 мкм (Agilent Technologies, США). Для разработки и валидации метода УФ-спектрофотометрии использовали спектрофотометр СФ-2000 (Россия). Обработку первичных данных проводили с помощью программного обеспечения Open Lab CDS v. 2.7 для ВЭЖХ, «Сканирование для спектрофотометра СФ-2000» от ООО «ОКБ Спектр», версия 4.06.

Результаты и обсуждение. Подобраны оптимальные условия пробоподготовки, хроматографические и спектрофотометрические условия для количественной оценки дабигатрана этексилата, высвобождаемого в среду растворения FaSSGF, проведена валидация разработанных аналитических методик в диапазоне от 0,13 до 14,67 мкг/мл.

Заключение. Аналитические методики обеспечивают воспроизводимые и достоверные результаты во всем заданном диапазоне и пригодны для количественного определения дабигатрана этексилата при проведении ТСКР в биорелевантной среде растворения FaSSGF.

1. Lutsey P. L., Zakai N. A. Epidemiology and prevention of venous thromboembolism. Nature Reviews Cardiology. 2023;20(4):248–262. DOI: 10.1038/s41569-022-00787-6.

2. Cheng J. W. M., Vu H. Dabigatran Etexilate: An Oral Direct Thrombin Inhibitor for the Management of Thromboembolic Disorders. Clinical Therapeutics. 2012;34(4):766–787. DOI: 10.1016/j.clinthera.2012.02.022.

3. Manjula S., Krishna Kumar M. Expert Opinion on the Usage of Novel Oral Anticoagulants in Clinical Conditions in Indian Settings. Asian Journal of Research in Cardiovascular Diseases. 2024;6(1):16–24.

4. Gunawardena T. Direct Oral Anticoagulants: A Review for the Non-Specialist. Hematology Reports. 2021;13(4):9239. DOI: 10.4081/hr.2021.9239.

5. Bourderi-Cambon A., Fadhlaoui K., Garrait G., Lainé E., Dhifallah I., Rossano M., Caisse P., Beyssac E. Improving In Vitro–In Vivo Correlation (IVIVC) for Lipid-Based Formulations: Overcoming Challenges and Exploring Opportunities. Pharmaceutics. 2025;17(10):1310. DOI: 10.3390/pharmaceutics17101310.

6. Chai F., Sun L., Ding Y., Liu X., Zhang Y., Webster T. J., Zheng C. A Solid self-nanoemulsifying System of the BCS Class IIb Drug Dabigatran Etexilate to Improve Oral Bioavailability. Nanomedicine. 2016;11(14):1801–1816. DOI: 10.2217/nnm-2016-0138.

7. Harada A., Ikushima I., Haranaka M., Yanagihara A., Nakayama D. Bioequivalence of a Newly Developed Dabigatran Etexilate Tablet Versus the Commercial Capsule and Impact of Rabeprazole-Induced Elevated Gastric pH on Exposure in Healthy Subjects. American Journal of Cardiovascular Drugs. 2019;20(3):249–258. DOI: 10.1007/s40256-019-00377-x.

8. Staniszewska M., Myslitska D., Romański M. Polak S., Garbacz G., Dobosz J., Smoleński M., Paszkowska J., Danielak D. In Vitro Simulation of the Fasted Gastric Conditions and Their Variability to Elucidate Contrasting Properties of the Marketed Dabigatran Etexilate Pellet-Filled Capsules and Loose Pellets. Molecular Pharmaceutics. 2024;21(5):2456–2472. DOI: 10.1021/acs.molpharmaceut.4c00025.

9. Yan Y., Li A., Si Z., Zhang X. Solubility measurement, correlation and molecular simulation of dabigatran etexilate mesylate polymorphs in five mono-solvents. Journal of Molecular Liquids. 2020;314:113676. DOI: 10.1016/j.molliq.2020.113676.

10. Bernardi R. M., D’Avila F. B., Todeschini V., Fröehlich P. E., Bergold A. M. A comparative study on the analytical performance of a charged aerosol detector and an ultraviolet detector for the RP-LC analysis of dabigatran etexilate in capsules. Analytical Methods. 2013;5(18):4777. DOI: 10.1039/c3ay40938d.