Стандартизация жидких водно-спиртовых извлечений из облепихи крушиновидной листьев

Введение. Листья облепихи крушиновидной в настоящее время используются в фармации в качестве исходного сырья для производства лекарственного растительного препарата (ЛРП) «Гипорамин» противовирусного действия. В научной литературе представлены данные доклинических испытаний экстрактов из листьев, подтверждающие их противовоспалительную, антибактериальную, антиоксидантную, иммуномодулирующую активность, а также имеются данные о потенциальных свойствах гепатопротектора, что связано с фенольной, в том числе флавоноидной, фракцией листьев. Поэтому исследования возможности дополнительных путей внедрения изучаемого сырья в практическую фармацию, а также расширения ассортимента отечественных ЛРП, содержащих комплекс биологически активных веществ (БАВ) листьев, например в виде настоек и жидких экстрактов на основе листьев, с разработкой методик их стандартизации по целевой группе БАВ следует считать актуальными.

Цель. Целью исследования являлось получение и стандартизация водно-спиртовых извлечений из облепихи крушиновидной листьев.

Материалы и методы. Сравнительное исследование проводили для извлечений из высушенных листьев, приготовленных по типу настоек (1 : 5), полученных различными способами, и экстракта жидкого (1 : 1) по стандартным фармакопейным методикам. Все исследуемые извлечения готовили из листьев, заготовленных в 2024 году на территории Воронежской области, фенологической фазы развития, соответствующей стадии технической зрелости плодов. Проводилась разработка методик идентификации и количественного определения флавоноидов методами ТСХ и дифференциальной спектрофотометрии.

Результаты и обсуждение. По показателю «сухой остаток» наибольшее количество экстрактивных веществ показала настойка, полученная методом дробной мацерации. Жидкий экстракт демонстрировал самый высокий выход БАВ. Содержание тяжелых металлов не превышало нормативов, рекомендованных Государственной фармакопеей РФ. Содержание флавоноидов максимально было в экстракте жидком (1 : 1). С точки зрения эффективности использования сырья наилучшей формой является настойка, полученная методом перколяции.

Заключение. Получены опытные лабораторные образцы жидких водно-спиртовых ЛФ на основе листьев облепихи крушиновидной (настойки, экстракт жидкий), проведена их стандартизация по показателям, изложенным в нормативной документации, разработаны методики количественного определения флавоноидов. Методом ТСХ показан неодинаковый флавоноидный состав водно-спиртовых извлечений, в которые переходит от 11 до 18 БАВ группы флавоноидов. Наиболее высокое содержание флавоноидов отмечено для экстракта жидкого (1 : 1), что позволяет рекомендовать данную форму в качестве оптимальной из исследованных.

1. Морозов В. И. Культура облепихи крушиновидной (Hippophaё rhamnoides L.) как источник сырья для производства препарата «Гипорамин». Химико-фармацевтический журнал. 2007;41(8):19–21.

2. Бортникова В. В. Экспериментальное изучение безопасности гипорамина – нового фитопрепарата противовирусного действия. Биомедицина. 2011;3:106–108.

3. Шейченко О. П., Толкачев О. Н., Шейченко В. И., Шипулина Л. Д., Вичканова С. А., Быков В. А. Способ получения противовирусного препарата «Гипорамин» (варианты). Патент РФ на изобретение № 2197978C1. Заявл. 07.06.2001. Опублик. 10.02.2003. Доступно по: https://patenton.ru/patent/RU2197978C1. Ссылка активна на 27.06.2025.

4. Ферубко Е. В., Трумпе Т. Е., Курманова Е. Н., Колхир В. К., Сидельникова Г. Ф., Громакова А. И. Использование фитопрепаратов ФГБНУ ВИЛАР в медицине. Вопросы биологической, медицинской и фармакологической химии. 2016;6(19):11–15.

5. Enkhtaivan G., John K. M. M., Pandurangan M., Hur J. H., Leutou A. S., Kim D. H. Extreme effects of Seabuckthorn extracts on influenza viruses and human cancer cells and correlation between flavonol glycosides and biological activities of extracts. Saudi Journal of Biological Sciences. 2017;24(7):1646–1656. DOI: 10.1016/j.sjbs.2016.01.004.

6. Kim S.-J., Hwang E., Yi S. S., Song K. D., Lee H.-K., Heo T.-H., Park S.-K., Jung Y. J., Jun H. S. Sea Buckthorn leaf extract inhibits glioma cell growth by reducing reactive oxygen species and promoting apoptosis. Applied biochemistry and biotechnology. 2017;182(4):1663–1674. DOI: 10.1007/s12010-017-2425-4.

7. Kubczak M., Khassenova A. B., Skalski B., Michlewska S., Wielanek M., Sklodowska M., Aralbayeva A. N., Nabiyeva Z. S., Murzakhmetova M. K., Zamaraeva M., Bryszewska M., Ionov M. Hippophae rhamnoides L. leaf and twig extracts as rich sources of nutrients and bioactive compounds with antioxidant activity. Scientific Reports. 2022;12(1):1095. DOI: 10.1038/s41598-022-05104-2.

8. Kumar M. S. Y., Dutta R., Prasad D., Misra K. Subcritical water extraction of antioxidant compounds from Seabuckthorn (Hippophae rhamnoides) leaves for the comparative evaluation of antioxidant. Food Chemistry. 2011;127(3):1309–1316. DOI: 10.1016/j.foodchem.2011.01.088.

9. Ma X., Moilanen J., Laaksonen O., Yahg W., Tenhu E., Yang B. Phenolic compounds and antioxidant activities of tea-type infusion processed from sea buckthorn (Hippophae rhamnoides) leaves. Food Chemistry. 2019;272:1–11. DOI: 10.1016/j.foodchem.2018.08.006.

10. Okuda T., Yoshida T., Ashida M., Kazaki K. Casuariin, stachyurin and strictinin, new ellagitannins from Casuarina stricta and Stachyurus praecox. Chemical and Pharmaceutical Bulletin. 1982;30(2):766–769. DOI: 10.1248/cpb.30.766.

11. Skalski B., Kontek B., Olas B., Zuchowski J., Stochmal A. Phenolic fraction and nonpolar fraction from sea buckthorn leaves and twigs: Chemical profile and biological activity. Future Medicinal Chemistry. 2018;10(20):2381–2394. DOI: 10.4155/fmc-2018-0144.

12. Suvanto J., Tähtinen P., Valkamaa S., Engström M. T., Karonen M., Salminen J.-P. Variability in Foliar ellagitannins of Hippophae rhamnoides L. and identification of a new ellagitannin, Hippophaenin C. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2018;66(3):613–620. DOI: 10.1021/acs.jafc.7b04834.

13. Yoshida T., Hatano T., Ito H., Okuda T. Chemical and biological perspectives of ellagitannin oligomers from medicinal plants. Studies in Natural Products Chemistry. 2000;23:395–453. DOI: 10.1016/S1572-5995(00)80134-9.

14. Yoshida T., Tanaka K., Chen X.-M., Okuda T. Tannins from Hippophae rhamnoides. Phytochemistry. 1991;30(2):663–666. DOI: 10.1016/0031-9422(91)83748-A.

15. Айтуарова А. Ш., Жусупова Г. Е. Качественная и количественная оценка состава биологически активных веществ надземной части растения вида Hippophaё rhamnoides L. Известия научно-технического общества «КАХАК». 2015;4(51):4–10.

16. Тарасов А. В., Бухаринова М. А., Хамзина Е. И. Определение антиоксидантной активности водных экстрактов некоторых растений Уральского региона. Химия пищи и гигиена питания. 2018;3(2):31–38. DOI: 10.29141/2500-1922-2018-3-2-5.

17. Мурзахметова М. К., Утегалиева Р. С., Аралбаева А. Н., Лесова Ж. Т. Исследование антиоксидантных и мембранопротекторных свойств экстрактов облепихи. Actualscience. 2015;1(5(5)):26–28.

18. Кароматов И. Д., Букаев М. К. Облепиха как адаптогенное, повышающее физическую силу лекарственное растение. Биология и интегративная медицина. 2018;6(23):37–47.

19. Vijayaraghavan R., Gautam A., Kumar O., Pant S. C., Sharma M., Singh S., Kumar H. T., Singh A. K., Nivsarkar M., Kaushik M. P., Sawhney R. C., Chaurasia O. P., Prasad G. B. K. S. Protective effect of ethanolic and water extracts of sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) against the toxic effects of mustard gas. Indian Journal of Experimental Biology. 2006;44(10):821–831.

20. Usha T., Middha S. K., Goyal A. K., Karthik M., Manoj D., Faizan S., Goyal P., Prashanth H., Pande V. Molecular docking studies of anti-cancerous candidates in Hippophae rhamnoides and Hippophae salicifolia. The Journal of Biomedical Research. 2014;28(5):406–415. DOI: 10.7555/JBR.28.20130110.

21. Saggu S., Divekar H. M., Gupta V., Sawhney R. C., Banerjee P. K., Kumar R. Adaptogenic and safety evaluation of seabuckthorn (Hippophae rhamnoides) leaf extract: a dose dependent study. Food and Chemical Toxicology. 2007;45(4):609–617. DOI: 10.1016/j.fct.2006.10.008.

22. Богомолова Н. И., Лупин М. В. Уровень биологического потенциала продуктивности облепихи крушиновидной в естественных и промышленных насаждениях России. Вестник аграрной науки. 2021;6(93):62–67. DOI: 10.17238/issn2587-666X.2021.6.62.

23. Новрузов Э. Н., Мамедов З. Г., Мустафаева Л. А., Мирюсифова Х. М., Зейналова А. М. Состав и содержание флавоноидов листьев Hippophae rhamnoides L., произрастающих в Азербайджане. Химия растительного сырья. 2018;3:209–214. DOI: 10.14258/jcprm.2018033772.

24. Ковалёва Н. А., Тринеева О. В., Бузлама А. В., Кузнецов А. Ю. Фармакологическая активность облепихи крушиновидной листьев: in silico и in vivo. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2023;12(3):174–188. DOI 10.33380/2305-2066-2023-12-3-174-188.

25. Ковалёва Н. А., Тринеева О. В., Чувикова И. В., Сливкин А. И. Разработка и валидация методики количественного определения флавоноидов в листьях облепихи крушиновидной методом спектрофотометрии. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств. 2023;13(2):216–226. DOI: 10.30895/1991-2919-2023-531.

26. Кабанов Д. С. Качественный состав и противоопухолевое действие полифенольных соединений из листьев Hippophae rhamnoides L. при использовании разных экстрагентов (мини-обзор). В сб.: Сборник материалов Международной конференции «Достижения и перспективы создания новых лекарственных средств растительного происхождения». 2024. С. 408–413.

27. Кабанов Д. С., Рубцова Т. А., Балеев Д. Н. Влияние гидролизуемых таннинов из листьев Hippophae rhamnoides L. на метаболическую активность кератиноцитов человека (НаСаТ). В сб.: Сборник научных трудов Международной научно-практической конференции «Достижения и перспективы создания новых лекарственных растительных препаратов». 2023. С. 349–357.

28. Тринеева О. В., Ковалёва Н. А., Сафонова Е. Ф., Сливкин А. И. Применение ТСХ для оценки профиля флавоноидов листьев облепихи крушиновидной различных фаз заготовки. Сорбционные и хроматографические процессы. 2023;23(4):547–557. DOI: 10.17308/sorpchrom.2023.23/11564.

29. Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии. М.: Мир; 1999. 405 с.

30. Рудаков О. Б., Востров И. А., Федоров С. В., Филиппов А. А., Селеменев В. Ф., Приданцев А. А. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии. Воронеж: Водолей; 2004. 528 с.