Определение валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС

Введение. В настоящее время физико-химические методы анализа активно используются для определения содержания лекарственных веществ в биологических жидкостях. Особенно широкое распространение приобрела высокоэффективная жидкостная хроматография с различными способами детектирования. Одной из наиболее сложных практических задач является хроматографическое разделение так называемых слабоудерживаемых соединений – лекарственных веществ, плохо удерживаемых на хроматографической колонке. Одними из таких веществ являются валганцикловир и ганцикловир.

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для проведения фармакокинетических исследований.

Материалы и методы. Определение валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В качестве пробоподготовки использован способ осаждения ацетонитрилом.

Результаты и обсуждение. Разработанная методика была валидирована по следующим валидационным параметрам: селективность, эффект матрицы, калибровочная кривая, точность, прецизионность, степень извлечения, нижний предел количественного определения, перенос пробы, стабильность.

Заключение. Разработана и валидирована методика определения валганцикловира и ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС. Подтвержденные аналитические диапазоны методики составили 5,00–1000,00 нг/мл для валганцикловира и 50,00–10000,00 нг/мл для ганцикловира в плазме крови. Аналитические диапазоны позволяют применять разработанную методику для проведения исследований фармакокинетики препаратов валганцикловира и ганцикловира.

1. Карпов И. А., Соловей Н. В. Валганцикловир как высокоэффективное лекарственное средство профилактикии терапии герпетических инфекций. Медицинские новости. 2018;3:56–59.

2. Xu H.-R., Li X.-N., Chen W.-L., Liu G.-Y., Chu N.-N., Yu C. A sensitive assay for simultaneous determination of plasma concentrations of valganciclovir and its active metabolite ganciclovir by LC/MS/MS. Journal of Chromatography B. 2007;848(2):329–334. DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.10.053.

3. Singh O., Saxena S., Mishra S., Khuroo A., Monif T. Determination of valganciclovir and ganciclovir in human plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometric detection. Clinical Biochemistry. 2011;44(10-11):907–915. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.04.003.

4. Valganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01610.

5. Ganciclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB01004.

6. Acyclovir [Internet]. DRUGBANK. Available at: https://go.drugbank.com/drugs/DB00787.

7. Teshima D., Otsubo K., Yoshida T., Itoh Y., Oishi R. A simple and simultaneous determination of acyclovir and ganciclovir in human plasma by high‐performance liquid chromatography. Biomedical Chromatography. 2003;17(8):500–503. DOI: 10.1002/bmc.258.

8. Padullés A., Colom H., Armendariz Y., Cerezo G., Caldes A., Pou L., Torras J., Grinyó J. M., Lloberas N. Determination of ganciclovir in human plasma by ultra performance liquid chromatography–UV detection. Clinical Biochemistry. 2012;45(4-5):309–314. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2011.12.014.

9. Heinig K., Wirz T., Gajate-Perez A., Belli S. Determination of Ganciclovir and its prodrug Valganciclovir by hydrophilic interaction liquid chromatography–tandem mass spectrometry. Journal of Chromatography B. 2011;879(5-6):436–442. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.12.033.

10. Dogan-Topal B., Ozkan S. A., Uslu B. Simultaneous determination of abacavir, efavirenz and valganciclovir in human serum samples by isocratic HPLC-DAD detection. Chromatographia. 2007;66(1):25– 30. DOI: 10.1365/s10337-007-0302-y.

11. Комаров Т. Н., Шохин И. Е., Мискив О. А., Богданова Д. С., Алешина А. В., Медведев Ю. В., Багаева Н. С. Разработка и валидация методики количественного определения валганцикловира и его метаболита ганцикловира в плазме крови человека методом ВЭЖХ-УФ. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(2):133–139. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-2-133-139.

12. Миронов А. Н., ред. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К; 2013. 280 с.

13. Food and Drug Administration. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/bioanalytical-method-validation-guidance-industry.

14. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.