Мы обсудили критически важные лабораторные этапы в процессе регистрации лекарственных средств, рассмотрели актуальные регуляторные требования и поделились практическими подходами к организации и проведению исследований, результаты которых формируют ключевые разделы регистрационного досье.

Представляем новый выпуск из цикла «Мнение лидеров», посвященный стратегическим проектам в области биотехнологий и иммунопрофилактики.

Представляем новый выпуск из цикла «Мнение лидеров». Сотрудничество с вузами и научными организациями всегда было важной частью деятельности Центра Фармацевтической Аналитики и журнала «Разработка и регистрация лекарственных средств». На сегодняшний день ключевым вузом-партнером Центра уже много лет является Санкт-Петербургский химико-фармацевтический университет.

В статье представлена стенограмма доклада заместителя комиссара здравоохранения СССР А. Г. Натрадзе, зачитанного им на совещании работников промышленности 31 января 1944 г. В докладе подведен итог работы отрасли: отмечен рост объемов производства лекарственных препаратов предприятиями химико-фармацевтической промышленности в 1943 г. в сравнении с 1942 г. по большинству наименований и невыполнение плана по восстановлению номенклатуры производимых ранее лекарственных средств и освоению выпуска новых препаратов. На вновь организованных предприятиях Главмедфармпрома, где до войны производились лишь простейшие галеновые препараты, в течение 1942 и 1943 гг. был организован выпуск сложных в химическом отношении лекарственных средств. В союзных республиках были созданы новые предприятия (Ташкент, Фрунзе, Баку), освоившие выпуск, наряду с галеновыми препаратами, также и сложных субстанций. Одновременно А. Г. Натрадзе указал на мероприятия, внедрение которых за отчетный период привело к росту производительности труда, снижению потерь энергоресурсов, сырья и материалов. Большая часть доклада была посвящена планам отрасли на 1944 г.

Метод ионной или ионообменной хроматографии (ИХ), несмотря на несколько меньшую популярность, чем традиционная ВЭЖХ, также активно применяется для контроля качества препаратов и субстанций в фармацевтической промышленности. Чаще всего целевыми соединениями являются неорганические ионы, однако ИХ также применяют для разделения органических кислот, сахаров, аминогликозидов, аминокислот и пр.

С 22 по 24 апреля 2026 года в МВЦ «Крокус Экспо» состоялась 24-я Международная выставка лабораторного оборудования и химических реактивов «Аналитика Экспо 2026».

Введение. Для количественной оценки полифенольных соединений и их смесей широко используют спектрофотометрические методы исследования, в том числе Фолина – Чокалтеу, спектрофотометрию с хлоридом алюминия и другие. Они позволяют с высокой воспроизводимостью определять суммарное содержание полифенолов в различных образцах в пересчете на конкретный полифенол, но не количество отдельных компонентов. Спектрофотометрию в УФ и видимой области также применяют для исследования антирадикальной емкости полифенольных соединений, которая в том числе зависит от их количественного содержания. Соответственно, методы оценки антирадикальной активности теоретически могут быть использованы для количественного определения полифенолов.

Цель. Разработать методику количественного определения отдельных компонентов полифенольных композиций посредством измерения кинетики накопления радикал-катионов ABTS^•+.

Материалы и методы. Исследовали бинарные композиции флавоноида дигидрокверцетина и лигнана секоизоларицирезинола, а также дигидрокверцетина и альфа-токоферола. Спектрофотометрически наблюдали кинетику накопления радикал-катионов 2,2'-азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфокислоты) диаммониевой соли (ABTS^•+) в присутствии исследуемых образцов и стандартных смесей.

Результаты и обсуждение. Для исследуемых композиций выявлено образование двух периодов плато в их кинетических кривых, продолжительность которых оказалась пропорциональна содержанию компонентов композиции, что дает возможность проводить их количественное определение при соотнесении периодов плато с конкретными компонентами. Разработанная методика позволяет определять количество полифенолов с относительной ошибкой (δ) не более 3,7 % и относительным стандартным отклонением (RSD) не более 2 %.

Заключение. Была показана принципиальная возможность применения метода оценки антирадикальной емкости для количественного определения полифенольных соединений в сложных смесях. Разработана методика количественного определения отдельных компонентов в бинарных смесях, которая характеризуется высокой воспроизводимостью результатов и приемлемой точностью.

Введение. Постоянные усилия по поиску новых противовирусных средств, нацеленных на РНКазу H обратной транскриптазы ВИЧ обусловлены высокой заболеваемостью и неуклонным ростом смертности. Настоящее исследование сосредоточено на десяти основанных на пиримидин-2,4-дионе молекулах, которые, как было установлено, обладают мощной противовирусной активностью против РНКазы H обратной транскриптазы ВИЧ, а также достаточной биодоступностью и фармакокинетическими свойствами.

Цель. Поиск и оценка перспективных производных молекул пиримидин-2,4-диона в качестве потенциальных ингибиторов ВИЧ.

Материалы и методы. Для изучения механизмов связывания спроектированных соединений с активным центром РНКазы H был использован протокол докинга с применением программы AutoDock Vina. Молекулярно динамическое моделирование продолжительностью 100 нс выполнялось в программе Desmond, комплексы были построены на основе силового поля OPLS3 2005. Энергии фронтальных молекулярных орбиталей и связанные с ними показатели реакционной способности наиболее эффективных антивирусных агентов были рассчитаны с помощью метода DFT B3LYP/6 31G(d,p), реализованного в программе Gaussian

Результаты и обсуждение. Две молекулы, Pyr06 и Pyr07, продемонстрировали более высокий показатель докинга (−10,7 ккал/моль) в сравнении с контрольным соединением (MPD: −9,8 ккал/моль) и с другими спроектированными соединениями (с аффинностями в диапазоне от −9,6 до −10,4 ккал/моль). С другой стороны, было отмечено, что эти две молекулы образуют значительное количество водородных связей и гидрофобных контактов с аминокислотными остатками активного центра. Кроме того, анализ, проведенный с помощью молекулярно динамического моделирования в течение 100 нс, подтвердил устойчивость связывания и конформацию молекул Pyr06 и Pyr07 в комплексах с рецептором 5J1E. Квантово химические расчеты DFT для обоих соединений, Pyr06 и Pyr07, также подтвердили их высокие показатели докинга и способность образовывать стабильные комплексы с РНКазой H.

Заключение. Полученные результаты могут оказаться крайне полезными для разработки соединений Pyr06 и Pyr07 в качестве потенциальных терапевтических препаратов для борьбы с РНКазой H обратной транскриптазы ВИЧ.

Введение. Матричные таблетки обладают большим потенциалом в качестве пероральной системы доставки лекарственного средства благодаря своей простоте, снижению риска системной токсичности и минимальной вероятности эффекта разделения дозы. Основываясь на дизайне экспериментов DoE, методология поверхности отклика охватывает генерацию полиномиальных уравнений и отклика в экспериментальной области для определения оптимального состава лекарственной формы. Традиционно разработчики подбирают оптимальные составы, изменяя одну переменную за раз, и этот метод отнимает много времени. Однако многие эксперименты не достигают своей цели, поскольку они не продуманы и не разработаны должным образом, и даже лучший анализ данных не может компенсировать отсутствие планирования. Поэтому важно понимать влияние переменных в составе фармацевтического продукта на качество, используя минимальное количество экспериментальных испытаний и переменных для разработки оптимизированного состава с помощью установленных статистических инструментов.

Цель. Разработка состава матричной таблетки модифицированного высвобождения на основе производного 3,6,9-триазатрициклотетрадекана с помощью методологии поверхности отклика

Материалы и методы. Объектом исследования является соединение – кандидат в лекарственное средство QM-25, производное 3,6,9-триазатрициклотетрадекана. Для разработки состава матричной таблетки на основе QM-25 применяли полный 2³-факторный эксперимент. Матричные таблетки были получены методом прямого прессования на ротационном прессе после надлежащего смешивания подходящих соотношений различных гидрофильных полимеров в качестве модификаторов высвобождения с другими вспомогательными веществами. С целью вычисления прочности на раздавливание приготовленных матричных таблеток использовался тестер твердости таблеток. Исследования высвобождения in vitro проводились на аппарате для растворения II «Лопастная мешалка» при 50 об/мин и температуре 37 ± 0,5 °C в две стадии для лекарственных препаратов 2 группы в соответствии с ОФС.1.4.2.0014 Государственной фармакопеи РФ XV издания. Полнота высвобождения состава через 2 ч 45 мин в % и твердость таблетки на раздавливание в Н были выбраны как отклики системы факторного плана. Для выбора оптимального состава и оценки влияния эффектов различных переменных на измеренные отклики было использовано уравнение математической модели, включающее независимые переменные и их взаимодействия для различных измеренных откликов, сгенерированных дизайном 2 3 . Аппроксимация данных и регрессионные параметры были вычислены с использованием встроенного модуля «Анализ данных» ПО Microsoft Excel. Для построения уравнения регрессии в ПО Microsoft Excel осуществлялось построение матрицы с помощью функции корреляции.

Результаты и обсуждение. Представлен алгоритм методологии поверхности отклика на основе регрессионной модели. Каждый коэффициент отклика пространства проектных параметров изучался на предмет его статистической значимости. Были выделены факторы, имеющие значения в интервале p < 0,05. С помощью регрессионной модели были установлены коэффициенты регрессии основных факторов, оказывающих влияние на высвобождение и прочность на раздавливание в уравнении модели, были выведены уравнения зависимости факторов от откликов, парное влияние количества альгината натрия и карбомера 940 на единицу лекарственной формы. Влияние основных эффектов (факторов) на исследованные составы было проанализировано с помощью пространства проектных параметров с визуализацией в трехмерном пространстве. Для выбора оптимального состава с желаемыми откликами был применен метод численной оптимизации, основанный на подходе получения желаемых значений, что позволило осуществить выбор оптимальных значений содержания вспомогательных веществ на единицу модельного состава лекарственной формы.

Заключение. С помощью метода проектирования – построения пространства проектных параметров – было изучено влияние множества параметров состава матричной таблетки с помощью небольшого количества экспериментов. Математическая связь между факторами Х и показателями отклика Y была установлена с помощью вычисленной модели регрессии для твердой лекарственной формы на основе производного 3,6,9-триазатрициклотетрадекана. Вычисленные факторные зависимости с помощью модели регрессии позволили установить оптимальный модельный состав твердой лекарственной формы с модифицированным высвобождением для дальнейших экспериментальных исследований, значения прочности на раздавливание которого находились в доверительном интервале, допустимом для таблеток с использованным диаметром пуансона, а результаты кинетики растворения демонстрировали характер поведения модифицированного высвобождения.

Введение. Водорастворимые полимеры, чувствительные к температуре, перспективны для использования в фармацевтической разработке для создания «умных» систем доставки лекарств.

Текст. В данной обзорной статье рассматриваются три группы термочувствительных полимеров: с нижней критической температурой растворения (LCST) и с верхней критической температурой растворения (UCST), а также полимеры, проявляющие оба типа поведения. В статье приведена их классификация, особенности разработки, примеры применения и модификаций для придания необходимых свойств.

Заключение. Полимеры с LCST- и UCST-поведением являются перспективными материалами для разработки термочувствительных систем доставки лекарственных средств, которые уже используются в биомедицине.

Введение. Сохранение основных параметров качества лекарственного средства (ЛС) – залог его успешного применения в клинической практике. Продуктивное использование результатов выявления и оценки рисков позволяет гарантировать эффективность и безопасность ЛС за счет предупредительных мер по выявлению и устранению потенциальных угроз для качества при его разработке и производстве.

Цель. Цель исследования – выявление критических точек технологического процесса получения лиофилизированной лекарственной формы соединения из класса индолокарбазолов ЛХС-1269 с использованием рискориентированного подхода.

Материалы и методы. Для анализа рисков в технологии получения лиофилизата на основе ЛХС-1269 применяли инструменты и методы анализа управления рисками, представленные в руководствах ICH Q8, Q9, Q10, Государственной фармакопеи РФ XV изд. и ГОСТР ИСО 31000-2019.

Результаты и обсуждение. При идентификации рисков производственного процесса выявлены основные критические параметры процесса и критические контрольные точки, среди которых наибольшее значение оказывают соблюдение режима растворения фармацевтической субстанции и вспомогательных веществ, фильтрации полученного раствора и его лиофилизации, а также контроль по основным показателям качества, характерным для лиофилизатов для парентерального применения.

Заключение. Применение выбранного подхода позволило выявить и оценить возможные риски для качества продукции на разных стадиях производства ЛС «ЛХС-1269, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций, 25 мг» и разработать стратегию по устранению или смягчению данных рисков и достижению необходимых целей, а именно получения качественного, эффективного и безопасного ЛС.

Введение. Кальций является ключевым макроэлементом, обеспечивающим минеральную плотность костей, функционирование мышечной и сердечно-сосудистой систем, а также участвует в ферментативных и нейротрансмиттерных процессах. Дефицит кальция широко распространен и ассоциирован с развитием остеопороза и других метаболических нарушений. Прием лекарственных препаратов кальция позволяет компенсировать его недостаток в организме пациентов и способствовать профилактике и терапии заболеваний. В контексте устойчивого развития возрастает интерес к разработке технологии выделения органических солей кальция из морских биоресурсов для получения лекарственных препаратов.

Цель. Разработать и сравнить технологии выделения органических солей кальция из отходов производства арктических креветок Pandalus borealis и оценить состав и чистоту полученных продуктов.

Материалы и методы. В качестве сырья использовали панцири варено-мороженых креветок Pandalus borealis, являющиеся отходом пищевого производства. Сравнили две технологии экстракции кальция: (1) прямую деминерализацию органическими кислотами (лимонной, яблочной, молочной) и (2) с предварительным обезжириванием сырья этанолом. Количественное определение кальция (Са) и других элементов проводили методом оптической эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (АЭС-ИСП). Для оценки безопасности рассчитывали коэффициент опасности (HQ).

Результаты и обсуждение. Установлено, что максимальный выход кальция достигается с использованием лимонной кислоты (153,0 ± 10,3 мг Са/г). Яблочная и молочная кислоты показали меньшую эффективность. Предварительное обезжиривание сырья снижало выход Са в среднем на 2,2 %, однако липидная фракция представляет интерес как источник каротиноидов и других природных липидов. Токсичные элементы (Pb, Cd, Ni, Cr, As) либо не детектировались, либо их концентрация была ниже предела количественного определения. Содержание сопутствующих элементов (Mg, Zn, Fe, Cu и Mn) было ниже токсичного уровня (расчетный HQ < 1). Употребление выделенных продуктов Са позволит обеспечить обогащение пищевого рациона некоторыми микроэлементами.

Заключение. Панцири арктических креветок являются ценным источником органического кальция для получения экологически безопасных и физиологически сбалансированных солей – цитрата, малата и лактата кальция. Полученные соли кальция не загрязнены токсичными элементами и могут использоваться в фармацевтической и пищевой промышленности.

Введение. Тирзепатид – это молекула, способная контролировать уровень глюкозы в крови за счет объединения двойного агонизма рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP) и глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1). GLP-1 и GIP – инкретиновые гормоны, участвующие в регуляции гликемии и энергетического обмена. Их комбинированная агонизация усиливает инсулиновый ответ, снижает секрецию глюкагона и аппетит, что делает ее эффективной стратегией при лечении сахарного диабета 2 типа (СД2) и ожирения. Специфическую биологическую активность таких соединений можно оценить in vitro на клеточных линиях, экспрессирующих рецепторы GLP-1R или GIPR.

Цель. Провести валидацию методики определения активации рецептора GLP-1R in vitro с использованием клеточной линии при стимуляции тирзепатидом в тесте «Кальциевые токи». Данный подход необходим для последующего исследования сопоставимости биоэквивалентных препаратов.

Материалы и методы. В качестве модели была применена генно-инженерная клеточная линия HTS163L, экспрессирующая человеческий рецептор GLP-1. Активацию рецептора регистрировали по изменению флуоресцентного сигнала, вызванного увеличением внутриклеточной концентрации кальция, после инкубации клеток с тирзепатидом в различных концентрациях. Валидация методики проводилась в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи РФ, ICH и EMA. Статистическую обработку полученных результатов проводили с применением программного обеспечения MARS (BMG LABTECH).

Результаты и обсуждение. Данная методика показала высокий уровень специфичности (сигнал плацебо <2 % от сигнала препарата), удовлетворительный предел количественного определения (сигнал превышает сигнал холостой пробы на 43 %), хорошую линейность (R² = 0,981), правильность (в пределах 77–119 % от номинального EC₅₀) и прецизионность (CV ≤ 5 % внутри серии, ≤15 % между сериями). Все исследуемые валидационные показатели соответствовали установленным критериям приемлемости, что подтверждает корректность выбранного подхода.

Заключение. Предложенный метод обладает высокой чувствительностью и воспроизводимостью, что делает его пригодным для функционального анализа биологической активности агонистов рецептора GLP-1, включая тирзепатид, в in-vitro-моделях.

Введение. В условиях цифровой трансформации и глобальной гармонизации регуляторных требований актуальным становится внедрение интегрированных систем управления качеством в клинических исследованиях на основе ICH E6(R3).

Цель. Провести сравнительный анализ ICH E6(R3) с международными стандартами (ISO, GAMP 5, PMBOK/APM-BOK) и оценить возможности их адаптации в российской регуляторной среде.

Материалы и методы. Выполнен систематический анализ нормативно-правовой базы РФ (Федеральный закон РФ № 61 от 12 апреля 2010 г., решение Совета ЕЭК 79 «Об утверждении Правил надлежащей клинической практики Евразийского экономического союза» от 03 ноября 2016, ГОСТ Р 52379-2005 «Надлежащая клиническая практика») и международных руководств (ICH, ISO, EMA, PMI, ISPE), а также научных публикаций за 2020–2025 гг. из Scopus и Web of Science.

Результаты и обсуждение. Установлено, что ICH E6(R3) требует перехода от реактивного контроля к проактивному управлению качеством через интеграцию рискориентированных подходов, цифровых технологий и междисциплинарных стандартов. В российском контексте выявлены пробелы в нормативном регулировании и недостаточная интеграция систем менеджмента качества.

Заключение. Для соответствия ICH E6(R3) российским регуляторным органам и организациям необходимо модернизировать внутренние процессы, внедрять RBQM (рискориентированный подход к качеству) и гармонизировать национальные требования с международными стандартами.

Введение. Разработка парентеральных депо-форм лекарственных препаратов с модифицированным высвобождением действующего вещества является критически важным направлением в терапии хронических заболеваний, таких как онкология, шизофрения и сахарный диабет. Эти формы обеспечивают повышенную приверженность лечению, поддержание стабильной концентрации в плазме крови и снижение частоты инъекций. Однако их создание сопряжено с технологическими и фармакокинетическими сложностями, включая нелинейное высвобождение действующего вещества и высокую межиндивидуальную вариабельность.

Цель. Систематический анализ и обобщение современных методологических подходов к математическому моделированию фармакокинетики парентеральных лекарственных препаратов с пролонгированным высвобождением.

Материалы и методы. Проведен целенаправленный поиск публикаций в базах данных PubMed, Google Scholar и Scopus за период 2015–2025 гг. с использованием булевых операторов и сочетаний ключевых слов. В обзор включены данные по клинически применяемым пролонгированным парентеральным формам, а также по полимерным носителям (PLGA, гидрогели, in situ гели, гибридные системы). Для иллюстрации инструментальных подходов рассмотрены компартментные ФК-модели, PBPK-модели и модели на основе методов машинного обучения.

Результаты и обсуждение. Обобщены характерные особенности фармакокинетических профилей парентеральных депо-форм, включающие фазы начального выброса, задержки, контролируемого высвобождения и позднего угасания, а также их взаимосвязь с физико-химическими свойствами носителя и лекарственного вещества. Показана связь вариабельности профиля с сочетанием технологических параметров (размер частиц, состав и архитектура полимера), места и способа введения, а также индивидуальными характеристиками пациента. Продемонстрированы возможности нелинейных смешанных эффектов, PBPK-подхода и моделей, основанных на машинном обучении, для описания меж- и внутрисубъектной вариабельности, проведения симуляций режимов дозирования и in silico оптимизации разработок. Сформулирована базовая система обыкновенных дифференциальных уравнений (ОДУ), отражающая последовательное высвобождение из разных фракций депо и последующее распределение и элиминацию препарата.

Заключение. Математическое моделирование фармакокинетики парентеральных пролонгированных форм является ключевым инструментом концепции MIDD (Model-Informed Drug Development), позволяющим интегрировать механистические знания о высвобождении, абсорбции и распределении с клиническими данными. Предложенная базовая структура ОДУ-модели может служить методологическим каркасом для разработки и адаптации моделей к конкретным препаратам, что способствует оптимизации состава лекарственной формы, режимов дозирования и сокращению объема дорогостоящих in vivo исследований.

Введение. Метформин – пероральное противодиабетическое средство с известным профилем эффективности и безопасности. В настоящее время появляется все больше данных о влиянии метформина на функции ЦНС в малых дозах, не связанных с гипогликемическим действием, с целью воздействия на процесс старения и сопутствующих возраст-ассоциированных заболеваний. Однако сведений о влиянии метформина на поведенческие характеристики и когнитивные функции здорового организма недостаточно.

Цель. Исследование влияния метформина в малых дозах на поведенческие характеристики и некоторые биохимические показатели сыворотки крови (уровень глюкозы, холестерина, липопротеинов низкой плотности (ЛПНП)) половозрелых крыс.

Материалы и методы. Исследование выполнено на 72 крысах-самцах линии Wistar массой 200–250 г. После 30-дневного введения метформина в дозах 35 и 70 мг/кг было проведено поведенческое тестирование. Для исследования влияния на процессы обучения и памяти применяли установку «Т-образный лабиринт», для изучения пространственной памяти – «Водный лабиринт Морриса». Установки «Приподнятый крестообразный лабиринт» и «Экстраполяционное избавление» применяли для оценки влияния метформина на состояние тревожности крыс. Для оценки влияния на физическую активность крыс применяли комплекс «Ротарод». Измерение биохимических показателей сыворотки крови крыс проводилось на автоматическом биохимическом анализаторе DIRUI CS-300B.

Результаты и обсуждение. Установлено, что 30-дневное введение метформина в обеих дозах (35 и 70 мг/кг) улучшало процессы обучения и памяти в тесте «Т-образный лабиринт» (р < 0,05). Кроме того, введение метформина в малых дозах (35 и 70 мг/кг) способствовало развитию анксиолитического эффекта в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт» и «Экстраполяционное избавление» (р < 0,05). Показано, что введение метформина (70 мг/кг) улучшало мышечную выносливость крыс в тесте «Ротарод» (р < 0,05) на фоне неизменного уровня глюкозы.

Заключение. Результаты проведенных исследований определяют направление дальнейшего исследования по изучению возможности применения метформина в дозах, не оказывающих гипогликемического действия, для коррекции тревожных и когнитивных нарушений при патологических состояниях ЦНС, в том числе в процессе физиологического старения.

Введение. Ожирение и его осложнения являются ведущей медико-социальной проблемой в России и во всем мире. Агути-мутантные мыши A^y/a используются в качестве модели моногенного ожирения, связанного с угнетением функции меланокортиновой оси. Так называемый меланокортиновый синдром включает не только разнообразные проявления метаболической дисфункции, но и ряд нейрокогнитивных нарушений, в настоящее время изученных сравнительно мало.

Цель. Целью работы являлась оценка кратковременной распознающей памяти у самцов и самок мышей A^y/a по сравнению с однопометниками дикого типа.

Материалы и методы. В исследование были взяты 8 самцов и 7 самок мышей C57Bl/6-A^y/a, а также 8 самцов и 7 самок их однопометников дикого типа (C57Bl/6-a/a) в возрасте 1 года. Состояние распознающей памяти оценивали путем последовательного выполнения тестов «Распознавание нового объекта», «Локация нового объекта», «Объект-на-месте» (ОНМ) и «Определение новизны объекта» (ОНО) с интервалом в 5 мин и 3 сут между попытками в одном тесте и между тестами соответственно. Для каждого теста рассчитывали индекс дискриминации (ИД) по конвенциональной формуле.

Результаты и обсуждение. Для мышей дикого типа обоих полов были получены положительные значения ИД во всех тестах. Самцы A^y/a имели сопоставимые результаты со своими однопометниками дикого типа во всех тестах, в то время как самки A^y/a демонстрировали статистически значимое снижение средних значений ИД в тестах ОНМ и ОНО (p < 0,05 для обоих). Такие изменения могут отражать нарушение аллоцентрической пространственной памяти и ассоциативного распознавания объектов, что может указывать на поражение медиальной префронтальной коры, дорсомедиального и/или соединяющего ядер таламуса. Специфичность наблюдаемых отклонений для самок A^y/a может быть связана с большей выраженностью системных и центральных метаболических нарушений, инсулинорезистентности и оксидативного стресса.

Заключение. Проведенными экспериментами установлено наличие нарушений высокоуровневых компонентов кратковременной распознающей памяти у самок агути-мутантных мышей C57Bl/6-A^y/a. Состояние других видов памяти, половозрастные различия и динамика мнестических нарушений у мышей A^y/a требуют дальнейшего уточнения. Особенности кратковременной распознающей памяти у самцов и самок мышей A^y/a необходимо учитывать при планировании и проведении доклинических исследований.

Введение. BBP2023 – новый лекарственный кандидат группы сиднониминов, обладающий церебральной вазодилатирующей активностью и прокогнитивными свойствами. Фармакологические эффекты BBP2023 обусловлены наличием активных метаболитов. Для проведения фармакокинетических исследований на доклиническом этапе необходимо разработать биоаналитическую методику определения BBP2023 и его метаболитов в плазме крови кроликов.

Цель. Разработка и валидация хромато-масс-спектрометрической методики количественного определения нового производного сиднонимина и его метаболитов в плазме крови кроликов.

Материалы и методы. Количественное определение BBP2023 в плазме крови кроликов проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В процессе пробоподготовки биоматериала применяли способ осаждения белков метанолом. Хроматографическое разделение проводили смесью деионизированной воды и ацетонитрила в градиентном режиме на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4,6 × 50 мм, 5 мкм, с помощью хроматографа Agilent 1260 Infinity II. Детектирование осуществляли в режиме MRM с использованием масс-спектрометра AB Sciex QTRAP 3200 MD. В качестве внутреннего стандарта применяли N-(этоксикарбонил)-3-(4-метилпентан-2-ил)сиднонимин.

Результаты и обсуждение. Разработана методика пробоподготовки плазмы крови кроликов, подобраны оптимальные условия хроматографирования и детектирования исследуемого соединения и его метаболитов. Биоаналитическая методика валидирована по следующим показателям: селективности, матричному эффекту, степени извлечения, переносу пробы, линейности калибровочного диапазона, нижнему пределу количественного определения, внутри- и межсерийной точности и прецизионности, а также стабильности аналитов и внутреннего стандарта на этапах анализа.

Заключение. Разработана и валидирована методика количественного определения нового производного сиднонимина BBP2023 и его метаболитов в плазме крови кроликов с применением ВЭЖХ-МС/МС. Подтвержденные аналитические диапазоны для BBP2023, BBP2023 А и BBP2023 С составили 5,0–500,0 нг/мл (5,0–1000,0 нг/мл для геранамина). Методика была использована при проведении аналитической части доклинического фармакокинетического исследования BBP2023 на кроликах.

Введение. Повышение выживаемости нейронов перинекротической зоны головного мозга является одной из многообещающих стратегий в комплексном лечении ишемического инсульта.

Цель. Изучение некоторых молекулярных механизмов повышения выживаемости популяции ГАМКергических нейронов головного мозга под действием 3-ЕА в ишемиеподобных условиях.

Материалы и методы. Изучено нейроцитопротекторное действие соединения гидроксипиридина 3-ЕА в сравнении с нимодипином. Провели серии экспериментов на живой 7–9-дневной нейроглиальной культуре гиппокампа крыс, содержащей ГАМКергические нейроны, экспрессирующие кальцийсвязывающие белки кальбиндин и парвальбумин, в ишемиеподобных условиях. Выживаемость нейронов определяли в цитохимической реакции с пропидия иодидом, кальциевую сигнализацию изучили с помощью фиксации флюоресцентного сигнала клеток, загруженных зондом Fura-2.

Результаты и обсуждение. 3-ЕА в концентрации 1 мМ на 25 % (р = 0,001) повышает выживаемость популяции ГАМКергических нейронов головного мозга крысы, экспрессирующих кальцийсвязывающие белки, и не уступает по этому параметру препарату сравнения нимодипину. Присутствие в среде культивирования 3-ЕА приводит к подавлению в среднем в 2,5 раза внутриклеточной концентрации кальция в клетках к 40-й минуте формирования ишемиеподобной среды.

Заключение. Соединение 3-гидроксипиридина 3-ЕА проявляет свойства нейроцитопротектора и сохраняет популяцию ГАМКергических нейронов, содержащих кальбиндин и парвальбумин, за счет подавления глутаматергической эксайтотоксичности и поступления кальция в цитозоль клеток. Вещество может рассматриваться как потенциальный кандидат в лекарственное средство.

Введение. Ввиду сохраняющейся тенденции роста количества пациентов с сердечно-сосудистыми патологиями и уровня летальности в данной нозологической группе актуальным направлением R&D-исследований является поиск и фармацевтическая разработка инновационных кардиотропных препаратов. Одним из таких препаратов является производное малоновой кислоты – этмабен, синтезированный в Санкт-Петербургском государственном химико-фармацевтическом университете (СПХФУ). Для проведения доклинических исследований необходимо наличие валидной биоаналитической методики, позволяющей с минимальными временными и ресурсными затратами количественно определять этмабен в сложных биологических матрицах.

Цель. Целью исследования является разработка и валидация методики определения этмабена в плазме крови и органах лабораторных крыс методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектированием (ВЭЖХ-УФ) с последующей апробацией и получением пула данных о распределении этмабена в органах и тканях экспериментальных животных.

Материалы и методы. Разработку и валидацию биоаналитической методики, а также определение количественного содержания этмабена проводили на жидкостном хроматографе Flexar (PerkinElmer, США), снабженном УФ-детектором и термостатируемым автодозатором, с использованием колонки Kromasil 100, 150 × 2,1, C8, 3,5 мкм (AkzoNobel, Нидерданды). Детектирование проводили при длине волны 270 нм. Фармакологический эксперимент для целей апробации методики проводили на 20 беспородных крысах-самцах (НИЦ «Курчатовский институт» – ПИЯФ – ПЛЖ «Рапполово», Россия), разделенных на группу контроля (интактные животные, n = 10) и группу экспериментальной хронической сердечной недостаточности (ХСН) (n = 10), модель которой индуцировали перевязкой левой коронарной артерии. Все животные в течение 30 дней получали этмабен внутрижелудочно в дозе 60 мг/кг. Для анализа на 30-е сутки у животных отбирали образцы цельной крови и изолировали органы (сердце, почки). В плазме крови и гомогенатах тканей проводили количественное определение этмабена методом ВЭЖХ-УФ после пробоподготовки, включающей осаждение белков ацетонитрилом (ос.ч., кат. № A/0626/17, Thermo Fisher Scientific, США).

Результаты и обсуждение. Разработаны оптимальные условия хроматографического определения этмабена в биологических матрицах (плазма крови и гомогенаты тканей) методом ВЭЖХ-УФ. Валидация разработанной методики проводилась по следующим валидационным параметрам: селективности, градуировочной кривой, правильности, прецизионности, нижнему пределу количественного определения (НПКО), эффекту переноса, отсутствию влияния разбавления образца, стабильности. Также оценивали степень извлечения этмабена из матрицы. НПКО этмабена составил 5,0 нг/мл. Разработанная методика была успешно применена для оценки распределения этмабена в органах и тканях лабораторных животных на отдельных этапах доклинического исследования. При ХСН концентрация этмабена в плазме крови возрастает в 2 раза, а в патологически измененном миокарде – на 47 % по сравнению с животными контрольной группы, при этом в тканях почки препарат не детектировался.

Заключение. Разработана и валидирована биоаналитическая методика определения этмабена методом ВЭЖХ-УФ, которая была апробирована на этапе доклинических испытаний препарата для изучения распределения в органах и тканях экспериментальных животных. Выявленное избирательное накопление этмабена в поврежденном миокарде подтверждает его терапевтическую релевантность для лечения ХСН.

Введение. Доступ к инсулину ограничен глобальными барьерами, среди которых ключевым является монопольное ценообразование транснациональных компаний-оригинаторов. Утрата патентной защиты открывает путь для производства биоаналогов – более доступных препаратов, сопоставимых по качеству, эффективности и безопасности. Императивом разработки биоаналогов является проведение комплексных исследований сопоставимости с оригинальным препаратом, включающих физико-химическую и биологическую характеризацию. Разработка программы исследований сопоставимости, а именно выбор атрибутов и ортогональных методов для изучения структуры и функциональной состоятельности молекулы инсулина, должна основываться на глубоком понимании структуры и свойств молекулы, а также на последних научных знаниях.

Цель. Провести физико-химическую и биологическую характеризацию препарата РинЛиз® (GP40011) в сравнении с оригинальным препаратом Хумалог® (инсулин лизпро) для установления их сопоставимости в рамках оценки биоаналогичности.

Материалы и методы. Первичную структуру белка подтверждали с помощью времяпролетной масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией и пептидного картирования. Структуры белка более высокого порядка были исследованы следующими методами: капиллярным изоэлектрофокусированием, методом Эллмана, круговым дихроизмом, флуоресцентной спектрофотометрией, динамическим рассеянием света. Сопоставимость профилей примесей исследуемых препаратов изучали с помощью методов эксклюзионной хроматографии и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Для характеризации функциональных свойств и биологической активности препаратов оценивали кинетику связывания с инсулиновыми рецепторами IR-A и IR-B, аутофосфорилирование инсулинового рецептора и проводили метаболические клеточные тесты («Захват глюкозы», «Инсулининдуцированный липогенез», «Ингибирование стимулированного липолиза»).

Результаты и обсуждение. По результатам оценки физико-химических свойств для препарата GP40011 была установлена высокая степень сходства с референтным препаратом Хумалог® по первичной структуре белка, структурам более высокого порядка, а также по профилю примесей. Оценка функциональных характеристик показала, что препараты GP40011 и Хумалог® имели идентичную кинетику связывания с инсулиновыми рецепторами IR-A и IR-B и демонстрировали сопоставимую биологическую активность.

Заключение. По результатам проведенного исследования была продемонстрирована полная аналитическая сопоставимость препаратов РинЛиз® и Хумалог®. Проведенное исследование внесло значимый вклад в научное обоснование эквивалентности биосимиляра РинЛиз® и референтного препарата Хумалог®, тем самым обеспечив надежную основу для успешной регистрации и последующего клинического применения.

Введение. Нейрогенеративное расстройство, известное как болезнь Альцгеймера, прогрессирует с течением времени, вызывая повреждение различных участков головного мозга. Ранолазин, производное пиперазина, представляет собой препарат второй линии для лечения аортального стеноза у пациентов со стабильной стенокардией, не реагирующих на иные лекарственные средства. Кроме того, фамотидин является соперником H2-рецепторов, снижающим секрецию желудочной кислоты и применяемым для лечения кислотного рефлюкса и язвы. На мышиных моделях ранолазин может способствовать защите мозга от проявлений, подобных болезни Альцгеймера и индуцированных скополамином.

Цель. Изучить потенциальные нейропротекторные свойства комбинированного применения ранолазина и фамотидина в смягчении симптомов болезни Альцгеймера на мышиной модели, индуцированной скополамином.

Материалы и методы. Эксперимент включал четыре группы по 10 мышей в каждой: контрольную группу, индукционную группу, получавшую скополамин в дозе 1 мг/кг внутрибрюшинно один раз в сутки в течение семи дней для воспроизведения симптомов болезни Альцгеймера; и группу с потерей памяти, не получавшую подобного препарата. Двум оставшимся группам мышей ежедневно перорально вводили следующие лекарственные средства: донепезил (5 мг/кг/сут) и комбинацию ранолазина (40 мг/кг/сут) с фамотидином (40 мг/кг/сут). После 14 дней профилактического приема препаратов была проведена индукция скополамином (1 мг/кг внутрибрюшинно один раз в сутки), при этом введение препаратов продолжалось ещё в течение одной недели. Исследование образцов ткани головного мозга включало гистопатологический анализ, определение воспалительных цитокинов и показателей оксидативного стресса (таких как концентрация ацетилхолинэстеразы), а также оценку поведенческих параметров (тест распознавания нового объекта и Y-образный лабиринт).

Результаты и обсуждение. Скополамин существенно ухудшил поведенческие показатели (Y-образный лабиринт 53,72, p ≤ 0,001), что было изменено применяемыми препаратами (донепезил: 67,58, p ≤ 0,001). Препараты значительно снижали выраженность окислительного стресса (MDA 1,65, p < 0,01) и воспаления (TNF-α 125,91, p ≤ 0,001) по сравнению с индукционной группой. Все группы, получавшие лечение, не имели значимых отличий от контрольной группы (p > 0,05). По сравнению с группой скополамина, комбинация ранолазина и фамотидина значительно улучшала поведенческие показатели и память, параметры окислительного стресса и уровни провоспалительных цитокинов. Однако значимого снижения концентрации ацетилхолинэстеразы в гомогенате головного мозга не наблюдалось.

Заключение. В данном исследовании ранолазин и фамотидин защитили мышей от индуцированных скополамином симптомов, подобных болезни Альцгеймера. Проведенное исследование показало, что антиоксидантное и противовоспалительное действие ранолазина и фамотидина может объяснить этот эффект.